一、肠系膜动脉阻力血管平滑肌钙离子单通道特性及硝普钠的作用（论文文献综述）
徐芳芳[1]（2021）在《高盐饮食大鼠血清中THBS1的改变及其在内皮功能损伤中的作用和机制研究》文中研究指明背景近年来,随着生活水平的提高和生活方式的改变,心脑血管疾病已成为严重危害人类健康的首要危险因素。而高盐饮食是心脑血管疾病的重要危险因素之一。因盐摄入过多,全球每年约有165万人群死于心血管疾病。越来越多的证据表明,高盐饮食会损害血管反应性,周围血管阻力的调节和一氧化氮（Nitric oxide,NO）的合成,其对心血管、脑血管、肾小球毛细血管、肠系膜阻力血管的损伤是近些年的研究热点。血小板反应蛋白（Thrombospondin-1,THBS1）最初被定义为第一个天然抗血管生成剂,近年来发现它也是一个分泌型的多功能糖蛋白。THBS1能够调节血管生成以及细胞的增殖,凋亡,迁移和黏附,参与维持血管系统和体内稳态。在多种生理和病理过程中均发挥重要作用,包括血栓形成,血管生成,肿瘤发生,炎症,细胞凋亡和纤维化。通过与细胞膜表面受体相互作用,THBS1抑制细胞内NO信号,比如抑制内皮型一氧化氮合酶（Endothelial nitric oxide synthase,e NOS）的活化和磷酸化,减少NO的生成。NO是血管内皮细胞（Endothelial cell,EC）分泌的重要血管舒张剂,由e NOS催化生成。NO具有多种重要功能,尤其在血管张力的维持,血压的调节和炎症反应的抑制等方面发挥重要作用。钙库操纵钙内流（Store-operated calcium entry,SOCE）是调节EC中钙离子浓度的重要途径。高盐刺激能诱导体内NO生物利用度下降,进而导致EC功能障碍,血管舒张功能减弱。然而,THBS1在高盐饮食诱导的EC功能障碍和血管损害的机制仍未完全阐明。基于以上背景,本课题拟探讨两个研究主题:1.关键蛋白及相关信号通路在高盐饮食对心血管疾病的损伤中的作用及机制;2.THBS1在高盐饮食大鼠内皮功能损伤中的作用及机制。目的1.探讨高盐饮食大鼠血清中关键的差异表达蛋白质（Differentially expressed proteins,DEPs）及其相关信号通路;2.验证高盐饮食诱导的THBS1的表达改变以及其在肠系膜血管内皮细胞（Mesenteric artery endothelial cells,MAECs）对高盐反应中的作用和机制,为高盐饮食引起的血管损伤提供一个新的潜在分子机制。方法1.血清收集对SD大鼠分为两组:对照组（普通饮食组,0.4%Na Cl）和高盐饮食组（4%Na Cl）,喂养4周。无菌条件下,抽取腹主静脉血,分离血清。2.蛋白质标记对照组肽段标记的是同种键标签113、114、115和116,而高盐饮食组为117、118、119和121。3.高p H的HPLC分级通过缓冲液A和缓冲液B（98%ACN,p H 10）形成的线性梯度以700μL/min的流速分离肽。4.液相色谱-串联质谱（Liquid chromatography with tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）分析由流动相A（0.1%FA,H2O）和流动相B（0.08%FA,80%ACN）形成的线性梯度以600 n L/min的流速分离,随后将分离的肽放入质谱仪中检测。5.数据库检索和生物信息学分析我们使用Proteome Discover软件搜索uniprot-rattus+norvegicus.20180702＿36089.fasta数据库。随后进行基因本体论（Gene ontology,GO）分析、京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）途径分析,以鉴定目标肽段富集的具有显着性统计学差异的信号通路。6.免疫组化和蛋白质免疫印迹实验检测THBS1,eNOS,转化生子因子-β1（Transforming growth factor-β1,TGF-β1）,Orai1,Orai2,Orai3的表达。7.肠系膜阻力动脉（Mesenteric resistance artery,MRA）张力测定分别用乙酰胆碱和硝普钠检测MRA内皮依赖性和内皮非依赖性舒张。8.原代MAECs培养和鉴定使用0.2%I型胶原酶消化、提取细胞,随后使用VWF（EC标记性蛋白）对原代培养的细胞进行鉴定。9.原代MAECs转染细胞被转染四种小干扰RNA（Small interfering RNA,si RNA）序列,分别是scrambled si RNA,Thbs1 si RNA,Orai1 si RNA和Orai2 si RNA。10.MAECs中NO含量测定使用DAF-FM DA（NO荧光指示剂）检测各组细胞内NO含量,荧光显微镜下观察细胞内绿色荧光强度。11.激光共聚焦检测Smad4入核激光共聚焦显微镜观察Smad4在细胞内的分布情况。12.细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)测定用钙离子成像系统检测原代MAECs的钙库操纵钙内流（SOCE）情况。13.统计分析数据以均值±标准误表示。用Graph Pad Prism（v8.3.0.538）软件制作统计图。双因素方差分析或t检验等统计方法用于分析数据之间的差异。P<0.05被认为有统计学差异。结果1.高盐饮食组和普通饮食组大鼠之间有111种血清蛋白质的浓度存在显着差异:其中65个蛋白质明显上调,46个蛋白质明显下调;THBS1的差异倍数（Fold change,FC）为1.5,即表达显着上调。2.THBS1在高盐饮食大鼠血清和血管内皮中高表达;3.与对照组相比,高盐饮食大鼠的MRA内皮依赖性显着减弱,而对内皮非依赖性舒张无影响;4.高盐诱导MAECs中THBS1表达上调而e NOS表达下调;5.THBS1明显抑制MAECs中e NOS表达和NO生成,以及MRA的内皮依赖性舒张;6.THBS1是高盐环境中e NOS下调的原因;7.TGF-β1活化诱导Smad4入核,导致高盐环境中THBS1表达增多;8.THBS1抑制MAECs中Orai1和Orai2的蛋白表达,以及SOCE的大小,而且Orai1和Orai2的敲低能显着抑制e NOS蛋白表达,NO释放以及SOCE;9.高盐诱导MAECs中Orai1和Orai2表达下调,而对Orai3的蛋白表达无明显影响。结论本研究有效地使用了iTRAQ技术进行蛋白质鉴定和定量,筛选出与血管内皮功能障碍密切相关的蛋白质（比如THBS1）。随后,我们验证了高盐饮食会引起THBS1表达和分泌的升高,并且THBS1的变化与高盐饮食大鼠中内皮依赖性血管舒张功能受损有关。在体外实验,我们进一步证明了THBS1在MAECs对高盐刺激的反应中的重要作用,即通过激活TGF-β1和下游的Smad4入核,高盐上调细胞内THBS1的表达,而THBS1的改变又介导了Orai通道蛋白的表达下调和SOCE减弱,导致eNOS表达和NO生成减少,引起内皮细胞功能障碍。
冯雪芹[2]（2020）在《孕期高糖饮食对老年雄性子代大鼠肠系膜动脉功能的影响及机制研究》文中指出研究背景:当今社会经济水平不断提高,营养过剩的孕妇随之增多。母体孕期的不良刺激将会显着增加子代出生后罹患成人疾病（如糖尿病、高血压和中风等）的风险。相关研究发现,孕期高糖饮食可升高子代雄性大鼠青年期的血糖水平,抑制肠系膜动脉血管平滑肌细胞上大电导钙依赖性钾通道（Large-conductance Ca2+-activated K+channels,BK）的功能,最终导致肠系膜动脉功能异常。在老龄化进程中,血管老化是引起各种器官衰老的重要病理基础,成为多种慢性退行性疾病共同的发病机制。目前胎儿期高血糖暴露对血管老化进程的影响尚不清楚。本课题将研究孕期母体高糖饮食对老年雄性子代大鼠肠系膜动脉功能的影响及其机制,以期为高血压等心血管疾病预防的孕期营养干预奠定基础,为相关药物研发提供线索。方法:4月龄SPF级SD雌雄大鼠按照1:2进行配种,发现阴栓时视为孕期第一天。将孕鼠随机分为对照组和高糖组,每组20只。高糖组孕鼠自孕期第一天起给予20%蔗糖水和标准饲料至子代出生,对照组孕期给予正常饮水和标准饲料。两组孕鼠均自然分娩,给予雄性子代正常饮水饮食至20月龄,运用在体血压检测技术、微血管张力检测技术和肌源性张力检测技术,评估孕期高糖饮食对老年雄性子代大鼠肠系膜动脉结构与功能的影响。进一步运用膜片钳电生理检测技术,结合分子生物学技术等方法,探讨肠系膜动脉平滑肌细胞表型与重要离子通道功能改变参与其中的机制。结果:与对照组相比,1)孕期高糖饮食导致老年雄性子代大鼠体重显着增加（P<0.05）,空腹胰岛素水平升高,体内出现胰岛素抵抗;收缩压无显着差异,舒张压和平均动脉压显着升高,具有统计学意义。2)高糖组中基质金属蛋白酶2表达升高（P<0.05）,而其天然组织抑制剂1表达下降（P<0.05）,提示细胞外基质重塑;去氧肾上腺素介导的血管收缩反应和压力诱导的肌源性张力均减弱,提示血管功能发生改变,这种改变可能与肠系膜动脉中L-型钙通道的功能降低有关。3)血管平滑肌细胞的收缩型基因（如α-SMA等）表达显着降低。同时,胰岛素信号通路IR/IRS-1/PI3K信号通路表达下调,利用原代平滑肌细胞证明胰岛素信号通路和L-型钙通道均可调控血管平滑肌细胞的细胞表型。结论:孕期高糖饮食抑制了老年雄性子代大鼠肠系膜动脉上L-型钙通道和PI3K的功能和表达,从而改变了血管平滑肌细胞的细胞表型,最终导致肠系膜动脉功能减弱,发生动脉硬化。
张晓东[3]（2019）在《桑色素在血管内皮细胞功能中的作用及机制研究》文中研究说明高血压是我国最常见的心血管疾病,其本质是微循环障碍。血压的升高是以外周阻力的增加为基础,其中阻力血管功能的改变促进了高血压的发生和发展。血管中的内皮细胞对维持血管功能尤为重要,内皮损伤导致血管功能障碍,引起血压升高。目前高血压患者主要通过服用降压药来控制血压,但是这些药物在维持血压的平稳性中具有局限性。研究发现,黄酮类化合物具有降血压的作用,桑色素被报道具有抗炎、抗氧化、抗凋亡的作用。但是,桑色素在血管内皮细胞功能中的作用还有待深入探究。本研究从桑色素在阻力血管内皮细胞功能和炎症诱导的内皮细胞损伤中的作用及机制两方面来探究其在高血压中的作用。主要结果如下:1、通过血管张力实验检测桑色素对离体大鼠肠系膜动脉血管功能的影响发现,桑色素可浓度梯度性的引起大鼠肠系膜动脉血管的舒张。在N-硝基-L-精氨酸甲酯（N?-Nitro-L-arginine methyl ester hydrochloride,L-NAME）诱导的高血压大鼠动物模型中,桑色素也可浓度梯度性引起模型大鼠肠系膜动脉血管舒张。并且,桑色素与离体的模型大鼠肠系膜动脉血管共孵育,显着提高模型大鼠肠系膜动脉血管对乙酰胆碱（Acetylcholine,ACh）介导的血管舒张的能力。通过对大鼠血压的测量,发现,在给定的桑色素喂食量下可降低模型大鼠的血压,并可提高模型大鼠肠系膜动脉血管对乙酰胆碱介导的血管舒张能力。2、阻力血管对血压的控制起着重要作用。内皮衍生的超极化因子（Endothelium-derived hyperpolarizing factor,EDHF）通过引起内皮细胞超极化介导血管舒张,是介导阻力血管舒张的关键途径。内皮细胞中瞬时受体电位香草素亚家族4（Transient receptor potential vanilloid,TRPV4）通道的激活引起Ca2+内流可介导EDHF的产生。通过对离体大鼠肠系膜动脉血管进行血管张力实验发现,桑色素可内皮依赖性引起大鼠肠系膜动脉血管舒张。随后,在离体血管和细胞水平证明了桑色素通过激活TRPV4通道诱导内皮细胞中Ca2+内流介导血管舒张。由于TRPV4通道激活引起的细胞内Ca2+浓度的升高可激活参与EDHF机制的小电导钙激活的钾离子通道(small conductance Ca2+activated K+channels,SK)通道。通过对离体大鼠肠系膜动脉血管进行血管张力实验发现,SK通道参与桑色素介导的内皮依赖性的血管舒张。通过对原代内皮细胞中K+和细胞极化状态变化的研究发现,桑色素通过激活TRPV4和SK通道引起原代内皮细胞发生K+外流和细胞超极化。3、由于高血压的发生常伴有炎症水平的升高,炎症可使内皮细胞发生损伤,影响内皮细胞正常的功能。由于桑色素具有抗炎抗氧化的作用,因此,本研究在体外细胞水平探究桑色素对炎症引起的内皮细胞损伤的作用。细胞活力检测显示,氧化型低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL）可显着降低人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）的细胞活力,桑色素作用下可显着提高细胞活力。ox-LDL通过抑制HUVECs的细胞迁移能力、提高细胞氧化应激和细胞炎症因子水平引起HUVECs的损伤;桑色素作用下可显着缓解ox-LDL对HUVECs造成的损伤,说明桑色素对HUVECs起到保护作用。4、自噬是应激状态下的一种细胞保护机制,研究发现,天然化合物可以通过诱导内皮细胞产生自噬,起到心血管保护作用。本研究通过对自噬相关蛋白的表达和介导自噬产生的信号通路的分析来探究桑色素对内皮细胞的保护作用。结果显示:桑色素作用于ox-LDL处理的HUVECs可显着提高细胞内LC3蛋白和降低p62蛋白的表达,提高了HUVECs的自噬水平。自噬抑制剂氯喹（chloroquine phosphate,CQ）作用下,显着抑制HUVECs的细胞迁移能力、提高细胞氧化应激和提高细胞炎症因子水平。通过CQ抑制细胞自噬可以逆转桑色素对HUVECs的保护作用。对诱导自噬产生的信号通路的探究发现,在桑色素的作用下,细胞中p-AMPK的表达提高、p-mTOR的表达降低,说明AMPK信号通路被激活。在AMPK抑制剂Compoud C（CC）的作用下,AMPK信号通路被抑制、桑色素诱导的自噬水平的升高被抑制、桑色素对HUVECs起到保护作用被逆转。说明,桑色素通过激活AMPK信号通路诱导自噬产生介导对HUVECs的保护作用。
张严焱[4]（2019）在《AKAP150在有氧运动改善原发性高血压脑动脉功能中的作用及机制》文中研究指明目的:血管平滑肌L型钙通道（LTCC）是血管张力和血压调节的重要机制,而A激酶锚定蛋白AKAP150可将多种酶聚集于特定细胞区域,提高信号转导效率,在高血压血管离子通道重构中发挥着重要作用。有氧运动是原发性高血压的有效防治手段,但其作用机理远未明了。本研究以AKAP150为切入点,观察LTCC在有氧运动改善原发性高血压脑动脉功能中的作用,并探讨AKAP150/蛋白激酶Cα（PKCα）途径在运动调控高血压脑动脉平滑肌LTCC功能中的机制。方法:12周龄雄性正常血压（Wistar-Kyoto,WKY）及自发性高血压大鼠（Spontaneously hypertensive rat,SHR）,随机分为正常血压安静组（WKY-SED）,正常血压运动组（WKY-EX）,高血压安静组（SHR-SED）和高血压运动组（SHR-EX）;运动组进行中等强度跑台训练。12周后,采用股静动脉插管手术、离体微血管张力测定、膜片钳、TIRF钙成像、免疫荧光和免疫蛋白印迹技术,观察大鼠心血管反应,脑动脉张力,LTCC全细胞、单通道电流和钙星活动,以及AKAP150/PKCα信号途径变化。离体实验,脑动脉转染AKAP150 shRNA,血管紧张素II（Ang II）培养后,检测AKAP150、LTCCα1c亚基表达以及脑动脉收缩特性。结果:（1）有氧运动可显着降低SHR-EX组大鼠体重、收缩压、舒张压、平均动脉压（P<0.05）。（2）有氧运动后,SHR-EX组对Ang II、Bay K8644诱发的收缩压升高幅度,对nifedipine诱发的收缩压降低幅度均分别显着低于SHR-SED组（P<0.05）。（3）有氧运动显着减弱LTCC通道在高血压脑动脉张力调节中的贡献（P<0.05）;抑制SHR脑动脉平滑肌LTCC全细胞电流密度的上调（P<0.05）。（4）与SHR-SED相比,SHR-EX脑动脉平滑肌细胞LTCC单通道开放概率nPo和持续性钙星活动nPs均显着降低（P<0.05）。（5）有氧运动显着抑制高血压引起的PKCα活性增强,表现为降低PKCα在高血压脑动脉收缩,血管平滑肌LTCC单通道、全细胞电流中的作用（P<0.05）。（6）脑动脉血管平滑肌AKAP150蛋白表达在SHR-SED组显着上调（P<0.05）,SHR-EX组表达下调（P<0.05）。（7）与SHR-SED相比,SHR-EX组脑动脉平滑肌细胞AKAP150膜上聚集和PKCα膜转运均显着下降（P<0.05）。（8）与SHR-SED相比,SHR-EX组脑动脉平滑肌细胞AKAP150与PKCα,PKCα与LTCCα1c亚基共定位比率均显着降低（P<0.05）。（9）有氧运动显着降低SHR-EX组血浆血管紧张素原（AGT）和Ang II水平（P<0.05）;显着抑制Ang II在高血压脑动脉血管平滑肌LTCC单通道电流中的作用（P<0.05）。（10）24 h Ang II培养大鼠离体脑动脉,AKAP150表达显着上调（P<0.05）;LTCC及PKCα在脑动脉张力调节中的作用均显着升高（P<0.05）。（11）降低AKAP150表达可减弱LTCC通道和PKCα在脑动脉张力调节中的贡献（P<0.05）;降低AKAP150表达后再给予Ang II培养,LTCC和PKCα在脑动脉张力中的贡献无显着改变（P>0.05）。结论:（1）有氧运动可有效降低自发性高血压大鼠血压,抑制高血压引起的脑动脉平滑肌LTCC通道功能上调,改善脑血管舒缩功能。（2）有氧运动可显着降低高血压脑动脉平滑肌AKAP150表达,抑制PKCα膜转运,减弱高血压引起的LTCC单通道开放概率和持续性钙星活动的上调,缓解SHR脑动脉张力的升高。（3）降低AKAP150表达,可减少Ang II刺激下LTCC和PKCα在脑动脉张力作用中的激活,缓解Ang II所致脑血管张力升高。
张严焱,徐召霞,陈渝,李珊珊,石丽君[5]（2018）在《运动改善高血压肠系膜动脉LTCC和BKCa通道功能的表观遗传调控机制》文中研究说明目的:探讨有氧运动改善自发性高血压大鼠肠系膜动脉平滑肌L型电压门控钙通道(voltage-gated L-type Ca2+channel,LTCC)和大电导钙激活钾通道(large-conductance Ca2+-activated K+channel,BKCa)功能的表观遗传机制。方法:12周龄雄性自发性高血压大鼠（Spontaneously hypertensive rat,SHR）及正常血压大鼠（Wistar-Kyoto,WKY）,随机分为正常血压安静组（WKY-SED）、正常血压运动组（WKY-EX）、高血压安静组（SHR-SED）和高血压运动组（SHR-EX）,运动组进行中等强度跑台运动训练。12周后,取肠系膜动脉,分别采用膜片钳,钙成像、免疫蛋白印迹、qPCR、亚硫酸氢盐测序技术观察血管平滑肌LTCC、BKCa通道全细胞电流,BKCa单通道门控特性,钙火花,LTCCα1c、BKCaα和β1亚基mRNA、蛋白表达,α1c、β1基因启动子区甲基化水平,miR-328表达。离体实验,进行血管平滑肌原代培养,转染miR-328 mimic和miR-328 inhibitor使之过表达或沉默,干扰48 h后检测α1c亚基m RNA、蛋白表达变化。结果:1)有氧运动后,WKY和SHR运动组收缩压均分别显着低于各自安静对照组;2)运动显着减弱SHR肠系膜动脉平滑肌LTCC和BKCa全细胞电流密度的上调;3)运动降低高血压BKCa通道开放概率（Po）及钙火花幅值的升高;4)运动显着抑制了SHR肠系膜动脉BKCaβ1亚基mRNA、蛋白表达上调;高血压时β1基因启动子区呈去甲基化,经有氧运动后甲基化水平升高;5)LTCCα1c蛋白表达在SHR-SED组显着上调,SHR-EX组α1c表达下调;肠系膜动脉miR-328表达与α1c亚基蛋白表达呈高度负相关;6)转染miR-328 mimic 48 h后,α1c亚基蛋白表达显着下降;miR-328 inhibitor组,α1c亚基表达稍上调无显着差异。结论:规律有氧运动可有效降低SHR血压,引起β1亚基启动子区甲基化,调控miR-328在转录后靶向抑制α1c亚基表达,是运动改善高血压肠系膜动脉BKCa和LTCC通道功能重构的表观遗传机制之一。
张蓓琳[6]（2018）在《川芎嗪抑制双肾双夹高血压大鼠基底动脉重构的实验研究》文中提出川芎嗪（ligustrazine）是从伞形科草本植物川芎根茎中提取的一种酰胺类生物碱单体,化学结构为四甲基吡嗪（tetramethylpyrazine,TMP）。研究发现川芎嗪具有抗氧化应激损伤、抗炎性反应、抗钙超载、扩血管、改善微循环、抑制血小板聚集等作用,但对于脑血管重构方面的研究还不深入。因此,深入研究川芎嗪对高血压脑血管重构的影响,有助于进一步扩充该药药理机制。本研究旨在探讨川芎嗪对RHRSP大鼠基底动脉重构的保护机制。本文第一部分主要研究川芎嗪对RHRSP大鼠血压和基底动脉血管重构的影响。本研究选用RHRSP高血压大鼠模型,排除遗传因素干扰,单纯研究高血压进展过程中基底动脉血管重构的变化规律及川芎嗪对其的影响机制。本部分首先采取收缩压测定,并进一步研究高血压进展中ET-1、Ang II和NO水平的变化,提出川芎嗪降压机制可能与其降低血浆和基底动脉组织中ET-1、基底动脉组织中Ang II水平以及升高血浆和基底动脉组织中NO水平相关。接着,通过HE染色、EVG染色、血管环、FN免疫荧光、α-SM actin免疫组化和电镜观察超显微结构的方法分析高血压诱导的基底动脉血管重构的变化规律和川芎嗪对其影响的作用机制;进一步通过PCNA、Ki67免疫荧光、Brdu免疫组化方法研究川芎嗪对高血压诱导的基底动脉中膜平滑肌细胞增殖的影响。最后,通过PTEN免疫组化和western blot分析的方法,发现高血压进展与PI3K/AKT信号途径相关,川芎嗪可能通过减弱PI3K/AKT信号途径对抗基底动脉血管重构。第二部分研究川芎嗪对ET-1或Ang II诱导的BASMCs细胞增殖模型的影响。本部分首先筛选体外模型ET-1或Ang II的最佳作用条件;进一步研究川芎嗪对ET-1或Ang II诱导的BASMCs细胞增殖和细胞周期的影响,发现川芎嗪通过下调cyclin D1和上调P27使细胞周期阻滞于G1/G0期,抑制BASMCs细胞的增殖;接着研究川芎嗪对ET-1或Ang II诱导的BASMCs细胞氧化应激的影响,发现川芎嗪可抑制BASMCs细胞的氧化应激反应;最后通过PI3K激动剂IGF-1确定川芎嗪通过减弱PI3K/AKT信号途径而抑制ET-1或AngⅡ诱导的细胞增殖和氧化应激反应。
赵光远,王荃[7]（2018）在《血管活性药物/正性肌力药物的受体分布特点与选择》文中认为血管活性药主要包括血管加压药、正性肌力药和血管扩张药,通过作用于肾上腺素能受体和非肾上腺素能受体来实现对心血管系统的调节。可通过对心肌的直接作用（有无正性肌力作用）和对血管张力的直接作用（收缩或扩张血管）分为强心扩张血管药（多巴酚丁胺、米力农）、强心收缩血管药（去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺）、单纯收缩血管药（去氧肾上腺素、血管加压素）和单纯扩张血管药（硝普钠）。血管活性药的选择要根据临床病理生理状态及血流动力学情况,选择合适的血管活性药物及剂量,减少潜在不良反应。
吴蕾[8]（2016）在《孕期高糖对老年子代心血管功能的影响及机制研究》文中指出【目的】研究孕期高糖对老年子代心血管系统功能的影响及相关调控机制。【方法】孕鼠自妊娠第1天至胎鼠出生给予20%蔗糖水和正常食物,其老年子代大鼠为高糖组;正常妊娠的老年子代大鼠为对照组。用血气分析仪和渗透压仪检测血液电解质及血浆渗透压水平;以放射免疫法检测血浆及血管组织Ang II浓度;通过股动、静脉置管术,监测静脉注射Ang II和Losartan后血压的变化;分离制备1)离体胸主动脉环,检测其对AngⅡ、Losartan+Ang II和L-NAME+AngⅡ的应答;2)离体肠系膜小动脉,检测其对AngⅡ、Losartan+Ang II、L-NAME+AngⅡ、Nifedipine+Ang II和Mibefradil+Ang II的应答;用钙离子成像技术检测离体肠系膜小动脉[Ca2+]i对AngⅡ和Losartan+Ang II的应答;以膜片钳全细胞记录模式,检测肠系膜小动脉平滑肌细胞L-Ca及T-Ca电流及其对Ang II和Losartan+Ang II的应答;Real-time PCR检测血管组织中AT1a R、AT1b R、e NOS、Cav1.2、Cav3.1、TBP和GR的m RNA表达;Western Blotting法检测血管组织中AT1R、e NOS、Cav1.2、Cav3.1、TBP和GR的蛋白表达;以染色质免疫共沉淀法检测肠系膜血管组织中AT1a R启动子区域H3Ac、H3K4me3、H3K9me3和H3S10ph的修饰程度,以及与TBP和GR的结合水平。【结果】与对照组相比,孕期高糖的老年子代血液Ang II浓度无显着改变,而胸主动脉、肠系膜小动脉组织中Ang II浓度显着升高,且AT1R的m RNA和蛋白表达均显着增加;静息状态血压显着升高,对外周和中枢Ang II的升压应答显着增强,对外周和中枢Losartan的降压效应显着增强;胸主动脉和肠系膜小动脉对Ang II的收缩应答均显着增强,并可被Losartan抑制;胸主动脉和肠系膜小动脉内皮舒张应答均显着减弱,e NOS的m RNA和蛋白表达均显着下降;肠系膜小动脉[Ca2+]i对AngⅡ的升高应答显着增加,且可被Losartan抑制;肠系膜小动脉平滑肌细胞全细胞T-Ca电流显着增强,L-Ca电流无显着改变,然而L-Ca电流对Ang II的增强应答显着增加,且可被Losartan抑制;肠系膜血管组织中Cav3.1的m RNA和蛋白表达均显着增加,而Cav1.2的m RNA和蛋白表达无显着改变;肠系膜血管组织中AT1a R启动子区域的H3Ac、H3K4me3、和H3S10ph修饰显着增加,而H3K9me3修饰显着下降,TBP和GR的m RNA和蛋白表达均无明显改变,但与AT1a R启动子区域的结合显着增加。【结论】孕期高糖可程序化地影响老年子代的血管功能,其机制与RAS调控血压功能的改变及与血管内皮功能受损、离子通道及表观遗传学机制改变等有关。
韩文志[9]（2014）在《高血压、同型半胱氨酸和冷环境所致血管内皮细胞损伤保护效应药物作用特征的研究》文中进行了进一步梳理血管内皮是一层位于血液与血管壁之间单层内皮细胞，构成了血液和组织间物质交换和选择性通透的屏障，能够通过识别血液流动过程中的物理、化学信号，合成释放各类生物活性因子做出应答。血管内皮通过监测、整合各类血管源性信号，不仅参与止血、抗凝、血管活性物质代谢等过程，对于维持循环系统生理功能、调节血管张力、保持体液平衡也有着重要作用。由于血管内皮分布广泛且功能众多，极易受到各种危险因子的侵害，血流剪切力改变、高血压、高血脂、高血糖、高同型半胱氨酸、冷暴露等因素均能造成血管内皮细胞损伤，使其处于氧化应激状态或发生炎症反应，导致血管内皮细胞功能紊乱的发生。血管内皮细胞功能紊乱也是导致各类心血管疾病发生的重要因素，在动脉粥样硬化，移植物血管病，高血压，充血性心脏衰竭，原发性肺动脉高压、败血症和炎性综合症等各类心血管疾病中均伴随着血管内皮损伤和功能障碍。乙酰胆碱诱导的内皮依赖性血管舒张反应现已被作为检验内皮细胞功能紊乱程度的首选指标。而离体血管条实验则是一类通过监测离体血管收缩与舒张反应并以此评价血管组织功能状态或药物作用特点的药理学实验方法。本研究以离体血管条实验技术平台为基础，围绕血管内皮细胞保护，对高血压、同型半胱氨酸和冷环境所导致的内皮细胞功能损伤及与之相关的内皮细胞保护药物作用特点进行了研究，为研究新型抗高血压、抗动脉粥样硬化以及冷损伤的防治药物提供实验依据。第一部分部分高血压药物扩张大鼠肠系膜阻力血管的作用特征埃他卡林（iptakalim，Ipt）作为一类全新结构类型的KATP通道开放剂，动物实验和临床试验表明其具有确切、平稳和持久的降压作用，现已完成的临床实验研究结果表明，Ipt对血压正常的受试者没有明显影响，对高血压患者具有明显的降压作用，其作用平稳，并且对心率无显着影响，无严重不良事件发生，安全性较好。实验室前期在研究Ipt扩张血管作用特点时发现，随着大鼠肠系膜微动脉血管管径的减小，Ipt的扩血管作用越强。由于阻力血管构成了血压调控的主体，且血管管径越小，所形成的外周阻力也越大，Ipt选择性扩张微小血管的作用特点也与其在整体实验上具有强效降压的作用效果相一致。此外，还发现随着血管内灌注压的增高，Ipt的扩血管作用也逐渐增强，该结果也与临床试验中Ipt选择性作用于高血压患者的特点相一致。上述研究结果表明Ipt在发挥扩血管作用时具有对高血压状态下阻力血管的选择性。本部分实验对比研究了Ipt与血管紧张素Ⅱ受体阻断药、钙通道阻滞药、α1受体阻滞剂、钾通道开放剂以及内皮素受体阻断剂等临床常用高血压药物扩张大鼠肠系膜微动脉的作用特点，结果显示氯沙坦、缬沙坦、氨氯地平、硝苯地平、哌唑嗪、特拉唑嗪、吡那地尔、二氮嗪、波生坦等临床常用降压药物在扩张微动脉血管时均不具有对管径的选择性，对（100-300）μm范围内的微动脉血管扩张作用效果无明显差异。在扩张不同灌注压下的微动脉血管时，上述药物均表现出了对压力状态的一定选择性，随着灌注压的降低，扩血管作用出现一定程度上的减弱。但与Ipt对压力状态的选择性相比，上述药物扩血管作用受压力的影响明显弱于Ipt，除Ipt外其他药物在20mmHg压力状态时均表现出一定的扩血管作用。第二部分NNMR靶向性创新药物先导结构HH103对同型半胱氨酸病理生理状态下内皮细胞保护作用的药理学特征同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）诱发的血管内皮细胞功能紊乱是导致各类心血管疾病发生的重要因素，高血压、动脉粥样硬化和血栓等疾病的发生均与之相关。本实验室前期研究表明，激活血管内皮细胞非神经性M受体（non-neuronal muscarinic receptor，NNMR）能够有效减轻动脉粥样硬化损伤。槟榔碱作为NNMR激动剂能够通过提高eNOS表达，促进NO释放，抑制黏附因子和趋化因子IL-8受体的过度表达有效对抗高血脂诱发大鼠动脉粥样硬化的发生。我们以槟榔碱为结构母核，设计合成了新结构化合物HH103并对其扩张血管及对抗同型半胱氨酸损伤的药理学作用进行了研究。在离体血管实验上对比HH103和槟榔碱的扩血管特征发现，HH103的作用效果更强，两者均具有完全的内皮依赖性。但与槟榔碱的作用特征所不同的是，M受体非特异性阻断剂阿托品不能拮抗HH103的扩血管作用，同时在前期研究中发现HH103不能诱发离体豚鼠回肠收缩，表明该化合物不激活M受体。通过添加一氧化氮合酶阻断剂L-NAME或环氧合酶阻断剂吲哚美辛（indomethacin，Indo）发现HH103和槟榔碱的扩血管作用均受到一定抑制，经两种阻断剂共同孵育后二者的血管舒张作用与去除内皮后的作用效果无明显差异，提示HH103和槟榔碱的扩血管作用与诱导血管内皮细胞释放NO和PGI2有关。通过Hcy孵育大鼠尾动脉血管复制损伤模型发现，Hcy能够剂量依赖的造成血管内皮依赖性舒张反应减弱，而对硝普钠（sodium nitroprusside，SNP）引起的非内皮依赖性舒张无明显影响。HH103预处理能够明显改善Hcy损伤后的尾动脉内皮依赖性舒张反应，使用L-NAME阻断NO或Indo阻断PGI2后，HH103对上述舒张作用的改善作用均受到一定抑制。此外在内皮细胞增殖实验中，HH103能够剂量依赖的对抗Hcy对内皮细胞的增殖损伤。实验结果表明HH103促进内皮细胞释放NO和PGI2不仅介导了血管的舒张反应还在一定程度上发挥了改善内皮细胞功能、减少内皮损伤的作用。除此之外HH103还能够剂量依赖的刺激内皮细胞释放NO，以及对抗角叉菜胶诱发小鼠尾动脉血栓形成的作用。综上所述，以槟榔碱为母核合成的新化合物HH103在扩张血管方面的作用效果优于槟榔碱，该作用不通过激活M受体实现，显示其具有作为NNMR特异性激动剂存在的可能。此外，HH103能够对抗Hcy造成的血管内皮功能损伤以及内皮细胞增殖抑制，并具有显着的抗血栓形成作用，此类药理学作用与其刺激内皮细胞释放NO和PGI2有关。第三部分冷环境所致血管舒缩功能的变化特征以及内皮细胞活性药物的作用特征冷损伤主要包括直接的细胞冻结损伤和外周缺血诱发的组织损伤。外周缺血主要是由于冷环境条件下体表血管收缩以及内皮细胞损伤导致炎性反应发生进而诱发形成血栓阻塞微循环所致。由于冷损伤多具有不可逆性，因此我们从冷环境条件下体表及肢端的外周循环障碍及低温导致的内皮细胞损伤入手，研究低温条件下血管舒张及收缩功能变化，探讨通过扩张肢端血管、保护血管内皮细胞，改善血液循环、减少冷损伤发生的可行性。通过体外血管环实验研究发现，冷暴露能够明显降低血管收缩能力，随着温度的降低相同浓度苯肾上腺素（phenyllphrine，PE）作用下的血管张力值出现明显下降；与之相对应的是SNP诱发的血管非内皮依赖的舒张反应逐渐增强，提示低温条件下的血管更易于舒张，冷暴露引起的外周血管收缩更易于被药物所拮抗。哌唑嗪、山莨菪碱等非内皮依赖的扩血管药物在低温条件下的作用效果优于37℃组，起效浓度更低、扩血管作用更强。由这一作用特点推测此类药物作为预防药物服用时对正常体温下的血液循环影响较小，当体表温度降低时能有效扩张外周血管，改善微循环。本研究发现，低温会引起乙酰胆碱（acetylcholine，Ach）内皮依赖地扩血管作用减弱，导致血管内皮细胞对血管舒张的调节功能出现一定损伤。使用不同浓度维生素E（vitamin E，Vit E）孵育血管能够明显增强低温条件下血管内皮依赖的舒张作用。同时还发现洗必泰液在直接孵育血管时会引起内皮细胞功能损伤，在使用时应注意控制药物浓度，避免因受冻部位通透性改变造成内皮损伤。以上结果表明冷暴露过程中血管舒缩功能和内皮细胞的调节作用均有改变，冷环境下血管收缩能力减弱，非内皮依赖的扩血管药物作用增强。此外，冷环境还会引起内皮细胞功能损伤，Vit E能够保护内皮对抗低温对内皮依赖性血管舒张反应的影响。基于上述改变及冷损伤发生发展过程，针对外周血管收缩以及内皮细胞损伤为研究制定冷损伤预防策略、开发防冻效应药物奠定了实验基础。
符金娟[10]（2014）在《肥胖Zucker大鼠肠系膜动脉多巴胺D1受体介导的血管舒张功能受损及其机制》文中研究说明研究背景和目的：肥胖和高血压是代谢综合症（metabolic syndrome,MS）的两个重要组成部分，通常在同一个体中并存，促进了心血管的发生与发展[1][2]。关于肥胖引起的高血压病因尚未完全清楚，研究发现肥胖个体胰岛素抵抗以及高胰岛素血症是其中一个重要因素[1][2][3][4]。胰岛素要对交感神经系统的激活[5]、血管平滑肌增值[6]、肾脏水钠潴留[7]、对前列腺素合成的抑制效应[8]等都可以参与肥胖相关的高血压的发生和发展。多巴胺是一种众所周知的中枢神经递质。其在肾脏和肾上腺功能、机体水盐平衡和血压方面具有重要调节作用。根据结构和药理学特性不同，多巴胺受体分为两个亚群: D1类、D2类受体。D1类受体由D1和D5组成。D2类受体由D2、D3和D4组成, D1受体是多巴胺家族中最主要的亚型。以往的研究结果显示肾脏多巴胺系统功能受损参与了高血压的发生和发展[9][10]。受损的中枢系统多巴胺D2受体通过增加食物的摄入量从而参与机体肥胖的发生[11][12]。既往研究还发现肥胖Zucker大鼠中D1受体排钠利尿功能下降[1][2]。虽然肾脏在血压长期调节中发挥重要作用[3]，血压增高的过程中同样伴随着血管阻力的增加[4]。在阻力血管中，D1类受体在中膜中表达而D2类受体主要在内膜和中外膜过渡带表达。既往研究表明血管D1, D2,和D5受体表达下降参与了衰老相关的血压增高的过程[5]。然而，在肥胖Zucker大鼠这一高血压模型中血管上D1受体的功能是否受损还没有相关的报道，而这正是本研究的目的。方法：第一部分：12-14周肥胖Zucker大鼠和瘦Zucker大鼠肠系膜三级动脉D1受体介导的血管舒张功能的的比较目前对微血管（直径＜200um）张力的记录国内外均采用小血管肌动描记仪进行精确测定；因D1受体的表达量下降和基础磷酸化水平增加均可以削弱D1受体的功能，我们分别采用蛋白免疫印迹和免疫共沉淀的方法对D1受体的表达和磷酸化水平进行定量。1、取6只12-14周胖、瘦Zucker大鼠气管切开、左颈动脉插管用于监测血压。禁食12小时后用罗氏血糖监测仪测量血浆葡萄糖浓度，血浆胰岛素水平通过酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA）法测定。2、采用等距小血管肌动描记仪（型号DMT610，丹麦）实时监测肠系膜三级动脉的张力。D1受体的表达和磷酸化分别通过蛋白免疫印迹（Westen Blot，WB）和免疫共沉淀（Co-immunoprecipitation，IP）进行定量。第二部分：高胰岛素血症和高糖血症在肥胖Zucker大鼠肠系膜三级动脉D1受体介导的血管舒张功能受损中的作用肥胖Zucker大鼠体内存在明显的胰岛素抵抗、高胰岛素血症和伴随年龄逐渐增加的血糖水平，为了探求肥胖Zucker大鼠体内的高胰岛素和高糖是否参与了D1受体受损的过程，我们用经典的PPAR-γ受体激动剂罗格列酮（Rosiglitazone，ROG）长期灌胃的方法，观察肥胖Zucker大鼠血浆胰岛素和血糖水平是否下降、肠系膜D1受体功能是否有所恢复；另外我们用瘦Zucker大鼠建立了高胰岛素和高糖动物模型。营养诱发动物模型（食物喂养法）是胰岛素抵抗动物模型建立最常用的方法，其中高脂饲料（high-fat diet, HFD）为诱导该模型的常见饲料；链霉素（Streptomycin，STZ）65mg/kg一次性腹腔注射是快速建立高糖动物模型的常用方法。1、肥胖的Zucker大鼠（6至8周龄）分为罗格列酮组（灌胃，10毫克/公斤/天，6周）和溶剂对照组，到大鼠长至12-14周龄时按照前述方法测量血压、血浆胰岛素、血糖以及肠系膜三级血管D1受体血管舒张功能，并比较给药组和对照组D1受体的表达和基础磷酸化水平的差异。2、将瘦Zucker大鼠（8到10周龄）分为三组，喂食高脂食物（脂肪热量占50%）诱发高胰岛素血症组、一次性腹腔注射链霉素（65毫克/公斤）诱发高血糖组和溶剂对照组。到大鼠长至12-14周龄时按照前述方法测量血压、血浆胰岛素、血糖以及肠系膜三级血管D1受体血管舒张功能，并比较三组之间D1受体的表达和基础磷酸化水平的差异。第三部分：体外实验予以高胰岛素和高糖刺激大鼠胚胎胸主动脉平滑肌细胞，观察其D1受体表达和磷酸化的变化前面实验我们已经证实去掉内皮前后D1受体介导的舒张血管功能不变，血管中膜平滑肌上的D1受体介导了fenoldopam的舒血管效应，故此阶段实验我们外源性地加入浓度梯度的胰岛素和葡萄糖观察两者对平滑肌细胞D1受体表达和磷酸化的影响，以进一步证实前面体内实验的结果。由于丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen-activated proteinkinase，MAPK）是胰岛素重要的下游信号通道分子，故加入MAPK抑制剂后观察高胰岛素对D1受体表达和磷酸化的影响。结果：第一部分：12-14周肥胖Zucker大鼠和瘦Zucker大鼠肠系膜三级动脉D1受体介导的血管舒张功能的的比较1、肥胖Zucker大鼠体重、空腹血浆葡萄糖及胰岛素、血压均高于同龄的瘦Zucker大鼠。2、D1受体激动剂非诺多泮（Fenoldopam）浓度依赖性地（10-7M to10-5M）舒张瘦Zucker大鼠肠系膜三级动脉。去掉内皮均不影响fenoldopam对胖、瘦Zucker大鼠的舒张血管的效应。3、特异性的D1受体拮抗剂SCH23390可以拮抗fenoldopam对胖、瘦Zucker大鼠血管的舒张效应。非诺多泮在胖Zucker大鼠肠系膜三级动脉中介导的受损的舒张作用不是因为血管平滑肌本生的舒张能力下降所致，因为硝普钠（sodium nitroprusside，SNP）介导的血管舒张功能在肥胖Zucker大鼠中并没有受损。4、与瘦Zucker大鼠比较，胖Zucker大鼠肠系膜三级动脉中D1受体的表达下降而其磷酸化增加。第二部分：高胰岛素血症和高糖血症在肥胖Zucker大鼠肠系膜三级动脉D1受体介导的血管舒张功能受损中的作用1、罗格列酮灌胃6周后，胖Zucker大鼠血浆胰岛素、血糖水平下降，血压有所降低。同时罗格列酮可以部分恢复fennoldopam对胖Zucker大鼠肠系膜三级血管的舒张功能，并且胖Zucker大鼠肠系膜动脉组织中D1受体的表达增加而其磷酸化水平有所下降。2、喂食一个月高脂食物后，瘦Zucker大鼠血浆胰岛素水平有所增加而血浆葡萄糖水平和血压均无明显改变。一次性链霉素（streptomycin，STZ）腹腔注射一个月后瘦Zucker大鼠血糖明显增加，血压有所增加而血浆胰岛素水平无明显变化。高胰岛素和高糖模型的瘦Zucker大鼠肠系膜三级动脉均显示出对fenoldopam的反应性下降以及D1受体表达下降、磷酸化增加但前者的表现出更为明显的D1受体功能受损。第三部分：体外实验予以高胰岛素和高糖刺激大鼠胚胎胸主动脉平滑肌细胞，观察其D1受体表达和磷酸化的变化1、加入高胰岛素和高糖刺激24小时后，大鼠胚胎胸主动脉平滑肌细胞（A10cells）中D1受体的表达量下降而磷酸化水平增加。2、预先加入丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）抑制剂PD98059可以部分阻断高胰岛素对D1受体的作用。结论：通过本实验发现，肥胖Zucker大鼠中的高胰岛素血症和高糖血症均可以减少D1受体的表达和增加其磷酸化从而损伤D1受体介导的血管舒张功能。在这个过程中，肥胖Zucker大鼠中的高胰岛素血症对D1受体功能调节的作用比高血糖对D1受体的调节作用更明显。D1受体舒张血管功能受损可能参与了肥胖相关高血压的病理生理过程。
二、肠系膜动脉阻力血管平滑肌钙离子单通道特性及硝普钠的作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、肠系膜动脉阻力血管平滑肌钙离子单通道特性及硝普钠的作用（论文提纲范文）
（1）高盐饮食大鼠血清中THBS1的改变及其在内皮功能损伤中的作用和机制研究（论文提纲范文）
| 英汉缩写词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 研究一 基于iTRAQ技术分析高盐饮食大鼠血清蛋白组学变化 |
| 1.前言 |
| 2.材料和方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 研究二 THBS1在高盐饮食大鼠内皮功能损伤中的作用及机制研究 |
| 1.前言 |
| 2.材料和方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 全文总结 |
| 下一步研究设想 |
| 参考文献 |
| 附录 个人简历 |
| 致谢 |
| 综述 钙库操纵钙内流在心血管疾病和肿瘤中的研究进展 |
| 参考文献 |
（2）孕期高糖饮食对老年雄性子代大鼠肠系膜动脉功能的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 孕期高糖饮食对老年雄性子代大鼠代谢及血压的影响 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、实验小结 |
| 讨论 |
| 第二部分 孕期高糖饮食对老年雄性子代大鼠肠系膜动脉血管结构与功能的影响 |
| 第一节 孕期高糖饮食对老年雄性子代大鼠肠系膜动脉血管结构的影响 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 第二节 孕期高糖饮食对老年雄性子代大鼠肠系膜动脉血管张力的影响 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 第三节 孕期高糖饮食对老年雄性子代大鼠肠系膜动脉肌源性张力的影响 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、实验小结 |
| 讨论 |
| 第三部分 孕期高糖饮食对老年雄性子代大鼠肠系膜动脉血管平滑肌细胞BK通道和L-型钙通道的影响 |
| 第一节 孕期高糖饮食对老年雄性子代大鼠肠系膜动脉血管平滑肌细胞BK通道的影响 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 第二节 孕期高糖饮食对老年雄性子代大鼠肠系膜动脉血管平滑肌细胞L-型电压依赖性钙通道的影响 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、实验小结 |
| 讨论 |
| 第四部分 孕期高糖饮食对老年雄性子代大鼠肠系膜血管平滑肌细胞表型的影响 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、实验小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 糖尿病及并发症的研究进展 |
| 参考文献 |
| 缩略词中英文对照表 |
| 博士期间撰写的文章、获奖及参与的科研项目 |
| 致谢 |
（3）桑色素在血管内皮细胞功能中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 血管内皮细胞与高血压 |
| 1.1.1 血管内皮细胞 |
| 1.1.2 高血压 |
| 1.1.3 内皮细胞功能障碍与高血压 |
| 1.2 黄酮类化合物 |
| 1.2.1 黄酮类化合物概述 |
| 1.2.2 桑色素简介 |
| 1.2.3 桑色素与高血压 |
| 1.3 瞬时电位离子通道 |
| 1.3.1 TRP通道概述 |
| 1.3.2 TRPV4 通道简介 |
| 1.3.3 TRPV4 通道与高血压 |
| 1.4 自噬 |
| 1.4.1 自噬概述 |
| 1.4.2 自噬在内皮细胞中的作用 |
| 1.5 本论文的主要研究内容 |
| 1.5.1 研究背景及立题依据 |
| 1.5.2 研究内容 |
| 第二章 桑色素对L-NAME诱导的高血压的作用研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 动物 |
| 2.2.2 实验试剂和仪器 |
| 2.2.3 试剂和溶液的配制 |
| 2.2.4 Wire myography血管张力检测 |
| 2.2.5 Pressure myography血管张力检测 |
| 2.2.6 血压检测 |
| 2.2.7 高血压大鼠造模 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 桑色素对离体大鼠肠系膜动脉血管功能的影响 |
| 2.3.2 桑色素通过体外作用对离体高血压大鼠肠系膜动脉血管功能的影响 |
| 2.3.3 桑色素对高血压大鼠血压的影响 |
| 2.3.4 桑色素喂食对高血压大鼠肠系膜动脉血管功能的影响 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 桑色素在肠系膜动脉血管舒张中的作用机制研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 动物、质粒和细胞 |
| 3.2.2 实验试剂和仪器 |
| 3.2.3 试剂和溶液的配制 |
| 3.2.4 Wire myography血管张力检测 |
| 3.2.5 Pressure myography血管张力检测 |
| 3.2.6 肠系膜原代动脉内皮细胞分离与培养 |
| 3.2.7 免疫荧光染色 |
| 3.2.8 Western Blot分析 |
| 3.2.9 细胞内Ca~(2+)检测 |
| 3.2.10 细胞培养和转染 |
| 3.2.11 细胞内K+检测 |
| 3.2.12 细胞膜电位检测 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 内皮细胞对桑色素介导的血管舒张功能的影响 |
| 3.3.2 NO通路对桑色素介导血管舒张作用的影响 |
| 3.3.3 PGI2 通路对桑色素介导血管舒张作用的影响 |
| 3.3.4 H2O2 通路对桑色素介导血管舒张作用的影响 |
| 3.3.5 TRPV4 通道对桑色素介导的血管舒张作用的影响 |
| 3.3.6 TRPV4 通道对桑色素介导的肠系膜原代动脉内皮细胞Ca~(2+)内流的影响 |
| 3.3.7 桑色素对TRPV4 基因敲除小鼠肠系膜原代动脉内皮细胞中Ca~(2+)内流的影响 |
| 3.3.8 桑色素对过表达TRPV4的HEK293 细胞中Ca~(2+)内流的影响 |
| 3.3.9 SK通道对桑色素介导的血管舒张作用的影响 |
| 3.3.10 桑色素对肠系膜原代动脉内皮细胞K+外流的影响 |
| 3.3.11 桑色素对肠系膜原代动脉内皮细胞膜电位变化的影响 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 桑色素在ox-LDL诱导的内皮细胞损伤中的作用研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 细胞株 |
| 4.2.2 实验试剂和仪器 |
| 4.2.3 试剂和溶液的配制 |
| 4.2.4 细胞活力检测(台盼蓝染色计数法) |
| 4.2.5 细胞迁移(transwell) |
| 4.2.6 细胞活性氧(ROS)检测 |
| 4.2.7 SOD和 MDA检测 |
| 4.2.8 qRT-PCR分析 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 桑色素对ox-LDL处理的HUVECs细胞活力变化的影响 |
| 4.3.2 桑色素对ox-LDL处理的HUVECs细胞迁移变化的影响 |
| 4.3.3 桑色素对ox-LDL处理的HUVECs细胞氧化应激水平的影响 |
| 4.3.4 桑色素对ox-LDL处理的HUVECs细胞炎症因子变化的影响 |
| 4.3.5 桑色素对ox-LDL处理的HUVECs细胞粘附分子变化的影响 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 桑色素在内皮细胞损伤中的作用机制探究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 细胞株 |
| 5.2.2 实验试剂和仪器 |
| 5.2.3 试剂和溶液的配制 |
| 5.2.4 Western Blot分析 |
| 5.2.5 细胞迁移(transwell) |
| 5.2.6 细胞活性氧(ROS)检测 |
| 5.2.7 qRT-PCR分析 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 桑色素对HUVECs细胞自噬水平的影响 |
| 5.3.2 桑色素介导的自噬对HUVECs细胞迁移的影响 |
| 5.3.3 桑色素介导的自噬对HUVECs细胞氧化应激水平变化的影响 |
| 5.3.4 桑色素介导的自噬对HUVECs细胞炎症水平的影响 |
| 5.3.5 AMPK信号通路对桑色素介导的HUVECs自噬水平的影响 |
| 5.3.6 桑色素介导的AMPK信号通路对HUVECs细胞迁移的影响 |
| 5.3.7 桑色素介导的AMPK信号通路对HUVECs氧化应激水平的影响 |
| 5.3.8 桑色素介导的AMPK信号通路对HUVECs细胞炎症水平的影响 |
| 5.4 本章小结 |
| 主要结论与展望 |
| 主要结论 |
| 展望 |
| 论文主要创新点 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文 |
（4）AKAP150在有氧运动改善原发性高血压脑动脉功能中的作用及机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 前言 |
| 1.1 选题背景 |
| 1.2 选题目的意义 |
| 1.3 研究内容 |
| 1.4 技术路线图 |
| 2 文献综述 |
| 2.1 高血压与血管功能 |
| 2.1.1 血管张力变化调控血压 |
| 2.1.2 血管平滑肌收缩机制 |
| 2.2 血管平滑肌电压门控钙通道 |
| 2.2.1 L型电压门控钙通道 |
| 2.2.2 T型电压门控钙通道 |
| 2.2.3 高血压与血管平滑肌LTCC |
| 2.3 血管平滑肌细胞钙星调控 |
| 2.3.1 VSMC钙星的分子和生物物理特性 |
| 2.3.2 VSM钙星的生理功能 |
| 2.3.3 钙星与血管功能紊乱 |
| 2.4 AKAP150在血管生理病理中的作用 |
| 2.5 运动与高血压及动脉功能 |
| 2.6 小结 |
| 3 实验一 LTCC在有氧运动改善原发性高血压脑动脉功能中的作用 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 研究目的 |
| 3.3 材料与方法 |
| 3.3.1 实验动物与分组 |
| 3.3.2 大鼠有氧运动模型建立 |
| 3.3.3 尾动脉无创血压监测 |
| 3.3.4 大鼠心血管反应性测定 |
| 3.3.5 离体微血管张力测定 |
| 3.3.6 脑动脉血管平滑肌细胞急性分离 |
| 3.3.7 全细胞钙电流记录 |
| 3.3.8 qPCR |
| 3.3.9 免疫蛋白印迹 |
| 3.3.10 数据统计与分析 |
| 3.4 研究结果 |
| 3.4.1 各组大鼠动脉血压变化 |
| 3.4.2 各组大鼠心血管反应变化 |
| 3.4.3 各组大鼠脑动脉平滑肌LTCC通道功能和表达变化 |
| 3.5 分析与讨论 |
| 3.5.1 有氧运动对自发性高血压大鼠动脉血压的影响 |
| 3.5.2 有氧运动对自发性高血压大鼠心血管反应的影响 |
| 3.5.3 有氧运动对高血压大鼠脑动脉平滑肌LTCC通道的影响 |
| 3.5.4 小结 |
| 4 实验二 AKAP150途径在有氧运动改善原发性高血压脑动脉LTCC功能中的作用 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 研究目的 |
| 4.3 材料与方法 |
| 4.3.1 实验动物与分组 |
| 4.3.2 大鼠有氧运动模型建立 |
| 4.3.3 脑动脉血管平滑肌细胞急性分离 |
| 4.3.4 电生理单通道记录 |
| 4.3.5 TIRF钙成像 |
| 4.3.6 离体微血管张力测定 |
| 4.3.7 全细胞钙电流记录 |
| 4.3.8 免疫蛋白印迹 |
| 4.3.9 细胞免疫荧光 |
| 4.3.10 数据统计与分析 |
| 4.4 研究结果 |
| 4.4.1 各组大鼠脑动脉平滑肌LTCC单通道及钙星活动变化 |
| 4.4.2 各组大鼠脑动脉平滑肌PKCα活性变化 |
| 4.4.3 各组大鼠脑动脉平滑肌AKAP150/PKCα途径蛋白表达变化 |
| 4.4.4 各组大鼠脑动脉平滑肌AKAP150/PKCα膜转运变化 |
| 4.4.5 各组大鼠脑动脉平滑肌细胞AKAP150/PKCα/LTCC共定位变化 |
| 4.5 分析与讨论 |
| 4.5.1 有氧运动对高血压脑动脉平滑肌LTCC单通道功能的影响 |
| 4.5.2 PKCα在有氧运动调控高血压脑动脉平滑肌LTCC通道中的作用 |
| 4.5.3 AKAP150/PKCα途径在有氧运动改善高血压脑动脉平滑肌功能中的作用 |
| 4.5.4 小结 |
| 5 实验三 AngII–AT1R介导AKAP150改善脑动脉功能的机制 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 研究目的 |
| 5.3 材料与方法 |
| 5.3.1 实验动物 |
| 5.3.2 超高效液相色谱–串联质谱法(HPLC–MS/MS) |
| 5.3.3 脑动脉血管平滑肌细胞急性分离 |
| 5.3.4 电生理单通道记录 |
| 5.3.5 脑动脉培养及转染 |
| 5.3.6 免疫蛋白印迹 |
| 5.3.7 离体微血管张力测定 |
| 5.3.8 数据统计与分析 |
| 5.4 研究结果 |
| 5.4.1 各组大鼠血浆中AGT和AngII水平变化 |
| 5.4.2 AngII对各组大鼠脑动脉平滑肌LTCC单通道功能的影响 |
| 5.4.3 降低AKAP150表达后Ang II培养大鼠脑动脉收缩特性变化 |
| 5.5 分析与讨论 |
| 6 研究结论与建议 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 创新点 |
| 6.3 建议 |
| 附录 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）运动改善高血压肠系膜动脉LTCC和BKCa通道功能的表观遗传调控机制（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物分组及运动方案 |
| 1.2 电生理记录 |
| 1.2.1 肠系膜动脉平滑肌细胞急性分离 |
| 1.2.2 全细胞电流记录 |
| 1.2.3 单通道纪录 |
| 1.3 钙成像 |
| 1.4 免疫蛋白印迹 |
| 1.5 RT-PCR |
| 1.6 亚硫酸氢盐测序法 (Bisulfite sequencing PCR, BSP) |
| 1.7 VSMC原代培养及转染 |
| 1.8 数据分析处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 有氧运动对高血压大鼠动脉血压的影响 |
| 2.2 运动减弱SHR肠系膜动脉平滑肌LTCC和BKCa电流 |
| 2.3 运动抑制SHR肠系膜动脉平滑肌BKCa通道门控特性及钙火花功能改变 |
| 2.4 各组肠系膜动脉血管平滑肌LTCC和BKCa通道蛋白及m RNA表达变化 |
| 2.5 运动对高血压肠系膜动脉CACNA1C和KCNMB1基因启动子区甲基化的影响 |
| 2.6 运动经miR-328靶向调控LTCC通道α1c亚基表达 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
（6）川芎嗪抑制双肾双夹高血压大鼠基底动脉重构的实验研究（论文提纲范文）
| 内容提要 |
| 中文摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略对照表 |
| 第1章 综述 |
| 1.1 川芎嗪的作用机制 |
| 1.2 高血压对于基底动脉的影响 |
| 1.3 论文主要的研究内容和方法 |
| 第2章 川芎嗪对RHRSP大鼠血压和基底动脉重构的影响 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第3章 川芎嗪抑制ET-1/AngII诱导的脑血管平滑肌细胞增殖及其机制的研究 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介及攻读博士期间发表的学术论文及取得的科研成果 |
| 致谢 |
（8）孕期高糖对老年子代心血管功能的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 孕期高糖对老年子代RAS介导的心血管功能的影响 |
| 一、材料与方法 |
| 二、结果 |
| 三、小结 |
| 第二部分 孕期高糖对老年子代RAS介导的血管钙离子流的影响 |
| 一、材料与方法 |
| 二、结果 |
| 三、小结 |
| 第三部分 孕期高糖对老年子代RAS改变的表观遗传机制研究 |
| 一、材料与方法 |
| 二、结果 |
| 三、小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| References |
| 英文缩略词表 |
| 攻读博士研究生期间撰写的文章和获得的研究资助 |
| 致谢 |
（9）高血压、同型半胱氨酸和冷环境所致血管内皮细胞损伤保护效应药物作用特征的研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 部分高血压药物扩张大鼠肠系膜阻力血管的作用特征 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 实验结果 |
| 1. 氯沙坦扩张大鼠肠系膜微动脉血管作用特征 |
| 2. 缬沙坦扩张大鼠肠系膜微动脉血管作用特征 |
| 3. 氨氯地平扩张大鼠肠系膜微动脉血管作用特征 |
| 4. 硝苯地平扩张大鼠肠系膜微动脉血管作用特征 |
| 5. 哌唑嗪扩张大鼠肠系膜微动脉血管作用特征 |
| 6. 特拉唑嗪扩张大鼠肠系膜微动脉血管作用特征 |
| 7. 吡那地尔扩张大鼠肠系膜微动脉血管作用特征 |
| 8. 二氮嗪扩张大鼠肠系膜微动脉血管作用特征 |
| 9. 波生坦扩张大鼠肠系膜微动脉血管作用特征 |
| 讨论 |
| 第二部分NNMR靶向性创新药物先导结构HH103对同型半胱氨酸病理生理状态下内皮细胞保护作用的药理学特征 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 实验结果 |
| 1. HH103 对大鼠尾动脉血管的扩张作用 |
| 2. HH103 内皮依赖的扩血管作用特征 |
| 3. HH103 内皮依赖性扩血管作用分子途径的研究 |
| 3.1 阿托品对 HH103 扩血管作用的影响 |
| 3.2 L-NAME 对 HH103 扩血管作用的影响 |
| 3.3 吲哚美辛对 HH103 扩血管作用的影响 |
| 3.4 L-NAME 合并吲哚美辛对 HH103 扩血管作用的影响 |
| 4. HH103 对同型半胱氨酸所致内皮细胞损伤的保护作用 |
| 4.1 同型半胱氨酸对大鼠尾动脉内皮依赖性舒张反应的影响 |
| 4.2 同型半胱氨酸对大鼠尾动脉非内皮依赖性舒张反应的影响 |
| 4.3 HH103 对同型半胱氨酸所致血管内皮依赖性舒张功能损伤的影响 |
| 4.4 HH103 对抗同型半胱氨酸诱发内皮细胞功能损伤的分子机制 |
| 4.5 同型半胱氨酸对内皮细胞增殖活性的影响 |
| 4.6 HH103 对同型半胱氨酸诱发内皮细胞增殖活性损伤的影响 |
| 5. HH103 对内皮细胞一氧化氮释放的影响 |
| 6. HH103 对冷环境下角叉菜胶诱发小鼠尾部血栓的影响 |
| 讨论 |
| 第三部分 冷环境所致血管舒缩功能的变化特征以及内皮细胞活性药物的作用特征 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 实验结果 |
| 1. 低温条件下血管收缩功能变化特征 |
| 2. 低温条件下血管非内皮依赖性舒张反应变化特征 |
| 3. 低温条件下血管内皮依赖性舒张反应变化特征 |
| 4. 低温条件下哌唑嗪扩血管作用变化特征 |
| 5. 低温条件下山莨菪碱扩血管作用变化特征 |
| 6. 维生素 E 对低温所致血管内皮依赖性舒张功能损伤的影响 |
| 7. 维生素 C 对低温所致血管内皮依赖性舒张功能损伤的影响 |
| 8. 洗必泰对低温所致血管内皮依赖性舒张功能损伤的影响 |
| 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（10）肥胖Zucker大鼠肠系膜动脉多巴胺D1受体介导的血管舒张功能受损及其机制（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| Abstract |
| 摘要 |
| 第一章 前言 |
| 1.1 立论依据 |
| 1.2 研究意义 |
| 1.3 研究内容与方法 |
| 第二章 肥胖 Zucker 大鼠和瘦 Zucker 大鼠肠系膜三级动脉 D_1受体介导的血管舒张功能的的比较 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 统计学处理 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 第三章 高胰岛素血症和高糖血症在肥胖 Zucker 大鼠肠系膜三级动脉 D1受体介导的血管舒张功能受损中的作用 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 统计学处理 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 结论 |
| 第四章 高胰岛素和高糖对大鼠胚胎胸主动脉平滑肌细胞 D_1 受体表达和磷酸化的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.2 统计学处理 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 结论 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
四、肠系膜动脉阻力血管平滑肌钙离子单通道特性及硝普钠的作用（论文参考文献）
- [1]高盐饮食大鼠血清中THBS1的改变及其在内皮功能损伤中的作用和机制研究[D]. 徐芳芳. 安徽医科大学, 2021(01)
- [2]孕期高糖饮食对老年雄性子代大鼠肠系膜动脉功能的影响及机制研究[D]. 冯雪芹. 苏州大学, 2020(06)
- [3]桑色素在血管内皮细胞功能中的作用及机制研究[D]. 张晓东. 江南大学, 2019(05)
- [4]AKAP150在有氧运动改善原发性高血压脑动脉功能中的作用及机制[D]. 张严焱. 北京体育大学, 2019(08)
- [5]运动改善高血压肠系膜动脉LTCC和BKCa通道功能的表观遗传调控机制[J]. 张严焱,徐召霞,陈渝,李珊珊,石丽君. 体育科学, 2018(11)
- [6]川芎嗪抑制双肾双夹高血压大鼠基底动脉重构的实验研究[D]. 张蓓琳. 吉林大学, 2018(12)
- [7]血管活性药物/正性肌力药物的受体分布特点与选择[J]. 赵光远,王荃. 中国小儿急救医学, 2018(03)
- [8]孕期高糖对老年子代心血管功能的影响及机制研究[D]. 吴蕾. 苏州大学, 2016(03)
- [9]高血压、同型半胱氨酸和冷环境所致血管内皮细胞损伤保护效应药物作用特征的研究[D]. 韩文志. 中国人民解放军军事医学科学院, 2014(02)
- [10]肥胖Zucker大鼠肠系膜动脉多巴胺D1受体介导的血管舒张功能受损及其机制[D]. 符金娟. 第三军医大学, 2014(01)