一、用Percoll不连续密度梯度分离奶牛精液对控制性别比率的研究（论文文献综述）
郭海燕,张昊,李拥军,程国虎[1]（2016）在《性别控制技术及其在家畜生产中的应用》文中进行了进一步梳理繁殖力是畜牧生产中重要的经济指标,繁殖新技术对畜禽生产与繁殖起着巨大的推动作用。性别控制技术是繁殖新技术发展史上的一个重要里程碑。对性别控制技术及其在家畜生产中的应用进行了综述。
程丽芳[2]（2016）在《性别决定技术在银狐养殖产业中的应用研究》文中研究表明狐狸属于哺乳纲,食肉目,犬科动物。我国的狐狸养殖业主要分布在北方较寒冷的地区,如：河北、山东、内蒙古、东北等地。银狐又叫银黑狐,是赤狐的一种基因突变种,被毛呈黑白相间,且有一层雾状形的针毛,是人们饲养的珍贵毛皮动物主要品种之一。安徽省皖北有多家狐狸养殖企业,这些企业在狐狸养殖过程中,一般采用的是自然繁殖的方式,狐狸发情期短,一年只有两个个月左右的发情期,并且繁殖率低,每胎只能产2-3只后代,自然繁殖方式难以满足狐狸养殖产业高速扩大再生产的需要。随着人工授精技术的发展,授精技术越来越成熟,虽然繁殖率得到了大大的提高,但相比貉子等皮毛动物产率仍然低很多,加之保胎也困难很多,怎样提高养狐业的繁殖率,这是最受人们关注的。养殖产业中母狐的需求量往往不能被满足,提高母狐的产量是养殖厂扩大再生产的关键。如果能在受精前做好性别分离,将会大大节约资源和时间,提高性别控制与鉴定和胚胎移植的效率。本文以皖北银狐为研究对象,探究皖北银狐精子发生的过程与季节影响、皖北银狐的精液品质、提高精子常温液态保存效果、输精前对X精子进行筛选,从这几环节来提高狐狸的繁殖率,最终通过动物实验,将性别决定技术应用在银狐养殖产业。为银狐人工繁殖受精率奠定基础,进而满足狐狸养殖产业扩大再生产的需要。通过研究得出的结论主要有以下几个方面：1.分析了季节对皖北地区银狐精子发生的影响,表明精子发生呈现典型的季节性,从而确定了采集公狐精液的最佳时间段。以9月、11月、次年1月份的银狐睾丸为研究对象,测量睾丸的重量、体积等基础形态参数以及采用酶联吸附实验测睾丸中睾酮的含量。利用组织切片技术分析曲细精管中各类生精细胞的组成及比例。结果：9月、11月、次年1月银狐睾丸的重量分别为0.896±0.002g、3.365±0.081 g、5.241±0.100 g,体积分别为1.215±0.036 cm3、5.558±0.794cm3、14.112±2.8543 cm3,睾酮含量分别为1.215±0.036μg、5.558±0.794μg、14.112±2.8543μg。结果表明,不同月份银狐睾丸的体积、重量以及睾酮含量有显着差异（P<0.05）,并且睾丸中睾酮的含量与重量的变化呈正相关,相关系数为0.991。切片上曲细精管中生精细胞的组成、数量随着季节变化也呈现不同,差异性显着（P<0.05）。2.从分析皖北银狐精液品质入手,配制了一种安全、高效、经济的银狐精子稀释液,延长了精子在体外的存活时间,提高了人工授精时母狐的受孕率和单胎产胎数。结果显示,皖北银狐的射精量在0.5-1.5 m1/次,精子密度在5亿/ml左右。母狐子宫的精子容纳量为0.5 m1左右。实验证明将精液进行稀释,稀释5倍左右并不会对受孕率以及受孕胎数造成影响,而稀释液质量的好坏则直接影响精子的活率和活力,进而影响银狐繁殖率。本研究配制了一种优质银狐常温保存的精子稀释液。以貂、人等其他动物精子稀释液成分为基础,配制出三种液态保存精子稀释液,在细胞水平上观测稀释液的保存效果,确定了最优的配方配制方法：配制100 m1稀释液,称量三羟甲基氨基甲烷2.13 g、柠檬酸1.24 g、D果糖0.71g、双蒸水80 ml、卵黄液10 ml、Ham’s F-10 10ml和青霉素7万IU,混合均匀。实验组15只母狐用本稀释液稀释精液受孕,平均产下的小仔数为6.5±1.5只；对照组使用养殖场购买的稀释液,185只母狐平均产仔数为4.5±1.5只,差异显着。结果表明用本精液稀释液来稀释精液,银狐可以产出更多的后代。3.建立起一种优选的X精子分离技术,取得了一定成效,提高了雌雄比例,为提高狐狸的繁殖率提供了依据。以银狐为研究对象,利用优化的梯度离心沉积法分离X精子,再在细胞水平上鉴定X精子的比率,最后进行人工授精使母狐受孕。通过产下的狐狸小仔数以及性别比例与常规人工授精方法做比较。利用本性别决定技术分离出的X精子,给10只母狐人工授精后,产出72只后代,其中雌性后代61只,占总后代数的84.7%,对照组雌性后代占51.6%。
张夙夙[3]（2014）在《哺乳动物XY精子分离技术的研究》文中研究表明近几十年来人们对动物的性别控制进行了大量的研究,其中X精子和Y精子的分离技术被广泛应用于哺乳动物性别的控制。论述了哺乳动物X精子和Y精子分离的方法,并简述了X精子和Y精子分离技术存在的问题及其发展前景。
赵万乐[4]（2013）在《抗奶牛Y精子蛋黄抗体的提取及其对奶牛精子作用效果的研究》文中认为本试验用经流式细胞仪分离的奶牛Y精子制成抗原去免疫产蛋母鸡，分离免疫蛋中的蛋黄抗体，并用分离的蛋黄抗体与奶牛鲜精液互作，观察其对精子的作用效果。本试验一共分为三个部分：试验一：蛋黄抗体提取方法的选择。用水稀释法、氯仿法和辛酸法三种提取方法，分别对经鸡精子抗原免疫的鸡蛋黄液进行卵黄抗体（YAb）提取，并对提取的YAb用鸡精子进行滴度测定并用紫外分光光度法测定IgY含量，计算得率。结果显示：水稀释法获得的YAb提取量为46.667ml±4.393ml，极显着高于辛酸法的21.000ml±4.393ml和氯仿法的17.333ml±4.393ml（p<0.01），辛酸法和氯仿法的提取量差异不显着（p>0.05）；水稀释法、辛酸法、氯仿法提取的YAb抗体效价分别为16.000±6.855、21.333±6.855、18.167±6.855，差异不显着（P>0.05）；水稀释法提取YAb溶液抗体损耗率为12.490%±11.218%，显着低于氯仿法（p<0.05）。三种方法提取液中IgY含量和IgY得率分别为：水稀释法：IgY含量为92.7220±1.7043mg，得率为87.48%±2.52%；辛酸法：IgY含量为90.3700±1.1406mg，得率为87.44%±2.03mg%；氯仿法：IgY含量为90.8440±1.6108，得率为87.76%±2.18%。含量和得率差异均不显着且均满足生产要求。提取液在4～8℃保存8个月，物理性状不变，无菌污染，并且抗体效价无明显的降低。试验二：鸡抗奶牛Y精子蛋黄抗体的制备。用洗涤后的奶牛Y精子与免疫佐剂1:1混合去免疫产蛋母鸡，收集免疫蛋。用水稀释法进行卵黄抗体（YAb）的分离。对提取的YAb用奶牛Y精子进行滴度测定，并对提取样品进行抗体含量、得率以及提取前后抗体效价损耗率进行测定。结果表明卵黄中含有与奶牛Y精子作用的有效抗体（IgY），并且能使精子发生凝集现象。水稀释法提取后抗体得率为88.380%，抗体效价损耗率为12.490%。试验三：鸡抗奶牛Y精子蛋黄抗体对奶牛精子活率及形态学完整性的影响。本试验先将抗体样品按逐步稀释法用生理盐水进行稀释，稀释成不同比例，然后将稀释好的抗体样品与新鲜的牛精液按1:1的比例混合，以生理盐水和牛精液1:1混合作为对照，观察不同稀释比例对牛精子活率的影响；然后将试验组和对照组的精液进行抹片、染色，观察不同稀释比例对牛精子畸形率的影响。然后取新的抗体样品，用生理盐水将其1:1稀释，在与牛精液1:1进行混合，同样以与牛精液1:1混合的生理盐水作为对照，观察混合后不同时间对精子活率的影响，并对每一时间点的精液进行抹片、染色，观察不同时间对精子畸形率的影响。结果表明：当抗体稀释比例为1:1和1:2时，精子活率分别为0.2125±0.0250和0.2750±0.0289，均极显着显着小于对照组精子活率0.5875±0.0250（P<0.01），畸形率分别为34.52%±0.68%和33.50%±0.56%，均极显着大于对照组26.90%±0.46%，由此说明所提取的IgY样品对奶牛精子的活率和畸形率均有影响，当稀释比例为1:64时，精子活率和畸形率与对照组的差别均不显着（P>0.05），说明只有当IgY样品浓度达到一定时才能发生免疫作用；在混合后马上测得的精子活率及畸形率与对照组差别不大，但10min后试验组所测得的精子活率及畸形率分别为0.2875±0.0250和34.78%±0.96%，与对照组在此时的精子活率及畸形率差异均极显着。
杨阳[5]（2013）在《安徽省奶牛性控冻精应用效果调查及评估》文中研究表明奶牛性别控制是通过人为操作，使母牛根据人们的需要繁殖后代的生物技术。奶牛性别控制技术具有提高繁殖效率，增强选种强度，增加良种奶牛数量，加快遗传育种进程，提高牛群质量等优点。为了评估奶牛性控冻精的应用效果，本研宄对安徽省使用性控冻精的38家奶牛场进行全面调查，并选择规模较大、使用性控冻精时间最长的奶牛场作为重点调查对象。通过分析性控冻精的受胎率、母犊率、所产后代的生长发育情况及产奶性能，对全省范围奶牛性控冻精应用效果进行评估，主要结果如下：⑴截止2012年底，安徽省共有34家奶牛场已经开始使用性控冻精，其中在产母牛存栏数在100-500头之间的有18家，存栏在产母牛数在500头以上的有16家。性控冻精来源包括自主米购和政府米购。⑵性控冻精情期受胎率与同期常规冻精情期受胎率分别为49.38%和63.62%，两者差异极显着（P<0.01）。⑶性控冻精母犊率与同期常规冻精母犊率分别为92.50%和48.79%，差异极显着（P<0.01）。⑷性控冻精所产犊牛初生重低于同期常规冻精所产犊牛初生重，分别为34.70kg和37.28kg，差异显着（P<0.05）;性控冻精与同期常规冻精所产犊牛6月龄体重分别为190.02kg和189.03kg，差异不显着（P>0.05）。（5）性控冻精所产犊牛与同期常规冻精所产犊牛305天的成年当量分别为8599.77kg和8278.07kg，差异不显着（P>0.05）;性控冻精所产犊牛与同期常规冻精所产犊牛的乳脂率、乳蛋白率、体细胞数分别为3.44%和3.24%、3.32%和3.2%、18.64万/ml和11.9万/ml，差异均不显着（P>0.05）。（6）使用性控冻精青年牛的情期受胎率高于经产牛的情期受胎率，分别为67.10%和33.10%，差异极显着（P<0.01）。（7）不同奶牛场青年牛性控冻精情期受胎率差异极大，最高为84.21%，最低只有30.00%。⑶不同来源的性控冻精应用效果存在差异，山东奥克斯生物技术公司生产的性控冻精情期受胎率高于北京奶牛中心生产的性控冻精，分别为53.94%和46.75%，但差异不显着（P>0.05）。⑶从性控冻精母犊率，性控冻精所产母牛的生长发育和产奶性能来看，奶牛性控冻精应用效果良好，但是性控冻精受胎率较低，性控冻精使用的综合经济效益分析有待相关数据完备后再作分析。
杨阳,刘旭光,杨漫漫,刘亚[6]（2013）在《性控冻精技术及其在奶牛中的应用》文中认为综述了X和Y精子分离技术的发展历程和研究进展、性控冻精在我国奶牛业中应用的效果和影响应用效果的主要因素。性控冻精技术日渐成熟,且已在奶牛业中得到了广泛的商业化应用。性控冻精的母犊率极显着高于普通冻精的母犊率,受胎率略低但差异不显着。影响性控冻精应用效果的主要因素包括:性控冻精输精母牛情期受胎率的高低与母牛的胎次、输精时间和输精部位等。
赵雪[7]（2012）在《奶牛性别控制技术研究》文中进行了进一步梳理胚胎性别鉴定技术和性别控制技术为哺乳动物胚胎工程核心技术之一，该技术的优化和成熟，对胚胎工程技术在生产实践上的广泛应用具有重要的经济意义。本研究通过对奶牛胚胎体外生产过程中多个环节进行优化进行性别控制。包括（1）利用不同免疫方式免疫动物，制备高效价H-Y抗体，筛选雌性胚胎；（2）优化胚胎体外生产（IVP）技术关键条件，包括卵母细胞体外成熟条件、性控精液的分离方法、性控精液的密度、胚胎的体外培养液挑选等环节；（3）研究了卵巢输送时保存温度对卵母细胞的回收、成熟、性控精液体外受精、胚胎发育及两种应激基因Hsp70.1和Bax在囊胚中的表达的影响；（4）研究胚胎性别控制技术联合胚胎冷冻技术对牛胚胎体外发育、胚胎质量及其牛犊出生率的影响等研究。得到如下结果与结论：（1）利用免疫动物制备H-Y抗原抗体，与早期胚胎共培养筛选雌性胚胎，结果表明4-8Cell胚胎采用H-Y抗原抑制的方法不能进行准确的性别鉴定，桑葚胚采用H-Y抗原抑制的方法雌性胚胎的PCR验证结果为81.5%，说明选择性阻滞胚胎发育为一种比较可靠雌性胚胎选择的方法。（2）EGF和IGF-Ⅰ联合应用能够促进牛卵母细胞的体外成熟，提高IVF胚胎的体外发育能力；Percoll梯度离心法与上浮法的精子IVF胚胎的发育能力差异不显着（P>0.05）；0.5×106个/ml的精子密度比较适合，可提高性控精液的利用率；mSOF和G1/G2更适合与性控精液IVF胚胎的培养，其中G1/G2是商品化培养液，效果稳定；利用最优化的条件，比较性控精液与普通精液IVF胚胎发育率，发现X精子、Y精子和未分离精子的卵裂率和囊胚率无显着差异， X精子IVF胚胎雌性率为89.9%（62/69），未分离精子雌雄比例为47.9：52.1。（3）卵巢运输温度对性控精液的体外受精率及受精后胚胎的发育有显着的影响。卵巢在35°C保存3-4h显着降低了A、B级卵母细胞的回收率，卵母细胞的成熟率、性控精液的受精率及囊胚的发育率，同时第七天囊胚内的细胞凋亡率及Hsp70.1和Bax的表达显着升高。来源于25°C保存卵巢的卵母细胞受精率显着高于其它两组。（4）性控精液获得的IVF胚胎冷冻后，其复活率和24h孵化率，同对照组相比差异不显着,但非性控精液的IVF冷冻胚胎解冻后，48h的孵化率高于性控组。两组囊胚的细胞凋亡率没有显着性差异。两组囊胚内细胞团细胞与滋养层细胞数之间的比例分别为0.26±0.13和0.24±0.09，二者差异不显着。性控胚胎和非性控胚胎移植后的妊娠率、出生率以及性控效率差异不显着。
邱海芳,刘炳义,刘榜,陈飞[8]（2010）在《性别控制技术在家畜育种中的应用》文中认为家畜性别控制是当今生物学领域的重大研究课题之一。近年来,性别控制技术的研究取得了可喜的进展。作者综述了国内外家畜性别控制的生物学机制、途径、方法及存在的问题和发展前景,为性别控制技术在家畜实际生产中的广泛应用提供理论基础。
赵鑫[9]（2010）在《性别控制技术在奶牛生产中的应用与效果分析研究》文中研究指明性别控制技术为优良种畜的快速繁育以及扩大母畜的利用率起到很大的促进作用,将性别控制与胚胎移植技术相结合,不但可以加快畜牧业产业化的进程,也可以提高企业和养殖户的经济效益。本研究采用性控精液与常规精液对奶牛情期受胎率进行比较,并对性控精液在奶牛情期受胎率以及性控精液在奶牛胚胎移植中的应用进行了研究。实验一输精部位对奶牛性控精液情期受胎率的影响选择有1-2个正常发情周期的青年奶牛97头,其中对41头奶牛进行子宫角浅部输精,对56头奶牛进行子宫角深部输精。结果表明：奶牛子宫角浅部输精和子宫角深部输精受胎率分别为63.4%和64.2%,两者差异不显着（P>0.05）。实验二年龄对奶牛性控精液情期受胎率的影响对健康、无繁殖疾病的62头成年奶牛和有1-2个正常发情周期的56头青年奶牛进行性控精液的人工授精。结果表明,成年牛的情期受胎率为46.8%,青年牛的情期受胎率为62.5%,两者差异显着（P<0.05）。实验三性控精液和常规精液对奶牛情期受胎率的影响本实验比较了性控精液与常规精液对青年奶牛,以及性控精液与常规精液对成年奶牛的情期受胎率；结果表明,青年奶牛：性控精液组与常规精液组的情期受胎率分别为62.5%与64.7%,两者差异不显着（P>0.05）；成年奶牛：性控精液组与常规精液组的情期受胎率分别为43.54%与53.2%,两者差异显着（P<0.05）。实验四性控精液与常规精液对奶牛超排效果影响对130头青年牛分别进行性控精液与常规精液的超排处理,其中对常规精液组平均回收胚数、平均可用胚数（11、5.35）与性控精液组（12、5.04）比较,差异不显着（P>0.05）。可用胚胎率常规精液组与性控精液组（53.54%vs42.02%）比较,差异不显着（P>0.05）。未受精率两组差异显着（14.16%vs25.62%）（P〈0.05）。实验五黄体等级对性控胚胎移植受胎率的影响A级黄体的胚胎移植妊娠率为50.79%,B级黄体的胚胎移植妊娠率为48.28%,C黄体的胚胎移植受胎率为47.22%,三者之间无显着差异（P）0.05)；但结果表明,移植成功率随黄体级别等级的下降而降低。实验六性控胚胎与常规胚胎对奶牛的胚胎移植效果和产犊效果的影响对362头受体分别进行性控胚胎与常规胚胎的移植,性控胚胎组（136头）与常规胚胎组（226头）移植受胎率分别为50.73%和51.75%,两者的受胎率差异不显着（P>0.05）。常规胚胎组和性控胚胎组的产犊率分别为92.3%和89.9%,差异不显着（P>0.05）。常规胚胎组、性控胚胎组的流产率分别为7.6%和10.1%,差异不显着（P>0.05）。性控胚胎组的母犊率（95.2%）极显着高于常规胚胎组（49.1%） （P<0.05）。
高庆华[10]（2009）在《精子流式分离和低剂量授精研究及XY精子差异表达基因筛选》文中研究指明流式细胞高速分选术是被生产的后代证实有效的性别控制技术,可以获得高纯度的X、Y精子。该方法基于X和Y精子染色体DNA含量差别,采用活细胞荧光染料与精子DNA结合,分选获得活精子,随后用于子宫内人工授精或性控胚胎移植。分选冷冻精液低剂量人工授精在牛已被证明是一种有效的手段,能够生产表观正常的后代。而对其他物种、甚至人类,研究改进其精液分选和授精将促进该技术的推广应用,流式细胞分选的X和Y精子同时也是寻找其他性别控制方法的良好研究材料。本研究旨在将精子专用高速的流式细胞分选技术用于梅花鹿、马鹿和山羊,初步建立了梅花鹿、马鹿和山羊分选精液的低剂量授精技术体系和进一步对高纯度分选奶牛精液采用扣除杂交筛选,初步获得牛XY精子间的差异表达基因。获得如下结果:1.对16头种公马鹿电刺激采精,筛选比对天鹿3号稀释液的冷冻方法和甘油浓度,经冷冻处理,液氮保存,对冷冻精液品质和受胎效果进行评定。结果表明:马鹿对电刺激采精有耐受性,麻醉保定的采精频率每周2次最佳。甘油浓度6%的天鹿3号稀释液冷冻效果最优,细管冻精活率48.14±13.15%,顶体完整率为56.34±14.84%,126头诱导同期发情和107头自然发情马鹿人工授精的情期产羔率分别达到50.80%和78.50%。2.对电刺激或假阴道采集的马鹿、梅花鹿和山羊精液运输后流式分选、冷冻和低剂量授精。（1）马鹿X、Y精子纯度分别为93. 1%和95. 2%,解冻活率为46±5%和43±5%与常规对照精子活率43±6%没有明显差异,采用分选的106个有效精子对同期化发情的母鹿通过直肠把握授精生产15头性控后代,两性后代性别符合率均为100%,初生重和85d重及妊娠期与对照组比较均没有显着差异。（2）梅花鹿XY精子纯度分别为91.2%和94.1%,活率为45±4%和43±3%与常规对照精子活率43±4%没有明显差异,采用分选的106个有效精子对同期化发情的母花鹿通过腹腔镜授精生产20头性控后代,雌性后代性别符合率100%（5/5）,雄性为92.9%（14/15）。初生重和85d重及妊娠期与对照组比较均没有显着差异。（3）萨能奶山羊XY精子纯度分别为94.4%和96. 2%,解冻活率为43±4%和42±4%,通过腹腔镜用分选的106个有效Y精子对同期化发情的母羊优势卵泡侧子宫角输精,生产出4头雄性后代,性别符合率为100%。初生重和70d重及妊娠期与对照组比较均没有显着差异。采用分选的低剂量106个有效精子通过腹腔镜或直肠把握子宫角授精可以生产健康的马鹿、梅花鹿和山羊的预知性别后代。3.流式细胞分选的冷冻马鹿精子对超数排卵供体采用直肠把握方法单次子宫体输精（对照组108有效精子,n=6;未分选组107有效精子,n=6;Y精子组107有效精子,n=6）,成功生产出可供移植的性控雄性胚胎25枚;建立了一种有效的基于牙釉质基因DNA序列片段巢式扩增分析的胚胎性别鉴定的方法,对15枚常规马鹿胚胎样本（未分选精液授精）性别鉴定为8M:7F,4枚性控胚胎（分选Y精液授精）全部为雄性;移植后常规胚胎组受胎率（47.6%,20/42）和雄性胚胎组（42.9%,8/21）的差异不显着,雄性胚胎组的8头后代全部为雄性,明显偏离常规胚胎组11M:9F的后代性别比。4.采用Trizol结合E.Z.N.A.TM Total RNA kitⅡ离心层析柱方法对上游纯化的奶牛细管冷冻精子总RNA在2h内提取得到总RNA,OD260:OD280比值1.8,产量0.92μg/107精子,纯化精子总RNA的23SrRNA、Lep和Sry基因片段的RT-PCR产物电泳均获得目的条带且没有污染体细胞18S rRNA,可以用于后续的精子基因表达方面的研究。5.用流式细胞术分离的高纯度牛X精子和Y精子作为材料,在固相支持物磁珠上进行Y精子对X精子扣除杂交以富集性别差异表达基因,对扣除得到的Y-X差异mRNA采用Super SMART技术扩增,构建Y-X扣除杂交cDNA质粒库;克隆菌落PCR鉴定后,对27个有插入片段的克隆测序,BLAST分析均可以搜索到匹配的牛基因组序列,在线分析测得序列的同源性,结果比对上高度同源的4个EST序列,其中1个为牛已知Sry基因,3个为牛未知基因。
二、用Percoll不连续密度梯度分离奶牛精液对控制性别比率的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、用Percoll不连续密度梯度分离奶牛精液对控制性别比率的研究（论文提纲范文）
（1）性别控制技术及其在家畜生产中的应用（论文提纲范文）
| 1 性别控制技术 |
| 1.1 性别控制技术的发展基础 |
| 1.2 性别控制的方法 |
| 1.2.1 X与Y精子分离的方法。 |
| 1.2.1. 1 流式细胞仪分离法。 |
| 1.2.1. 2 免疫学分离法。 |
| 1.2.1. 3 其他常见的分离方法。 |
| 1.2.2 早期胚胎的性别鉴定。 |
| 1.2.2.1核型分析法。 |
| 1.2.2. 2 X-相关酶法。 |
| 1.2.2. 3 免疫学法。 |
| 1.2.2. 4 SRY-PCR法。 |
| 2 性别控制在家畜生产中的应用 |
| 2.1 流式细胞仪在家畜生产中的应用 |
| 2.2 SRY-PCR技术在家畜生产中的应用 |
| 3 小结 |
（2）性别决定技术在银狐养殖产业中的应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 1 狐狸 |
| 1.1 银狐的起源 |
| 1.2 银狐的生物学特性 |
| 2 性别决定技术概述 |
| 2.1 性别决定在银狐养殖业的意义 |
| 2.2 性别决定技术的发展 |
| 3 研究的目的、意义和方法 |
| 3.1 研究的目的和意义 |
| 4 研究内容 |
| 4.1 实验基地 |
| 4.2 研究内容 |
| 4.3 研究特点 |
| 第一章：季节对银狐精子发生的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 试剂及仪器设备 |
| 1.3 睾丸获取 |
| 1.4 睾酮的测定 |
| 1.5 石蜡组织切片 |
| 1.6 数理统计 |
| 2 结果 |
| 2.1 睾丸体积及重量 |
| 2.2 睾丸中睾酮的含量 |
| 2.3 曲细精管中生精细胞的分布 |
| 2.4 附睾中精子数量 |
| 3 讨论 |
| 第二章：银狐精液参数测定及精子稀释液配制 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 银狐精液参数 |
| 2.2 不同精液稀释液体外对精子活率的影响 |
| 2.3 精液稀释液的人工授精效果检测 |
| 3 讨论 |
| 第三章：银狐X精子分离及在产业化中的基础应用研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验地点 |
| 1.2 精液采集 |
| 1.3 实验材料与配制方法 |
| 1.4 精液参数的常规分析 |
| 1.5 流式细胞术分离X精子 |
| 1.6 密度梯度离心分离X精子 |
| 1.7 X精子占比分析 |
| 1.8 人工授精 |
| 1.9 数理统计 |
| 2 结果 |
| 2.1 流式细胞术分离X精子 |
| 2.2 密度梯度离心分离出X精子的占比 |
| 2.3 人工授精 |
| 3 讨论 |
| 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
（3）哺乳动物XY精子分离技术的研究（论文提纲范文）
| 1 离心分离法 |
| 2 免疫学分离法 |
| 3 流式细胞分离法 |
| 4 化学药品处理法 |
| 5 结语 |
（4）抗奶牛Y精子蛋黄抗体的提取及其对奶牛精子作用效果的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Summary |
| 第一部分 文献综述 |
| 1 抗体 |
| 2 抗精子抗体 |
| 2.1 抗精子抗体产生的机制 |
| 2.2 抗精子抗体的作用 |
| 2.3 抗精子抗体的分类 |
| 2.4 抗精子抗体的检测方法 |
| 2.5 抗精子抗体的免疫效应 |
| 3 鸡卵黄抗体 |
| 3.1 IgY的形成与结构 |
| 3.2 IgY的理化性质 |
| 3.2.1 热稳定性 |
| 3.2.2 酸碱的稳定性 |
| 3.2.3 对蛋白酶的敏感性 |
| 3.2.4 IgY的抗高压性 |
| 3.2.5 储藏的稳定性 |
| 3.2.6 对反复冻融的稳定性 |
| 3.3 IgY的免疫学特性 |
| 3.4 试验动物的选择和鸡体的免疫 |
| 3.4.1 母鸡的选择 |
| 3.4.2 鸡体的免疫 |
| 3.5 IgY的分离与纯化 |
| 3.5.1 IgY的分离 |
| 3.5.2 IgY的纯化 |
| 3.6 IgY的优点及缺陷 |
| 3.7 IgY的应用及开发前景 |
| 3.7.1 IgY作为免疫治疗剂 |
| 3.7.2 用 IgY进行免疫检测诊断研究 |
| 3.7.3 IgY在食品工业中的应用 |
| 3.7.4 其他方面的应用 |
| 3.8 IgY在应用过程中应注意的问题 |
| 4 关于精子分离的国内外现状 |
| 4.1 流式细胞仪分离 X、Y 精子的方法 |
| 4.2 H-Y 抗原免疫法 |
| 4.3 精子分离纯度的检测 |
| 5 奶牛性别控制的研究 |
| 5.1 性别控制的途径 |
| 5.2 免疫学方法控制奶牛性别的研究 |
| 6 精子抗原研究进展 |
| 7 本课题的研究背景 |
| 8 本课题的研究目的 |
| 第二部分 实验部分 |
| 第一章 不同方法提取鸡卵黄抗体的比较 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 抗原的制备 |
| 1.2 主要仪器设备及试剂 |
| 1.3 试验动物及免疫程序 |
| 1.4 IgY的提取 |
| 1.5 提取液的检测 |
| 1.6 保存期测定 |
| 1.7 数据处理 |
| 2 试验结果及讨论 |
| 2.1 三种方法化学试剂用量及所得提取液总量的比较 |
| 2.2 不同方法所得提取液物理性质的比较 |
| 2.3 不同提取方法提取量、抗体效价、抗体损耗的比较 |
| 2.4 不同提取方法 IgY含量及得率测定结果 |
| 2.5 保存期测定 |
| 3 结论 |
| 第二章 鸡抗奶牛 Y 精子蛋黄抗体的制备 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验用产蛋鸡 |
| 1.2 精子样品 |
| 1.3 仪器和试剂 |
| 1.4 精子免疫原的制备 |
| 1.5 免疫 |
| 1.6 IgY提取 |
| 1.7 精子凝集试验以及抗体效价的评定 |
| 1.8 IgY含量及回收率的测定 |
| 1.9 提取前后抗体效价及效价损耗率测定 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 抗奶牛 Y 精子 IgY与奶牛 Y 精子的凝集实验 |
| 2.2 抗体对精子的凝集情况 |
| 2.3 抗体滴度随免疫时间的变化关系 |
| 2.4 IgY含量、得率及抗体损耗、损耗率测定结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 鸡抗奶牛 Y 精子蛋黄抗体对牛精子活率及形态学完整性的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 抗体样品及精液样品 |
| 1.2 抗奶牛 Y 精子蛋黄抗体对奶牛精子活率的影响 |
| 1.3 抗奶牛 Y 精子蛋黄抗体对奶牛精子形态学完整性的影响 |
| 1.4 数据处理 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 不同稀释比例对精子活率的影响 |
| 2.2 混合后不同时间对精子活率的影响 |
| 2.3 不同稀释比例对精子畸形率的影响 |
| 2.4 稀释后不同时间对精子畸形率的影响 |
| 2.5 牛精子畸形的几种类型 |
| 3 讨论 |
| 3.1 鸡抗奶牛 Y 精子 IgY对牛精子活率的影响 |
| 3.2 鸡抗奶牛 Y 精子 IgY对牛精子畸形率的影响 |
| 4 小结 |
| 第三部分 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 导师简介 |
（5）安徽省奶牛性控冻精应用效果调查及评估（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 插图(表)清单 |
| 文献综述 |
| 1 动物性别控制技术研究进展 |
| 1.1 动物性别控制的途径 |
| 2 XY精子分离技术的研究进展 |
| 2.1 XY精子分离的原理 |
| 2.2 XY精子分离的方法 |
| 3 流式细胞仪的研究进展 |
| 3.1 流式细胞仪分离法的发展历史与现状 |
| 3.2 流式细胞仪分离精子的原理 |
| 3.3 流式细胞仪分离精子存在的缺陷 |
| 4 性控冻精在奶牛业上的研究进展 |
| 4.1 奶牛性控冻精的应用效果 |
| 4.2 影响奶牛性控冻精受胎率应用效果的研究进展 |
| 5 安徽省奶牛养殖业发展现状 |
| 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 调查对象的确定 |
| 1.2 调查分析内容 |
| 1.3 调查收集的数据资料 |
| 1.4 调查分析方法及工作安排 |
| 1.5 性控冻精的来源 |
| 1.6 相关指标 |
| 1.7 性能测定方法 |
| 1.8 统计分析方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 安徽省奶牛性控冻精应用总体情况 |
| 2.2 安徽省奶牛性控冻精应用效果 |
| 2.3 性控冻精的效益分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 性控冻精与常规冻精母犊率效果分析 |
| 3.2 性控冻精与常规冻精受胎率效果分析 |
| 3.3 性控冻精与常规冻精所产犊牛生长发育情况分析 |
| 3.4 性控冻精与常规冻精所产犊牛产奶性能效果分析 |
| 3.5 影响性控冻精受胎率因素分析 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（6）性控冻精技术及其在奶牛中的应用（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 XY精子的分离技术 |
| 1.1 XY精子分离的原理 |
| 1.2 XY精子分离的方法 |
| 1.2.1 沉淀分离法 |
| 1.2.2 电泳定性分离法 |
| 1.2.3 免疫学分离法 |
| 1.2.4 流式细胞分离法 |
| 2 性控冻精在奶牛业上的应用 |
| 2.1 奶牛性控冻精应用效果 |
| 2.1.1 奶牛性控冻精的产母犊率 |
| 2.1.2 奶牛性控冻精的情期受胎率 |
| 2.1.3 奶牛性控冻精所生犊牛生产性能 |
| 2.2 影响奶牛性控冻精应用效果的因素分析 |
| 2.2.1 解冻方法对性控冻精受胎率的影响 |
| 2.2.2 不同输精时间对受胎率的影响 |
| 2.2.3 不同输精部位对受胎率的影响 |
| 2.2.4 不同胎次对受胎率的影响 |
| 2.2.5 不同牧场、不同种公牛之间的情期受胎率分析 |
| 2.3 性控冻精效益综合分析 |
| 3 结论与建议 |
（7）奶牛性别控制技术研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 哺乳动物性别决定的分子机理及相关基因进展 |
| 1.1 性别决定分子机理 |
| 1.1.1 性别决定发育机理 |
| 1.1.2 性别决定遗传学机理 |
| 1.2 性别决定的相关基因 |
| 1.2.1 与XY性别发育相关的基因 |
| 1.2.2 与XX性别发育相关的基因 |
| 1.3 小结与展望 |
| 第二章 性别控制与鉴定主要途经研究概述 |
| 2.1 分离X和Y精子的方法 |
| 2.1.1 电泳法 |
| 2.1.2 免疫学分离法 |
| 2.1.3 流式细胞分离法 |
| 2.2 早期胚胎性别鉴定的研究进展 |
| 2.2.1 细胞遗传学方法 |
| 2.2.2 免疫学方法 |
| 2.2.3 X染色体相关酶法 |
| 2.2.4 分子生物学方法 |
| 2.3 其他方法 |
| 2.4 应用与展望 |
| 第三章 利用H-Y抗体实现奶牛早期胚胎性别控制的研究 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 试验试剂 |
| 3.1.3 仪器与设备 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 抗原的制备 |
| 3.2.2 受体免疫 |
| 3.2.3 H-Y抗体的检测 |
| 3.2.4 牛跖胎的获得 |
| 3.2.5 与H-Y抗体的共培养以鉴定胚胎性别 |
| 3.2.6 PCR法鉴定奶牛早期胚胎性别 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 直接凝集反应 |
| 3.3.2 不同免疫方法产生抗体的情况 |
| 3.3.3 与H-Y抗体共培养鉴定胚胎性别 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 性控精液体外生产奶牛胚胎的研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 主要试剂和仪器 |
| 4.1.2 牛卵母细胞的采集与体外成熟 |
| 4.1.3 精子获能与体外受精 |
| 4.1.4 胚胎培养 |
| 4.1.5 PCR技术鉴定IVF胚胎性别 |
| 4.1.6 实验设计 |
| 4.1.7 数据处理 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 成熟液中添加EGF和IGF-Ⅰ对卵母细胞成熟和IVF胚胎发育的影响 |
| 4.2.2 性控精子处理方法对IVF胚胎发育的影响 |
| 4.2.3 性控精子密度对IVF胚胎发育的影响 |
| 4.2.4 不同培养液对性控胚胎体外发育的影响 |
| 4.2.5 性控精液与普通精液IVF胚胎发育率和性别鉴定 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 卵巢运输温度对性控精液体外受精及受精后胚胎发育的影响 |
| 5.1 材料和方法 |
| 5.1.1 主要仪器设备 |
| 5.1.2 主要试剂 |
| 5.1.3 卵母细胞的采集和分级 |
| 5.1.4 卵母细胞的体外成熟培养 |
| 5.1.5 卵母细胞核相染色及判断 |
| 5.1.6 精子获能与体外受精 |
| 5.1.7 受精胚胎的判断及培养 |
| 5.1.8 囊胚的凋亡染色 |
| 5.1.9 实时定量PCR |
| 5.1.10 数据统计与分析 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 卵巢运输温度对卵母细胞回收及成熟的影响 |
| 5.2.2 卵巢运输温度对性控精液体外受精及胚胎发育的影响 |
| 5.2.3 卵巢运输温度对性控精液体外受精囊胚内细胞凋亡的影响 |
| 5.2.4 卵巢运输温度对性控精液体外受精囊胚中Hsp70.1和Bax表达的影响 |
| 5.3 讨论 |
| 第六章 牛性别控制联合胚胎冷冻技术对胚胎质量、胚胎发育及性控牛出生率的影响 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 主要试剂、仪器及材料 |
| 6.1.2 体外受精及其胚胎培养 |
| 6.1.3 牛胚胎的冷冻与复苏 |
| 6.1.4 囊胚的凋亡染色 |
| 6.1.5 囊胚细胞总数染色及差异染色 |
| 6.1.6 克隆囊胚的胚胎移植 |
| 6.1.7 实验设计 |
| 6.1.8 数据处理 |
| 6.2 结果 |
| 6.2.1 性别控制联合胚胎冷冻技术对胚胎体外发育的影响 |
| 6.2.2 性别控制联合胚胎冷冻技术对胚胎质量的影响--细胞凋亡检查 |
| 6.2.3 性别控制联合胚胎冷冻技术对胚胎质量的影响—囊胚细胞总数及ICM和TE细胞的比值(差异染色检查) |
| 6.2.4 性别控制联合胚胎冷冻技术对胚胎体内发育及出生率的影响 |
| 6.3 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（8）性别控制技术在家畜育种中的应用（论文提纲范文）
| 1 性别决定的生物学机制 |
| 2 性别控制的途径 |
| 2.1 人工授精前的性别控制 |
| 2.2 胚胎移植前的性别控制 |
| 2.3 外界环境对性别的控制 |
| 3 性别控制的方法 |
| 3.1 X精子与Y精子的分离 |
| 3.1.1 沉降法 |
| 3.1.2 电泳法 |
| 3.1.3 免疫学分离法 |
| 3.1.4 流式细胞分离法 |
| 3.2 胚胎的性别鉴定 |
| 3.2.1 细胞学方法 |
| 3.2.2 免疫学方法 |
| 3.2.3 分子生物学方法 |
| 3.3 控制母牛受精的外部环境 |
| 4 存在的问题和发展前景 |
（9）性别控制技术在奶牛生产中的应用与效果分析研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 一 文献综述 |
| 1 性别控制技术的概念与意义 |
| 2 性别控制方法 |
| 2.1 受精前的性别控制 |
| 2.1.1 电泳法 |
| 2.1.2 染色法 |
| 2.1.3 沉降法 |
| 2.1.4 密度梯度离心法 |
| 2.1.5 白蛋白沉淀法 |
| 2.1.6 液柱分离法 |
| 2.1.7 微孔过滤法 |
| 2.1.8 免疫法 |
| 2.1.9 流式细胞仪分离法 |
| 2.1.10 调节授精环境的pH值及输精时间 |
| 2.2 受精后的性别鉴定 |
| 2.2.1 免疫学方法 |
| 2.2.1.1 囊胚形成抑制法 |
| 2.2.1.2 间接免疫荧光分析法 |
| 2.2.1.3 细胞毒性分析法 |
| 2.2.2 细胞遗传学方法 |
| 2.2.3 分子生物学方法 |
| 2.2.3.1 荧光原位杂交法 |
| 2.2.3.2 雄性特异性DNA探针法 |
| 2.2.3.3 PCR扩增Y染色体特异序列法 |
| 2.2.3.4 LAMP法 |
| 2.2.4 生物化学方法-X染色体相关酶法 |
| 2.2.5 早期胎儿的性别鉴定 |
| 3 流式细胞分离仪分离精子的研究 |
| 3.1 精子分离的理论基础 |
| 3.2 精子分离的过程 |
| 3.3 精子分离技术在实际中的应用 |
| 3.3.1 精子分离技术在畜牧业生产中的应用 |
| 3.3.2 分离精子在人临床上的应用 |
| 二 试验研究 |
| 实验一 输精部位对奶牛性控精液情期受胎率的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验时间和地点 |
| 1.2 试验材料 |
| 1.2.1 试验动物 |
| 1.2.2 试验用精液 |
| 1.2.3 试验器材 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.3.1 分组 |
| 1.3.2 精液的解冻 |
| 1.3.3 人工授精 |
| 1.3.4 妊娠检查 |
| 1.3.5 数据统计 |
| 2 试验结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 实验二 年龄对奶牛性控精液情期受胎率的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验时间和地点 |
| 1.2 试验材料 |
| 1.2.1 试验动物 |
| 1.2.2 试验用精液 |
| 1.2.3 试验器材 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.3.1 分组 |
| 1.3.2 精液的解冻 |
| 1.3.3 人工授精 |
| 1.3.4 妊娠检查 |
| 1.3.5 数据统计 |
| 2 试验结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 实验三 性控精液和常规精液对奶牛情期受胎率的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验时间和地点 |
| 1.2 试验材料 |
| 1.2.1 试验动物 |
| 1.2.2 试验用精液 |
| 1.2.3 试验器材 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.3.1 分组 |
| 1.3.2 精液的解冻 |
| 1.3.3 人工授精 |
| 1.3.4 妊娠检查 |
| 1.3.5 数据统计 |
| 2 试验结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 实验四 性控精液与常规精液对奶牛超排效果的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验时间和地点 |
| 1.2 试验材料 |
| 1.2.1 试验动物 |
| 1.2.2 试验用精液 |
| 1.2.3 试验药品 |
| 1.2.4 试验器材与仪器 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.3.1 分组 |
| 1.3.2 同期发情 |
| 1.3.3 超排处理 |
| 1.3.4 精液的解冻 |
| 1.3.5 人工授精 |
| 1.3.6 冲胚 |
| 1.3.7 胚胎质量评定 |
| 1.3.8 胚胎冷冻 |
| 1.3.9 胚胎解冻程序 |
| 1.3.10 数据统计 |
| 2 试验结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 试验五 黄体等级对性控胚胎移植受胎率的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验时间和地点 |
| 1.2 试验材料 |
| 1.2.1 试验动物 |
| 1.2.2 试验胚胎 |
| 1.2.3 试验器材 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.3.1 分组 |
| 1.3.2 同期发情 |
| 1.3.3 胚胎解冻 |
| 1.3.4 黄体等级 |
| 1.3.5 胚胎移植 |
| 1.3.6 妊娠检查 |
| 1.3.7 数据统计 |
| 2 试验结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 试验六 性控胚胎与常规胚胎对奶牛的胚胎移植效果与产犊效果的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验时间和地点 |
| 1.2 试验材料 |
| 1.2.1 试验动物 |
| 1.2.2 试验胚胎 |
| 1.2.3 试验器材 |
| 1.3 试验方法 |
| 1.3.1 分组 |
| 1.3.2 同期发情 |
| 1.3.3 胚胎解冻 |
| 1.3.4 黄体等级 |
| 1.3.5 胚胎移植 |
| 1.3.6 妊娠检查 |
| 1.3.7 数据统计 |
| 2 试验结果与分析 |
| 2.1 性控胚胎与常规胚胎移植效果的比较 |
| 2.2 性控胚胎与常规胚胎产犊结果的比较 |
| 3 讨论 |
| 3.1 性控胚胎与常规胚胎移植效果的比较 |
| 3.2 性控胚胎与常规胚胎产犊结果的比较 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 导师评阅表 |
（10）精子流式分离和低剂量授精研究及XY精子差异表达基因筛选（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 哺乳动物性别控制技术 |
| 1.1.1 性别控制的理论和现实意义 |
| 1.1.2 流式分选XY 精子为基础的性别控制技术 |
| 1.1.3 较为安全的精子流式分选技术的研究 |
| 1.1.4 性别控制DNA 疫苗的研究 |
| 1.2 哺乳动物X、Y 精子分离研究进展 |
| 1.2.1 流式细胞检索仪精子分离法的研究及应用状况 |
| 1.2.2 其他X、Y 精子分离的技术方法和应用 |
| 1.2.3 X、Y 精子分离技术研究展望 |
| 1.3 哺乳动物性控DNA 疫苗 |
| 1.3.1 哺乳动物性控疫苗研究的免疫学基础 |
| 1.3.2 哺乳动物性控疫苗研究的分子基础 |
| 1.3.3 性控DNA 疫苗的定义 |
| 1.3.4 性控DNA 疫苗的对象和性别控制的实现途径 |
| 1.3.5 利用XY 精子性别特异性基因表达为基础的性控疫苗研究现状 |
| 1.3.6 性控DNA 疫苗技术的展望 |
| 1.4 XY 精子性别差异表达基因筛选技术 |
| 1.4.1 精子RNA 提取和定量 |
| 1.4.2 差异表达基因筛选研究方法 |
| 1.4.3 生物信息学分析进展 |
| 1.5 研究的目的 |
| 第二章 鹿冷冻精液制备及人工授精试验 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料和方法 |
| 2.2.1 材料 |
| 2.2.2 方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 不同电刺激采精频率马鹿的采精效果 |
| 2.3.2 天山马鹿射精电压 |
| 2.3.3 细管冻精制作工艺的筛选 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 马鹿、梅花鹿和奶山羊XY 精子流式分选及人工授精 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 试验材料 |
| 3.2.2 试验方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 马鹿精液的分选及授精结果 |
| 3.3.2 梅花鹿精液的分选及授精结果 |
| 3.3.3 奶山羊精液分选和人工授精结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 关于马鹿分选精子和低剂量直肠把握输精 |
| 3.4.2 关于梅花鹿精子分选和低剂量腹腔镜人工授精 |
| 3.4.3 关于奶山羊精子分选和输精剂量 |
| 3.4.4 关于分选精液后代的安全性评价 |
| 3.4.5 关于分选精子的应用 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 马鹿性控胚胎生产 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.2.1 材料 |
| 4.2.2 方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 性控胚胎生产 |
| 4.3.2 胚胎性别鉴定 |
| 4.3.3 胚胎移植 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 奶牛精子RNA 提取及质量评定 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料和方法 |
| 5.2.1 材料 |
| 5.2.2 主要试剂和仪器 |
| 5.2.3 方法 |
| 5.3 结果 |
| 5.3.1 奶牛细管冻精优化和总RNA 提取结果 |
| 5.3.2 奶牛细管冻精总RNA 的RT-PCR |
| 5.4 讨论 |
| 5.4.1 奶牛细管冻精RNA 提取 |
| 5.4.2 奶牛细管冻精RNA 检测 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 奶牛X、Y 精子性别差异表达基因筛选 |
| 6.1 前言 |
| 6.2 材料和方法 |
| 6.2.1 材料 |
| 6.2.2 主要试剂和仪器 |
| 6.2.3 方法 |
| 6.3 结果 |
| 6.3.1 奶牛高纯度XY 精子流式分选结果 |
| 6.3.2 奶牛Y-X 精子扣除杂交结果 |
| 6.3.3 奶牛Y-X 精子扣除杂交cDNA 的测序和分析 |
| 6.4 讨论 |
| 6.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、用Percoll不连续密度梯度分离奶牛精液对控制性别比率的研究（论文参考文献）
- [1]性别控制技术及其在家畜生产中的应用[J]. 郭海燕,张昊,李拥军,程国虎. 安徽农业科学, 2016(25)
- [2]性别决定技术在银狐养殖产业中的应用研究[D]. 程丽芳. 安徽大学, 2016(10)
- [3]哺乳动物XY精子分离技术的研究[J]. 张夙夙. 畜牧与饲料科学, 2014(Z1)
- [4]抗奶牛Y精子蛋黄抗体的提取及其对奶牛精子作用效果的研究[D]. 赵万乐. 甘肃农业大学, 2013(05)
- [5]安徽省奶牛性控冻精应用效果调查及评估[D]. 杨阳. 安徽农业大学, 2013(05)
- [6]性控冻精技术及其在奶牛中的应用[J]. 杨阳,刘旭光,杨漫漫,刘亚. 中国乳品工业, 2013(03)
- [7]奶牛性别控制技术研究[D]. 赵雪. 西北农林科技大学, 2012(03)
- [8]性别控制技术在家畜育种中的应用[J]. 邱海芳,刘炳义,刘榜,陈飞. 中国畜牧兽医, 2010(07)
- [9]性别控制技术在奶牛生产中的应用与效果分析研究[D]. 赵鑫. 石河子大学, 2010(02)
- [10]精子流式分离和低剂量授精研究及XY精子差异表达基因筛选[D]. 高庆华. 西北农林科技大学, 2009(10)