冷冻保存的同种异体胸骨

一、冻贮同种异体胸骨移植（论文文献综述）

孙立阳,张刚,王国新,吕军吉,姜达志^[1]（2011）在《胸壁肿瘤切除与胸壁重建》文中指出目的探讨胸壁肿瘤切除要点及缺损胸壁的重建方式。方法回顾分析1985年4月至2010年9月间手术治疗83例胸壁肿瘤患者的临床资料。其中胸骨肿瘤12例,肋骨肿瘤46例,软组织肿瘤25例。原发67例中良性40例,恶性27例;继发16例中转移10例,侵袭6例。手术行肿瘤切除48例,肿瘤切除加胸壁重建34例,探查1例。10例胸骨肿瘤和22例肋骨肿瘤切除后采用有机玻璃、同种异体胸骨、钢板、钢丝、缝线、涤纶布及胸大肌或膈肌重建;2例软组织肿瘤切除后采用转移肌瓣及转移皮瓣加植皮重建。结果 1例左全肺切除加胸壁重建患者突发心肌梗死死亡,1例全胸骨切除胸壁重建患者并发胸腔感染,其余81例术后恢复顺利,移植物未发生排斥反应。随访71例,其中恶性肿瘤总1,3,5年存活率分别为79.0%、48.0%和31.0%。良性肿瘤术后有2例复发,最长已观察12年。结论原发性胸壁肿瘤应首选手术,继发性胸壁肿瘤在原发灶可一并切除或控制前提下亦可手术。切线距肿瘤4 cm以上可降低复发。胸壁缺损较大者应行胸壁重建。骨性缺损宜选硬质材料如有机玻璃重建,软组织缺损可采用自体组织如肌瓣修复。

江玉华^[2]（2011）在《海藻糖对胸骨低温保存的保护作用及其机制的初步研究》文中提出实验一海藻糖对低温保存不同时间的胸骨组织ALP活性及3H-TdR掺入的影响目的探讨海藻糖对低温保存不同时间的胸骨组织ALP活性及3H-TdR掺入的影响,了解海藻糖在低温下对胸骨细胞活力的保护作用。方法新鲜配制两组保存液,其中：Ⅰ组LPD+10%DMSO,Ⅱ组LPD+10%DMSO+ 0.10mol/L海藻糖。切取SD大鼠胸骨后立即含有放入上述两种溶液的冻存管低温保存,随机抽取新鲜胸骨组织和低温保存1d、15d、30d、60d、120d后的胸骨组织进行体外培养,上清液进行ALP活性检测;剩余部分加入3H-TdR做标记,检测胸骨组织细胞3H-TdR掺入率。结果低温保存不同时间后,Ⅱ组胸骨上清液ALP活性检测（95.14%-71.85%）,明显高于Ⅰ组（85.63%-69.66%）;Ⅱ组胸骨组织细胞3H-TdR掺入率（98.86%-81.02%）,明显高于Ⅰ组（94.45%-74.46%）,这种趋势持续到低温保存120天。结论海藻糖在胸骨低温保存中对组织细胞有明显的保护作用：检测胸骨培养液上清中ALP活性及胸骨3H-TdR掺入率的方法可以比较客观地反映了器官保存后组织细胞的活力。实验二不同海藻糖浓度对胸骨低温保存活性的影响目的探讨不同海藻糖浓度对胸骨低温保存活性的影响。方法新鲜配制四组保存液,均含10%DMSO,分别加入不同浓度海藻糖：Ⅰ组0.05mol/L,Ⅱ组0.10mol/L,Ⅲ组0.20mol/L,IV组0.30mol/L.切取SD大鼠胸骨后立即放入含有上述四种溶液的冻存管低温保存,随机抽取新鲜胸骨组织和低温保存120d后的各组胸骨组织体外培养,上清液进行ALP活性检测：剩余部分加入3H-TdR做标记,检测胸骨组织细胞3H-TdR掺入率。结果低温保存120d后胸骨组织培养上清中ALP活性和胸骨组织细胞3H-TdR掺入率与新鲜对照组比较均有下降（p<0.05）,其中以Ⅰ组下降较为明显,而Ⅲ组下降较少。结论海藻糖在0.20 mol/L浓度下对骨骼的保护作用较好。实验三保护机制研究：海藻糖对低温保存的胸骨中Bcl-2和Bax基因表达的影响及相关研究目的探讨海藻糖对低温保存120天的胸骨组织的Bcl-2及Bax基因表达的影响,进一步证实海藻糖对低温保存胸骨的保护作用。方法新鲜配置保存液4组:Ⅰ组LPD（低钾右旋糖酐）液：Ⅱ组LPD+10%DMSO（二甲基亚砜）：Ⅲ组LPD+0.20 mol/L海藻糖：Ⅳ组LPD+10%DMSO+0.20 mol/L海藻糖；切取SD大鼠胸骨后立即分别放入含上述4种溶液的冻存管中低温保存,随机抽取新鲜胸骨组织和低温保存120d的4组标本,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测不同保存液保存120d的胸骨及新鲜胸骨的Bcl-2和Bax基因的mRNA表达量。结果在冻存组中,Ⅲ组的Bcl-2表达量与Ⅰ、Ⅱ组比较有增高（p<0.01）;Ⅳ组的Bcl-2表达量最高,基本接近新鲜骨组织,与新鲜组织比较差异无统计学意义（p>0.05）;在冻存组中,Ⅲ组的Bax的表达量与Ⅰ、Ⅱ组比较有减低（p<0.01）;Ⅳ组的Bax表达量最低,基本接近新鲜骨组织,与新鲜组织比较差异无统计学意义（p>0.05）。结论海藻糖对低温保存中的胸骨细胞活性具有保护作用；通过增强Bcl-2基因、抑制Bax基因的表达来抑制胸骨细胞凋亡可能是其保护机制之一;海藻糖和DMSO合用保护作用更好。

孟凡会,唐秀杰,谭金山,赵淑萍,赵洁,邢泉生^[3]（2006）在《深低温保存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的形态学评价》文中指出目的用形态学方法评价深低温保存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的效果。方法同种材料取自大月龄脑死亡胎儿,在冷冻保护液浸泡后置于4℃冰箱冷平衡,特制无菌冷冻袋包装。用液氮蒸气梯度降温方法完成降温,-196℃长期保存。复温后光镜、电镜观察血管组织形态并与复温前比较。结果修剪后和解冻后的血管及瓣膜细菌培养结果均为阴性。光镜、电镜观察显示解冻后的主动脉基本结构完整,胶原纤维和弹力纤维形态结构正常,排列规则,局部可见黏液样变性以及部分内皮细胞脱落。结论本法同种材料的取材、冷冻保存效果可靠。初步建立了综合采集、长期冻存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的方法和技术标准,为大月龄胎儿血管和瓣膜库的建立及临床应用奠定基础。

刘典晓^[4]（2006）在《大月龄山羊胎仔主动脉移植实验研究》文中研究指明目的 观察大月龄山羊胎仔血管移植到幼年山羊体内后的细胞活性、组织形态变化、增殖能力。 方法 无菌条件下取出胎羊的主动脉20条,其中8条取出后立即移植到幼年山羊股动脉（新鲜组）;8条经液氮深低温保存4周,复温后移植到幼年山羊股动脉（冷冻组）;其余4条作为对照组。术后1个月（Ⅰ、Ⅲ组）和4个月（Ⅱ、Ⅳ组）分别取材作大体形态观察,同时分别对冷冻前、复温后、移植后主动脉作细胞活性测定、组织学观察及ki-67阳性表达的分析。 结果 一、冷冻复温后细胞活性低于对照组（P<0.05）;各移植组取材后移植段细胞活性低于对照组（P<0.05）,新鲜组与冷冻组间无明显差别（P>0.05）。 二、光镜观察移植段管壁三层结构均存在,内膜及中层均增厚,管壁有少量单核及淋巴细胞浸润。各组有不同程度的内皮细胞缺失。 三、移植后1个月移植段管径、长度及厚度较移植时均无明显变化（P>0.05）;移植后4个月管径、长度及厚度均较移植时有明显增加（P<0.05）;术后1个月、4个月新鲜组与冷冻组比较差别均无统计学意义（P>0.05）。 四、免疫组化结果显示各组ki-67阳性指数明显增高（P<0.05）;移植后1个月新鲜组ki-67阳性指数高于冷冻组（P<0.05）;移植后4个月冷冻组内皮细胞ki-67阳性指数高于新鲜组（P<0.05）。 结论 新鲜及冷冻后大月龄山羊胎仔主动脉植入幼年山羊体内后可以保持活性,有较强增殖能力,并且可以随幼年山羊发育而生长,提示临床应用胚胎主动脉移植是可行的。

唐秀杰,孟凡会,谭金山,赵淑萍,赵洁,邢泉生^[5]（2004）在《深低温保存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的形态学评价》文中研究指明①目的 用形态学方法评价深低温保存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的效果。②方法 同种材料取自大月龄脑死亡胎儿。在冷冻保护液浸泡后置于 4℃冰箱冷平衡 ,特制无菌冷冻袋包装。用液氮蒸气梯度降温方法完成降温 ,- 1 96℃长期保存。复温后光镜、电镜观察血管组织形态并与复温前比较。③结果 修剪后和解冻后的血管及瓣膜细菌培养结果均为阴性。光镜、电镜观察显示解冻后的主动脉基本结构完整 ,胶原纤维和弹力纤维形态结构正常 ,排列规则 ,局部可见黏液样变性以及部分内皮细胞脱落。④结论 本法同种材料的取材、冷冻保存效果可靠。初步建立了综合采集、长期冻存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的方法和技术标准 ,为大月龄胎儿血管和瓣膜库的建立及临床应用奠定基础

唐秀杰^[6]（2003）在《建立大月龄胎儿血管和瓣膜组织库的初步研究》文中进行了进一步梳理目的 新生儿、小婴儿心外科的迅速发展为寻找合适的血管和瓣膜替代材料提出了迫切要求，结合成人同种异体组织库的实际经验，初步建立大月龄胎儿血管和瓣膜组织库，并通过形态学研究对建库方法、保存效果等进行评估。 方法 同种异体材料取自脑死亡胎儿15例，胎龄28～40周。无菌条件下取材、修剪制备，其中带瓣膜主动脉15条、带瓣膜肺动脉8条。先依次用冷冻保护液1号液和冷冻保护液2号液浸泡，后放置于4℃冰箱冷平衡，特制无菌冷冻袋包装。用液氮蒸气梯度降温方法完成降温，-196℃长期保存。复温前后光镜观察血管形态、扫描电镜观察动脉和瓣膜内皮细胞完整情况、透射电镜观察细胞超微结构。 结果 一、血管及瓣膜修剪后和解冻后分别取样送细菌室做细菌和霉菌培养，结果均为阴性。 二、光镜观察显示：解冻后的主动脉内皮下层、中膜平滑肌细胞、胶原纤维、弹力纤维、外膜的基本结构与正常新鲜组织相同。中膜平滑肌细胞核固缩、浓染，未见急性损坏样改变，可见局部粘液样变性以及部分内皮细胞脱落现象。 三、扫描电镜观察显示：解冻后的主动脉部分血管内皮细胞脱落，内皮下层暴露。 四、透射电镜观察显示：解冻后的主动脉部分血管内皮细胞脱落，胶原纤维和弹力纤维形态结构正常，排列整齐，部分细胞线粒体结构及周围基质发生空泡样改变。 结论 一、初步建立了综合采集、长期冻存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的方法和主要技术指标。 二、严格的无菌操作可取代影响组织活性的抗生素灭菌法。 三、改进的液氮蒸汽梯度降温法，较程序控制降温仪降温简单，冷冻效果更可靠。 四、光镜及电镜观察结果显示改良的冷冻保存方法保存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的效果良好。 五、为大月龄胎儿血管和瓣膜组织库的完善、深入进行活性和免疫性研究以及下一步的临床应用打下基础。

王勋华^[7]（2003）在《同种带瓣大动脉活性影响因素的实验研究》文中研究说明液氮深低温保存的同种带瓣大动脉作为一种替代材料已广泛应用与心血管外科的临床实践中。它不仅用于主动脉瓣、肺动脉瓣及二尖瓣的置换，同时还是复杂先天性心脏畸形矫治术中带瓣外管道及补片的良好材料。它具有瓣膜口径大、结构自然、血流动力学效应好、不易形成血栓、不需抗凝，细菌不易附着、术后感染性心内膜炎发生率低等特点，尤其是瓣膜组织保持有一定的生物活性，不易发生组织退行性变、老化及钙化，在临床上得到越来越广泛的应用。因此在同种带瓣大动脉的制备过程中如何最大限度地保留其活性成为一项重要课题。本实验欲通过三种不同水浴条件下灭菌及冷冻保存前后内皮细胞葡萄糖代谢率及台盼蓝拒染率差别的观察，探讨水浴条件及冷冻保存对同种带瓣大动脉内皮细胞活性的影响机制，寻找一种灭菌效果好、对同种带瓣大动脉内皮细胞活性影响小的制备方法，以最大限度地保留其活性。 材料与方法 本实验选取修剪完毕的同种带瓣大动脉30只，其中带瓣主动脉15只，带瓣肺动脉15只，随机分成3组，每组10只，灭菌前后均做细菌及霉菌培养。每组均用含头孢西丁（Cefoxtin）240mg/L、林克霉素（Lincomycin）120mg／L、多粘菌素B（Polymycin B）100mg/L、万古霉素（Vancomycin）50mg/L的RPMI1640液水浴灭菌，A组37℃水浴24小时，B组37℃水浴6小时，C组6℃水浴24小时，取出后留取血管内膜标本做葡萄糖代谢率、内皮细胞台盼蓝拒染率测定。取修剪完未灭菌的内膜组织标本作为对照。冷冻保存的同种带瓣大动脉解冻了8只，分别于保存3—15个月取出解冻，比较其保存前后血管内膜标本做葡萄糖代谢率、内皮郑州大学2003年硕士毕业论文同种带瓣大动脉活性影响因素的实验研究细胞台盼蓝拒染率的变化。 结果 ①30只同种带瓣大动脉灭菌前培养结果:A组8例阳性，B组6例阳性，C组6例阳性，阳性率为667%。灭菌后培养结果各组标本无一例阳性，8只解冻的标本培养结果亦均为阴性。②各实验组葡萄糖代谢率均明显低于对照组（A组:35、54土1 .76m酬l·24h、B组:39.44士1.49 mg/dl·24h、C组:38.60士1.27m酬l·24h、对照组:41 .98士1 .76m脚1·24h）。③各实验组内皮细胞台盼蓝拒染率均明显低于对照组（A组:79.7%、B组:87.6%、C组:867%、对照组:93.2%），p<0.05。④各实验组内葡萄糖代谢率A组（35.54士l.76mg/dl·24h）低于B、C组（39，44士1.49 mg/dl·24h、38.60士1.27 mg/dl·24h），p<0.01。而B、C组之间无明显差异，P>0.05。⑤各实验组内内皮细胞台盼蓝拒染率A组 （79.7%）低于B、C组（87.6%、86.7%），P<0.05。而B、C组之间无明显差异，P>0.05。⑥标本冻存后其活性降低，尤其冻存6个月以上的降低明显，其中一例冻存15个月，其葡萄糖代谢率低于16m留di·24h。 结论 1.本实验所用抗生素配方水浴灭菌能达到比较可靠的灭菌效果。 2.抗生素水浴灭菌处理对同种带瓣大动脉组织细胞活性有损伤，经典的37 ℃条件下培养24小时损伤最严重，而37℃条件下培养6小时损伤最轻， 且能达到满意的灭菌效果。 3.液氮深低温保存对同种带瓣大动脉组织细胞活性有影响，随保存时间的 延长活性逐渐降低，尤其是保存9个月以后，活性降低更明显。

王国新,林乐胜^[8]（2002）在《冻贮同种异体胸骨移植》文中认为目的 探讨低温冻贮同种异体胸骨在胸骨肿瘤病人施行胸骨部分切除手术后移植的方法和疗效。方法 对 2例确诊为胸骨肿瘤的病人施行胸骨大部切除、低温冻贮同种异体胸骨移植手术。2例病人分别移植低温冻贮 16d及 384d同血型、同种异体胸骨。结果 1例胸骨血管瘤病人1992年手术至今多次复查均证实移植骨存活良好 ,无移植骨死骨及脱钙征象。 1例胸骨恶性肿瘤病人术后 6个月死于肝、肺肿瘤转移 ,但多次复查整块移植骨无死骨及脱钙征象。结论 此手术较大范围的切除病变胸骨 ,减低了修复缺损的难度 ,取材塑型更接近生理状态 ,确保了胸廓的完整性与稳定性

高光强^[9]（1997）在《无支架心脏房室瓣膜实验研究》文中研究指明无支架房室瓣膜符合生理，血流动力学性能优良。本课题在研究了猪二尖瓣和三尖瓣解剖生理基础上，采用二尖瓣制成无支架房室瓣膜，从保存瓣膜活性和探索无支架房室瓣膜外科植入技术入手展开系列研究。本文分析了深低温保存对猪二尖瓣内皮细胞活性的影响以及深低温保存猪二尖瓣组织内蛋白聚糖变化，通过无支架房室瓣膜替换犬三尖瓣动物实验，对其术后血流动力学性能进行评价。 1 无支架房室瓣膜制备、保存与外科技术探索 采用猪二尖瓣制成无支架心脏房室瓣膜，抗生素灭菌深低温保存。透射电镜观察到，深低温保存1月猪二尖瓣内皮细胞结构完整，个别内皮细胞胞质中脂褐素类物质较新鲜瓣膜略增多；胶原纤维结构致密，排列整齐；成纤维细胞胞膜完整，细胞核无固缩现象，线粒体无明显肿胀。将离体猪心三尖瓣切除，将深低温保存猪二尖瓣前瓣环缝合于隔瓣环，二尖瓣后瓣环缝合于三尖瓣前后瓣环，两乳头肌缝合于右室前壁，完成无支架房室瓣膜替换三尖瓣，注水试验观察瓣膜启闭功能良好。本实验提示：① 深低温保存猪二尖瓣制成的无支架房室瓣膜，结构完整，活性得到很好保持。② 深低温保存同种二尖瓣可望成为理想无支架房室瓣膜。 2 深低温保存猪二尖瓣内皮细胞活性研究 分别取深低温保存1月，3月，6月的猪二尖瓣前叶各6份，

沈毅,罗宜人,徐林浩,李志鸿,张岩峰,林乐胜^[10]（1993）在《冻贮同种异体胸骨移植（附1例报告）》文中研究指明对1例胸骨肿瘤病人施行胸骨部分切除,低温冻贮同种异体胸骨移植。此手术较大范围地切除病变胸骨,减低了修复缺损的难度,取材塑形更接近生理状态,确保了胸廓的完整性与稳定性。对手术、移植骨的取材处理及移植环节进行了讨论。

二、冻贮同种异体胸骨移植（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、冻贮同种异体胸骨移植（论文提纲范文）

（1）胸壁肿瘤切除与胸壁重建（论文提纲范文）

（2）海藻糖对胸骨低温保存的保护作用及其机制的初步研究（论文提纲范文）

（4）大月龄山羊胎仔主动脉移植实验研究（论文提纲范文）

（5）深低温保存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的形态学评价（论文提纲范文）

（6）建立大月龄胎儿血管和瓣膜组织库的初步研究（论文提纲范文）

（7）同种带瓣大动脉活性影响因素的实验研究（论文提纲范文）

（9）无支架心脏房室瓣膜实验研究（论文提纲范文）

四、冻贮同种异体胸骨移植（论文参考文献）

• [1]胸壁肿瘤切除与胸壁重建[J]. 孙立阳,张刚,王国新,吕军吉,姜达志. 中国肿瘤临床与康复, 2011(04)
• [2]海藻糖对胸骨低温保存的保护作用及其机制的初步研究[D]. 江玉华. 青岛大学, 2011(06)
• [3]深低温保存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的形态学评价[A]. 孟凡会,唐秀杰,谭金山,赵淑萍,赵洁,邢泉生. 第五届全国低温生物医学及器械学术大会会议论文集, 2006
• [4]大月龄山羊胎仔主动脉移植实验研究[D]. 刘典晓. 青岛大学, 2006(09)
• [5]深低温保存大月龄胎儿血管和瓣膜组织的形态学评价[J]. 唐秀杰,孟凡会,谭金山,赵淑萍,赵洁,邢泉生. 青岛大学医学院学报, 2004(01)
• [6]建立大月龄胎儿血管和瓣膜组织库的初步研究[D]. 唐秀杰. 青岛大学, 2003(01)
• [7]同种带瓣大动脉活性影响因素的实验研究[D]. 王勋华. 郑州大学, 2003(01)
• [8]冻贮同种异体胸骨移植[J]. 王国新,林乐胜. 临沂医学专科学校学报, 2002(06)
• [9]无支架心脏房室瓣膜实验研究[D]. 高光强. 中国协和医科大学, 1997(11)
• [10]冻贮同种异体胸骨移植（附1例报告）[J]. 沈毅,罗宜人,徐林浩,李志鸿,张岩峰,林乐胜. 青岛医学院学报, 1993(01)

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