一、复方中药四逆汤中乌头碱类二萜生物碱的电喷雾串联质谱研究（论文文献综述）
柯慧[1]（2020）在《补肾益精经典方剂右归饮化学成分分析及安全性评价》文中认为背景右归饮来源于《景岳全书·卷五十一》,由熟地黄、枸杞子、山茱萸、山药、附子、肉桂、杜仲、甘草8味中药组成,功效阴阳双补,填精补血,主治命门不足,肾精亏虚证,是着名的经典名方。右归饮临床应用广泛,药理作用研究较多,但右归饮中到底含有哪些化学成分,其安全性如何,尚未见系统报道。右归饮亦是本课题组主攻领域——“肾精”的生物物质基础及其作用机制阐释,和“补肾益精”方药治疗“肾精亏虚证”的药理作用机制阐释的工具药物。右归饮的药物组成,涵盖了不同极性、多个种类的化合物成分,分析和鉴定这些化学成分,是控制该方实验用药质量和阐明其药理作用物质基础的关键环节。故而,研究右归饮的化学成分和安全性具有重要意义。本研究得到重庆市科委-计生委中医药科研重点项目（zy201801001）“右归饮治疗肾精亏虚证核心功效物质组及其证候蛋白组学阐释”的支持。目的1.定性分析右归饮复方的化学成分,并定量检测其中的指标性成分和主要活性成分;2.评价右归饮的急性毒性和长期毒性。方法1.两种供试品的制备①右归饮水煎液的制备:按处方组成称取8种生药材加水8倍,煎煮2次,每次0.5 h,合并药液,浓缩至2 g·mL-1生药质量浓度,-4℃储存备用。②右归饮配方颗粒液的制备:按剂量折算,称取8种药物的配方颗粒混合,加43 mL水,加热（75℃）,配制成1.9 g·mL-1生药质量浓度,即得。③样品的制备:分别量取上述右归饮水煎液和配方颗粒液0.1ml,稀释100倍（正离子模式检测）或1000倍（负离子模式检测）,超声,离心,吸取上清液,即得。2.右归饮化学成分的定性分析方法①色谱条件:采用waters,ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1×100 mm,1.7μm）进行分离,流动相为0.1%甲酸乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）,梯度洗脱,正负离子模式下采集数据。②定性检测方法:采用UPLC-QTOF-MS/MS对右归饮水煎液和配方颗粒液中的化学成分进行定性,并利用一级质谱确定相对分子量,二级质谱获得裂解信息,结合标准品或文献数据比较确定化学结构。3.右归饮化学成分的定量分析方法①定量成分的选择:将水煎液与配方颗粒液定性分析获得的共有成分进行网络药理学作用预测,取预测结果中主要药理作用所对应的成分,以及2015年版《中国药典》指标性成分,作为定量待测成分。②色谱条件:采用 waters,ACQUITY UPLC BEH C18 色谱柱（2.1×100 mm,1.7μm）进行分离,流动相为0.1%甲酸乙腈溶液（A）-0.1%甲酸水（B）,梯度洗脱,采用电喷雾离子源,正负离子模式下采集数据。③定量检测方法:采用UPLC-QqQ-MS/MS对右归饮水煎液和配方颗粒液中的这18个化学成分进行含量测定。4.右归饮急性毒性试验:1)分组及给药:将KM小鼠随机分为空白组和给药组,每组10只,给药组灌胃给予240 g·kg-1右归饮配方颗粒液,0.04 ml·10g-1/只/次,一天3次,共720 g·kg-1,相当于人临床用量的533倍。2)观察指标:①外观形态:观察一般体征,活动状态、每周体重。②脏器组织:脑、胸腺、心、脾、胃、肺、肾脏外观并计算其脏器指数。③血常规指标:用血细胞分析仪检测全血中WBC、HGB、MCH、MCHC、HCT、MCV和PLT的含量。④肝功能指标:用全自动血液生化仪测定血清中ALT、AST、ALP、TP、GLU、T-CHO和TG的含量。⑤肾功能指标:用全自动血液生化仪测定血清中CREA、UREA和CK的含量。5.右归饮长期毒性试验:1)分组与给药:将SD大鼠随机分为空白组和给药组,每组60只,给药组灌胃给予60 g·kg-1右归饮配方颗粒液,相当于人临床用量的45倍,一天1次,连续90 d,1 mL·100g-1/只/次,给药结束后,恢复期观察30 d。2)观察指标:①外观形态:观察一般体征,活动状态、每周体重。②脏器组织:脑、胸腺、心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胃、卵巢、子宫、附睾、睾丸外观形态,计算脏器指数:石蜡切片HE染色观察其组织形态学。③血常规指标:用血细胞分析仪检测全血中HGB、RBC、HCT、MCH、MCHC和PLT的含量。④肝功能指标:用全自动血液生化仪测定血清中AST、ALP、ALB、TP、GLU、TG和T-CHO的含量。⑤肾功能指标:用全自动血液生化仪测定血清中CREA、UREA和CK的含量。结果1.右归饮化学成分的定性 1)右归饮水煎液的定性:①确定了右归饮水煎液中80个质谱峰的药材来源。②确定了右归饮水煎液中85个化学成分的结构。其中,源于山茱萸的有7个环烯醚萜类和2个鞣质类成分;源于枸杞子的有3个苯丙素类和5个黄酮类成分;源于杜仲的有1个环烯醚萜类和7个木脂素类成分;源于肉桂的有1个苯丙素类成分;源于熟地黄的有6个苯丙素类和6个环烯醚萜类成分;源于炙甘草的有2个苯丙素类、8个黄酮类和18个三萜皂苷类成分;源于制附子的有19个生物碱类成分。2)右归饮配方颗粒液的定性:①确定了右归饮配方颗粒液中232个质谱峰的药材来源。②确定了右归饮配方颗粒液中29个化学成分的结构。其中,源于山茱萸的有3个环烯醚萜类和1个鞣质类成分;源于枸杞子的有2个黄酮类成分;源于杜仲的有2个木脂素类成分;源于肉桂的有2个苯丙素类;源于熟地黄的有2个苯丙素类成分;源于炙甘草的有1个黄酮类和4个三萜皂苷类成分;源于制附子的有12个生物碱类成分。2.右归饮两种剂型定量成分的选择①网络药理学预测结果,治疗骨质疏松症的药效成分有28个:槐果碱、宋果灵、类叶升麻苷、异类叶升麻苷、马钱苷、甘草苷、甘草酸、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷酸、没食子酸、肉桂醛等。②右归饮水煎液和配方颗粒液中已确定结构的化学成分共有16个:乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、肉桂醛、类叶升麻苷、异类叶升麻苷、莫诺苷、马钱苷、甘草苷、甘草酸、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷酸、新乌头原碱。前15个为2015年《药典》含量测定的指标性成分。3.右归饮化学成分的定量分析 利用多反应监测模式（MRM）可以同时检测右归饮水煎液和配方颗粒液中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头原碱、宋果灵、槐果碱、肉桂醛、甘草酸、松脂醇二葡萄糖苷、异类叶升麻苷、类叶升麻苷、莫诺苷、马钱苷、甘草苷、京尼平苷酸18个化学成分的含量,专属性、线性（r≥0.9947）、重复性（≤1.08%）、精密度（≤1.34%）、稳定性（≤1.73%）和平均回收率（89.49～106.67%）方法学验证指标符合2015年《中国药典》的含量测定要求。4.右归饮配方颗粒液最大给药量灌胃未见KM小鼠出现显着急性毒性反应 与空白组相比,右归饮720 g·kg-1组小鼠有如下变化:①右归饮组小鼠一般体征正常,均未出现中毒现象;体重增加无显着性变化（*P>0.05）;②右归饮组小鼠脑、心、脾等主要脏器的外观及脏器指数均无显着性改变（*P>0.05）;③右归饮组小鼠的血常规指标WBC、HGB、MCH、MCHC、HCT、MCV和PLT,无统计学差异（*P>0.05）;④右归饮组小鼠肝功能指标ALT、AST、ALP、TP、GLU、T-CHO和TG的含量均无显着性变化（*P>0.05）;⑤右归饮组小鼠肾功能指标CREA、UREA和CK的含量均无显着性变化（*P>0.05）。5.右归饮配方颗粒液灌胃给药90 d及停药再恢复30 d未见SD大鼠有显着长期毒性反应 与空白组相比,右归饮60 g·kg-1组大鼠有如下变化:①右归饮组大鼠的动物一般体征均无异常变化,也无大鼠死亡;大鼠每周体重无显着性差异;②主要脏器的大体形态学及脏器指数均无显着性改变;③血常规指标HGB、RBC、HCT、MCH、MCHC和PLT,无统计学差异;④给药90 d及停药恢复30 d后,右归饮组血清中肝功能指标ALT、AST、ALP、ALB、TP、TG、GLU和T-CHO的含量均无显着性差异;恢复30 d后,血清中肝功能指标ALT、AST、ALP、TP、GLU和T-CHO的含量显着降低;⑤右归饮组血清中肾功能指标CREA的含量均无显着性差异,给药90 d及恢复30 d后,UREA显着降低,给药90 d后,CK显着增加,恢复30 d后,CK显着性降低（均*P<0.05）,但都在正常大鼠的生理范围内。结论1.经UPLC-QTOF-MS/MS定性检测,右归饮水煎液中至少含85个结构明确的化学成分,右归饮配方颗粒液中至少含29个结构明确的化学成分,二者共有16个化学成分。2.所建立的UPLC-QqQ-MS/MS的定量检测方法,能同时快速检测出右归饮水煎液或配方颗粒液中15个预测的药效成分（其中8个指标性成分）和3个毒性成分的含量。3.急性毒性与长期性毒性试验显示右归饮配方颗粒液口服临床安全性较高。
卢元媛[2]（2018）在《基于液相色谱质谱联用技术对复方中药艾可清化学成分及其调节细胞色素P450酶作用的研究》文中进行了进一步梳理复方中药“艾可清”是广州中医药大学热带医学研究所研究人员研创的专利配方,由黑顺片、淫羊藿、虎杖、黄柏、黄芩、甘草等10味中药组成。该方用于国家艾滋病中医药关爱项目临床试治HIV/AIDS,多年来观察到口服给药有稳定CD4计数,改善临床症状和体征、提高生活质量等效果。虽然艾可清的临床疗效良好,但其药效物质基础尚未明确。为了进一步合理开发,使其符合成分明确、质量稳定可控、机制基本清楚、安全有效等现代中药的特点,该复方的药效物质基础研究是十分必要的。目的:本研究以复方中药艾可清为研究对象,基于液质联用技术,对复方中的化学物质进行体内体外系统的定性分析,旨在明确艾可清的化学物质组成和探索可能在体内发挥药效的成分。从药物代谢酶的角度研究艾可清及其活性成分对细胞色素P450酶的影响,以阐明艾可清对联合使用的抗病毒化药的相互作用的物质基础,为临床合理用药提供指导,也为艾可清进一步的药理作用和作用机制研究提供基础。方法:1.建立UPLC-ESI-QTOF-MS方法,对对照品、艾可清提取物和各味药材提取物进行测定。通过分析总结对照品裂解规律,对艾可清中化合物分析质谱碎片、精确分子质量结合参考文献对艾可清的化学成分进行系统的定性分析和来源归属。2.采用UPLC-ESI-QTOF-MS法,测定SD大鼠连续灌胃给药艾可清后的血浆、胆汁、尿液和粪便等生物样品。通过比较对照品、艾可清提取物、含药大鼠生物样品及空白大鼠生物样品质谱数据,分析鉴定艾可清在大鼠体内的原型成分和代谢产物。3.采用体外孵育人肝微粒体法,通过人肝微粒与混合探针、待测物共孵育,LC-MS法测定代谢产物含量,计算计算IC50值,初步评价艾可清复方提取物对人肝脏药物代谢酶 CYP450 中 8 个重要亚型（CYP2D6,CYP2C8,CYP2E1,CYP2C19,CYP1A2,CYP2B6,CYP2C9 和 CYP3A4）的抑制作用。利用 Western Blot 技术,检测连续灌胃给药7天后艾可清对大鼠肝脏的CYP2D6和CYP3A4蛋白表达的影响。4.利用分子对接计算技术,采用SYBYL-X 2.1.1软件及Discovery Studio 2016软件,以药物代谢酶两个重要的亚型CYP3A4和CYP2D6蛋白为靶蛋白,对已鉴定的艾可清中123个化学成分旳抑制活性进行预测,结合体内成分分析结果和文献研究,筛选出候选化合物进一步进行体外验证实验的候选化合物。通过体外孵育人肝微粒体法测定候选化合物对CYP3A4和CYP2D6的抑制作用。5.采用HPLC-MS/MS法建立同时测定大鼠血浆中洛匹那韦和利托那韦含量的分析方法。采用乙腈沉淀蛋白法进行样品前处理,分别以氘代洛匹那韦、氘代利托那韦为内标,色谱分析采用 Agilent 的 ZORAX Eclipse Plus C18（3.5 μm,50× 4.6mm）,柱温为室温,流动相为35%A（0.1%甲酸-水）-65%B（0.1%甲酸-乙腈）。质谱检测采用电喷雾离子源（ESI）,正离子模式,MRM检测。本研究进行了系统的方法学评价,并运用于评价艾可清对抗HV药物克力芝在大鼠体内的药代动力学的影响。结果:1.建立了 UPLC-ESI-QTOF-MS法,共鉴定了艾可清中123个化合物,包括生物碱类33个、黄酮类57个、皂苷类12个、蒽醌类5个、丹酚酸类3个,其他13个,并对化学成分植物来源进行了归属,且系统阐明了组方中的10种药材代表性化合物群的裂解规律。2.采用建立的UPLC-ESI-QTOF-MS法对艾可清在大鼠血浆、胆汁、尿液和粪便中的原型成分及代谢物进行了分析。共分析鉴定了艾可清在大鼠体内吸收入血浆共52个原型成分和8个代谢产物;经胆汁排泄的原型成分共36个,代谢产物8个;经尿液排出的原型成分共45个;经粪便排泄的原型成分53个。3.体外孵育人肝微粒体法测定结果显示艾可清甲醇提取物在0-0.5 mg/mL浓度范围内,IC50值分别为 0.0077,0.0753,0.144,0.0995,0.0435,0.1045,0.0493,0.2049 mg/mL,表明艾可清可不同程度地抑制CYP2D6,CYP2C8,CYP2E1,CYP2C19,CYP1A2,CYP2B6,CYP2C9 和 CYP3A4,以对 CYP2D6 的抑制作用较为明显。Western blot法检测了大鼠肝脏CYP3A4和CYP2D6的蛋白表达,研究结果显示,与对照组相比,艾可清组大鼠肝脏的CYP3A4和CYP2D6的蛋白表达均显着降低。4.经分子对接计算,结合吸收入血的成分分析结果,从已鉴定的化合物中计算模拟出18个可能的活性化合物。18个化合物体外孵育人肝微粒体法测定,结果显示艾可清中的成分甘草次酸（IC50=3.36 μM）、丹酚酸A（IC50=6.05 μM）、宝蕾苷Ⅰ（IC50=9.470 μM）、鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ（IC50=13.50 μM）对CYP3A4存在不同程度的抑制作用;丹酚酸A对于CYP2D6存在中等强度的抑制作用（IC50=8.49μM）,小檗碱对CYP2D6存在弱抑制作用（IC50=13.45 μM）。5.经方法学验证,本文建立的HPLC-MS/MS法准确、灵敏、简便、快速。洛匹那韦和利托那韦分别在30-10000 ng/mL和3-1000 ng/mL范围内的有较好的线性关系,最低定量限分别为30 ng/mL和3 ng/mL;日内、日间精密度均小于15%,洛匹那韦和利托那韦的准确度分别介于95.3%～107%和96.7%～104%之间;提取回收率均大于88.7%;基质效应基本可以忽略;经考察血浆样品室温放置6h、血浆样品提取后进样器放置72 h、血浆样品-80℃经历3次冷冻-解冻循环、-80℃放置37天的稳定性,两个检测成分稳定性较好。该定量分析方法应用于评价艾可清对抗HIV药物克力芝在大鼠体内的药代动力学的影响。结果显示,艾可清与克力芝联合用药组的洛匹那韦非房室模型参数 AUC（0-t）、AUC（0-∞）、MRT（0-t）、t1/2z、Tmax、Vz/F、CLz/F、Cmax与单用克力芝对照组比较,差异均无统计学意义,MRT（0-∞）与单用克力芝对照组比较,差异有统计学意义;而艾可清与克力芝联合用药组的利托那韦非房室模型参数 AUC（0-t）、AUC（0-∞）、MRT（0-t）、MRT（0-∞）、t1/2z、Tmax、Vz/F、CLz/F、Cmax与单用克力芝对照组比较,差异均无统计学意义。结果表明,艾可清与克力芝联合用药时,在大鼠体内对其组成成分洛匹那韦和利托那韦的药代动力学参数无明显的影响。结论:本论文首次对复方中药艾可清中化学成分进行系统分析识别,艾可清成分在体内的代谢变化过程分析,为提高艾可清的质量控制水平提供了化学成分组成的基础。体内体外药理实验提示艾可清对CYP3A4和CYP2D6有抑制作用,临床上联合HARRT药物使用,有可能通过抑制CYP3A4、CYP2D6的活性,影响药物的代谢特征。艾可清中的成分甘草次酸、丹酚酸A、宝藿苷Ⅰ、鼠李糖基淫羊芸次苷Ⅱ、以及小檗碱等成分对艾可清复方整体的CYP3A4和CYP2D6抑制作用有贡献。当艾可清与抗HIV药物克力芝联合用药时,对后者在大鼠体内的药动学参数无显着影响。
程贺立[3]（2018）在《液相色谱—串联质谱法测定生物碱及其代谢产物》文中认为几千年来,我国民间积累了大量关于草本植物乌头、马钱子和麻黄的秘方、药方和养生食谱,由于使用不当,食物中毒事件时有发生。因此,建立高效、准确的食物中生物碱含量的检测方法,以及对生物碱药物代谢进行探索具有十分重要的现实意义。主要研究内容包括以下四个章节:第一章:介绍了3类生物碱的地理分布、物理化学性质、生物活性和毒性;常规检测方法:薄层色谱、气相色谱、毛细管电泳法和液相色谱法;前处理方法:液液萃取、固相萃取和磁固相萃取;并介绍了药物代谢研究的意义和方法。第二章:对生物碱检测的质谱条件进行优化,在选定的质谱条件下,对生物碱进行多级质谱串联分析。对获得的质谱图上碎片峰进行研究,将碎片离子进行归属,总结3类生物碱的质谱裂解规律。第三章:建立固相萃取-液相色谱/串联质谱法,并用于炖肉和青菜中15种生物碱的分析。对固相萃取柱和样品的提取溶剂进行了优化;对所建立的方法进行验证,对于青菜样品,方法检出限为0.018-0.305 ng/g、定量限为0.059-0.971 ng/g,平均回收率为71.3-133%;对于炖肉样品,方法检出限为0.022-0.368 ng/g、定量限为0.080-0.982 ng/g,平均回收率为67.2-135%。第四章:建立磁固相萃取-液相色谱/串联质谱法,并用于炖肉和青菜中的15种生物碱的分析。合成了一种新型的磁性纳米材料（PAMAM@Mag-CNTs）并将其作为吸附剂应用于吸管端固相萃取（DPT-MSPE）中,用于样本中的生物碱的净化。对所建立的方法进行验证,对于青菜样品,方法检出限为0.016-0.317 ng/g、定量限为0.054-1.058 ng/g,平均回收率为84.2-122%,;对于炖肉样品,方法检出限为0.011-0.329 ng/g,其定量限为0.035-0.870 ng/g,平均回收率在为82.4-125%,目标物的回收率整体比固相萃取-液相色谱/串联质谱法中的好。第五章:采用生物缓冲液加入人体细胞P450酶体系来模拟人体的生理环境,对6种乌头类生物碱进行体外代谢模拟实验,利用高分辨质谱仪对反应液进行检测。结果发现,在不同的P450酶催化下,每种生物碱反应体系均发现生物碱原药和2-3种相同的代谢产物,说明6种酶对6种生物碱的代谢反应为协同作用。
李燕[4]（2018）在《附子治疗阳虚的整合药动学—药效学研究》文中进行了进一步梳理目的:运用药动学和药效学方法探讨附子治疗阳虚便秘和心阳衰两种经典阳虚模型的物质基础和作用机制。附子总生物碱为附子中主要活性部位,具有温阳通便的作用。故采用附子总生物碱进行治疗大鼠阳虚便秘的整合药动学、药效学研究。但附子总生物碱中的脂溶性生物碱有毒,而水溶性生物碱具有温阳强心的作用。所以,选择水溶性生物碱进行治疗大鼠慢性心衰的整合药动学、药效学研究。方法:在附子总生物碱治疗大鼠阳虚便秘模型的药动学、药效学实验中,将大鼠随机分成正常组和阳虚便秘组,分别均分为低、中、高剂量组,依次灌胃附子总生物碱9.6 mg/kg、19.2 mg/kg、38.4 mg/kg。通过眼眶内眦静脉取血和液液萃取处理血浆方法制备血浆样品,再运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱测定不同时间点附子总生物碱中的乌头碱、新乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、乌头原碱的血药浓度,研究其体内药动学过程。然后,采用酶标仪测定各组胃动素、胃泌素、内皮素和血管活性肠肽四者的含量。最后,运用主成分分析法对血药浓度和激素含量进行整合药动学、药效学分析,以阐释附子治疗大鼠阳虚便秘的物质基础和作用机制。在附子水溶性生物碱治疗大鼠慢性心衰模型的药动学、药效学实验中,将大鼠随机分成正常组和慢性心衰组,每组又分为低、中、高剂量组,分别按每次0.072 g/kg、0.143 g/kg、0.286 g/kg对大鼠灌胃附子水溶性生物碱,每日一次,连续一周。通过眼眶内眦静脉取血和蛋白沉淀处理血浆方法制备血浆样品,再运用超高效液相色谱测定不同时间点附子水溶性生物碱中的盐酸多巴胺、尿嘧啶、去甲猪毛菜碱、尿苷、氯化甲基多巴胺、鸟苷和去甲乌药碱的血药浓度,绘制药-时曲线,计算药动学参数。然后,运用酶标仪测定血管紧张素Ⅱ、醛固酮、心钠肽、内皮素、脑钠肽五种激素的含量。最后,采用主成分分析法对血药浓度和激素含量进行整合药动学、药效学分析,以探讨附子治疗大鼠慢性心衰的物质基础和作用机制。结果:从低剂量到高剂量的范围内,七种乌头类生物碱的Cmax、AUClast随给药剂量的增加而增加,剂量对附子总生物碱在正常大鼠体内的药动学特征有明显的影响,且附子总生物碱在体内的药动学过程基本符合线性动力学特征。附子总生物碱可增加血浆胃动素、胃泌素、内皮素和血管活性肠肽的含量。附子总生物碱的整合药动学数据、药效学数值仍具有明显的药动学、药效学特征,且整合后与整合前各成分的药动学、药效学特征基本一致,能表达附子总生物碱的药动学、药效学特征。同时,在给药剂量范围内,正常大鼠体内的盐酸多巴胺、尿嘧啶、去甲猪毛菜碱、尿苷、鸟苷和去甲乌药碱的Cmax、AUClast随给药剂量增加而增加,附子水溶性生物碱在体内的药动学过程也基本符合线性动力学特征。附子水溶性生物碱给药后可降低大鼠血浆中血管紧张素Ⅱ、醛固酮、心钠肽、内皮素、脑钠肽的含量。附子水溶性生物碱的整合药动学数据、药效学数值仍具有明显的药动学过程、药效学特征,且整合后与整合前各成分的药动学、药效学特征基本一致,可表达附子水溶性生物碱的药动学、药效学特征。结论:附子中的附子总生物碱可能是治疗大鼠阳虚便秘的主要物质基础,而附子水溶性生物碱可能是治疗大鼠慢性心衰的主要物质基础。附子总生物碱主要通过促进胃动素、胃泌素、内皮素、血管活性肽的分泌而发挥温阳作用。而附子水溶性生物碱主要通过抑制或减少血管紧张素Ⅱ、醛固酮、心钠肽、内皮素、脑钠肽的分泌而发挥温阳作用。本课题主要揭示附子温阳作用的物质基础和作用机制,为附子的临床合理用药提供理论依据。
姜婷[5]（2017）在《基于中药模拟炮制的新疆准噶尔乌头生物碱水解机制研究》文中提出目的:对准噶尔乌头中4种化学成分进行含量测定,并将这4种成分进行模拟炮制,通过液质联用方法测定其水解产物,进而在准噶尔乌头药材中进行验证,分析准噶尔乌头炮制前以及炮制不同时间后生物碱成分的变化情况,总结其质谱裂解规律,揭示准噶尔乌头炮制水解机制,为准噶尔乌头的炮制工艺参数的确定提供理论依据。方法:首先采用HPLC对准噶尔乌头中4种主要化学成分进行含量测定;并对准噶尔乌头进行不同时间的炮制,采用HPLC进行测定,比较准噶尔乌头在炮制不同时间后的HPLC图,比较准噶尔乌头中主要成分的变化情况。其次采用中药模拟炮制方法,以准噶尔乌头中4种主要化学成分为研究对象,结合HPLC和HPLC-MS测定结果,总结各生物碱单体的模拟炮制变化规律,并在准噶尔乌头不同时间的炮制品中进行验证。最后,以准噶尔乌头炮制后的主要产物为研究对象,对其在不同时间的准噶尔乌头炮制品中的含量进行分析,确定准噶尔乌头的炮制工艺参数。结果:三批准噶尔乌头中准噶尔乌头碱、12-表-欧乌头碱、乌头碱和脱氧乌头碱的平均含量依次为1.1113、1.9802、6.5626、0.2709mg/g;经过不同时间的模拟炮制后,准噶尔乌头4种化学成分中乌头碱以及脱氧乌头碱的变化最为明显,乌头碱经过模拟炮制后主要生成一些水解产物,而随着模拟炮制时间的增加,乌头碱逐渐消失,最终检测不到;准噶尔乌头碱与12-表-欧乌头碱经过不同时间的模拟炮制后未发生水解反应。结论:准噶尔乌头中4种主要成分的系统适用性良好;准噶尔乌头经过不同时间的炮制后,初步确定准噶尔乌头的炮制工艺参数为加热56小时,一些成分发生水解产生了新的水解产物,从而达到减毒增效的效果。
姜婷,张江,木卡代斯·斯依提,赵翡翠[6]（2016）在《基于中药模拟炮制的乌头属植物水解机制及液质联用测定方法的研究进展》文中指出生物碱是大多数乌头属药用植物的主要有效成分,具有较高的药理活性和药用价值,但也是其主要的毒性成分,为便于对乌头属植物水解产物的深入研究,主要从中药模拟炮制现状、乌头属植物所含的生物碱种类、水解机制研究现状及液质联用方法几个方面进行综述。
李立纪,张风雷,李秀芳,邹雁宁[7]（2015）在《四逆汤中生物碱成分的电喷雾串联质谱研究》文中进行了进一步梳理目的:观察四逆汤中药附子、附片甘草配伍前后主要成分的含量变化。方法:采用串联质谱ESI-MS/MS检测,定性分析附子、附片中的主要成分在配伍前后含变化。结果:附子、附片与甘草配伍后主要双酯生物碱、单酯生物碱乌头类生物碱均发生变化。
朱慧明[8]（2014）在《基于液质联用技术的芪苈强心胶囊中多组分分析与药代动力学研究》文中研究说明芪苈强心胶囊是中医络病理论指导研发的临床广泛用于慢性心力衰竭的中药新药，临床使用已超过十年，为中国首个具有循证医学研究证据、疗效确切的治疗慢性心衰的中成药。芪苈强心胶囊由黄芪、附子、人参、丹参、葶苈子、泽泻、红花、玉竹、陈皮、桂枝、香加皮等十一味中草药提取而成，其化学成分主要有皂苷类、黄酮类、酚酸类、生物碱等。目前关于芪苈强心胶囊研究多集中在临床疗效和药理学研究方面，化学成分分析和质量控制研究很少，也未有药物代谢动力学研究的报道。本文采用UPLC/Q-TOF-MS/MS作为主要分析方法，利用其快速高效、灵敏度高、特异性强的特点，对芪苈强心胶囊化学成分、血中移行成分进行定性鉴别，并对其9个主要药效成分即乌头生物碱进行定量分析与大鼠体内的药代动力学研究，为进一步阐明药效物质基础提供理论依据和参考价值。第一部分UPLC/Q-TOF-MS/MS法鉴定芪苈强心胶囊中化学成分目的：建立一种超高效液相色谱与串联四极杆飞行时间质谱仪联用技术（UPLC/Q-TOF-MS/MS）全面快速地阐明芪苈强心胶囊的化学组成的分析方法。方法：取芪苈强心胶囊样品研细，取约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇10mL，超声处理30min，放冷，滤过，用50%甲醇补足至原重量后，摇匀，16000r/min离心10min，取上清夜，过滤（0.22μm），取滤液进样分析。色谱条件：色谱柱：Phenomenex Kinetex C18100×2.1mm,2.6μm。流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脱程序为：（0～0.5） min,10%B;（0.5～2.5） min,10%→40%B;（2.5～9）min,40%→70%B;（9～14） min,70%→90%B;（14～15） min,90%→100%B;（15～17） min,100%B;（17～17.1） min,100%→10%B;（17.1～19）min,10%B。柱温：40℃；流速：400μL/min；进样体积：5μL。质谱色谱条件：离子化模式为电喷雾正、负离子模式，正负离子源电压分别为5500V/-4500V，离子源温度为550℃，裂解电压（DP）分别为60V/-55V，碰撞能量（CE）分别为45eV/-40eV，碰撞能量扩展（CES）分别为15eV/20eV。雾化气体为氮气，辅助气1为55PSI，辅助气2为55PSI，气帘气为35PSI。一级质谱母离子扫描范围为100-1500，IDA设置响应值超过100cps的8个最高峰进行二级质谱扫描，子离子扫描范围为50-1500，开启动态背景扣除（DBS）。数据采集软件：Analyst TF1.6software（AB SCEIX，USA）；数据处理软件系统：Peakview1.2software（AB SCEIX，USA）。获取UPLC/Q-TOF MS/MS全扫描质量色谱图和源内裂解的UPLC-TOF/MS色谱图，参照对照品信息或通过分子离子精确质量和同位素拟合度的分析确定分子式，在数据库中检索匹配的化合物，进而解析源内裂解的质谱图，从而对各色谱峰进行指认。并在相同实验条件下对芪苈强心胶囊及其组方各单味药的色谱图进行比对分析,归属色谱峰来源。结果：从芪苈强心胶囊色谱图中共鉴定了139个色谱峰，主要成分包括三萜皂苷类、黄酮类、生物碱类、酚酸类、萜类等。本研究比较全面地阐明了芪苈强心胶囊的化学组成，为芪苈强心胶囊的药效物质基础研究和质量控制奠定了基础。结论：该方法简便、快速，灵敏度，可用于芪苈强心胶囊血中移行成分定性分析。第二部分芪苈强心胶囊UPLC血清指纹图谱研究目的：采用超高效液相色谱（UPLC）法建立芪苈强心胶囊血清指纹图谱，为芪苈强心胶囊血清药物化学及药效物质基础研究提供依据。方法：大鼠灌胃给药制备含药血清，采用Waters ACQUITY UPLCBEH C18色谱柱（2.1mm×100mm，1.7μm），流动相乙腈-0.1%甲酸水，梯度洗脱，流速0.5mL·min-1，柱温40℃，检测波长280nm，分析芪苈强心胶囊大鼠含药血清，并与相同条件下空白血清、体外全方及其11个单味药图谱比对，对色谱峰归属进行分析。结果：建立了芪苈强心胶囊的UPLC血清指纹图谱，共标定了13个共有峰，指认了其中4个共有峰，均为药源性成分，来自香加皮。10批芪苈强心胶囊血清指纹图谱的相似度均在0.868～1.000。结论：本研究建立的方法准确、可靠、重现性好，可用于芪苈强心胶囊血清药物化学及药效物质基础的研究。第三部分UPLC/Q-TOF-MS/MS法鉴定芪苈强心胶囊血中移行成分目的：建立一种超高效液相色谱与串联四极杆飞行时间质谱仪联用技术（UPLC/Q-TOF-MS/MS）全面快速地阐明芪苈强心胶囊血中移行成分的分析方法。方法：采用UPLC/Q-TOF-MS/MS方法，对比芪苈强心胶囊、空白血清、芪苈强心胶囊含药血清总离子流图，质谱图等信息，通过对比各色谱峰的保留时间及质谱图裂解规律，确认大鼠灌胃芪苈强心胶囊内容物后血中移行成分及其归属。结果：大鼠口服芪苈强心胶囊后血中共发现61个入血成分，其中34个为芪苈强心胶囊中原形成分，27个为原形药物的代谢产物。本研究将为阐明芪苈强心胶囊药效物质基础提供依据。结论：该方法简便、快速，灵敏度，可以用于芪苈强心胶囊化学成分定性分析。第四部分UPLC/Q-TOF-MS/MS法快速测定芪苈强心胶囊及其附子中的9个乌头类生物碱成分含量目的：建立一种简便、准确、可靠的UPLC/Q-TOF-MS/MS分析方法，用于芪苈强心胶囊和附子中9个乌头类生物碱成分的含量测定。方法：取芪苈强心胶囊样品研细，取约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇10mL，超声处理30min，放冷，滤过，用50%甲醇补足至原重量后，摇匀，16000r/min离心10min，取上清夜，过滤（0.22μm），取滤液进样分析。色谱条件：色谱柱：Phenomenex Kinetex C18100×2.1mm,2.7μm。流动相由0.1%甲酸水（A）和乙腈（B）组成，梯度洗脱：01min（10%B）,12min（10-30%B）,26min（30–40%B）,67min（40–100%B）,78min（100%B）,88.1min（100–10%B）,8.110min（10%B）.柱温：40℃；流速：400μL/min；进样体积：5μL。每次进样预平衡5min，再进行梯度洗脱。质谱色谱条件：离子喷雾电压，5.5KV；离子源温度,550℃;解簇电压（DP），60V和碰撞能量（CE），35eV。氮气为雾化气和辅助气，雾化气50psi，辅助气50psi，气帘气35psi。在m/z100-1500amu质量范围ESI正离子模式下进行全扫描，积累时间250ms。IDA采用标准：每个分析物，超过100cps的八个最强的碎片离子在1001500amu质量范围内进行子离子扫描，累积时间70ms。碰撞电压差20eV，动态背景扣DBS开启。自动校准系统（CDS）对MS和MS/MS自动进行调谐和校正。数据获取和处理分析采用Analyst TF1.6软件、PeakView1.2软件和MultiQuant2.1.1软件。结果：在一定浓度区间内9种分析物的线性关系良好，r2>0.9940；所有分析物定量限LOQ范围0.030.50ng/mL，日内精密度、日间精密度RSD均小于3.38%，重复性试验RSD均小于4.23%。加样回收率在95.35106.21%范围内，4℃放置24h稳定性良好。芪苈强心复方配伍改变了复方中附子的上述9个生物碱的构成比和总生物碱含量，毒性最大的DDAs（AC、MA、HA）含量明显减少，而MDAs相对含量显着增高。结论：该方法简便快速，灵敏度高，选择性好，可用于芪苈强心胶囊和附子中9个乌头类生物碱成分的含量测定，并为芪苈强心胶囊的质量控制提供了新的分析方法和手段。第五部分基于UPLC/Q-TOF-MS/MS的芪苈强心胶囊中9个乌头类生物碱大鼠体内的药代动力学研究目的：建立一种UPLC/Q-TOF-MS/MS的芪苈强心胶囊中9个乌头类生物碱大鼠体内药代动力学研究分析方法，建立其药-时曲线，获得药动学参数与特征，为临床用药提供参考。方法：大鼠禁食不禁水12h，灌胃给予芪苈强心胶囊内容物，分别于给药前和给药后0.25、0.5、1、2、4、6、8、10、12、24、36、48h乙醚麻醉腹主动脉取血，至经肝素处理的离心管中，3000r/min离心10min，分离血浆，采用固相萃取法预处理样品，内标为地西泮。PhenomenexKinetex C18100×2.1mm,2.7μm；流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脱程序为01min，5%B；13min，5%→10%B；313min，10%→60%B；1313.5min，60%→5%B；13.515min，5%B。柱温：40℃，流速：400μL/min。质谱条件离子化模式：电喷雾离子源（ESI），正离子模式；TOF-MS质谱扫描范围为50-1500Da，MS/MS质谱扫描范围为50-1500Da，喷雾电压（IS）为5500V；雾化温度为550℃，雾化气（Gas1, N2）为50psi，辅助气（Gas2, N2）为50psi，气帘气（Cur, N2）为35psi，裂解电压（DP）60V，碰撞能量（CE）44V，碰撞能量扩展（CES）15V。准确质量数用APCI Positive校正液（利血平）校正。数据获取和处理分析采用Analyst TF1.6软件、 PeakView1.2软件和MultiQuant2.1.1软件。药动学数据采用非室模型处理，用excel软件分析数据。达峰时间（Tmax）和峰浓度（Cmax）由血药浓度曲线直接获得。消除常数（k）由曲线最后4个点的斜率的对数计算得到。消除半衰期T1/2=0.693/k。结果：血浆中附子灵、尼奥林、塔拉地萨敏、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、乌头碱和次乌头碱在0.25～75ng/mL范围内线性关系良好（r2≥0.9946），最低定量限（LLOQ）≤0.247ng/mL。日内、日间精密度的相对标准偏差（RSD）0.4%5.0%，相对误差（RE）为-2.4%6.7%。平均提取回收率为85.70%97.37%，基质效应分别介于94.6399.32%。大鼠灌胃芪苈强心胶囊内容物后附子灵、尼奥林、塔拉地萨敏、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、乌头碱和次乌头碱在体内吸收迅速，迅速分散，药时曲线均出现双峰现象，与文献报道相符；消除相比较平缓，我们推测与生物碱类本身代谢特点、复方配伍以及给药剂量高有关。结论：该法灵敏度高、选择性好、精密度好，可用于大鼠灌胃芪苈强心胶囊后血浆中附子灵、尼奥林、塔拉地萨敏、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、新乌头碱、乌头碱和次乌头碱的药动学研究。根据药动学结果由此可推断芪苈强心胶囊复方配伍可能影响活性成分的药动学特征。
程丽丽,许妍妍,张艳军[9]（2014）在《中药川乌多成分同时检测及药动学评价研究进展》文中研究指明川乌为毛茛科植物乌头（Aconitum carmichaelii Debx.）的干燥母根,有大毒,具有祛风除湿、温经止痛之功效,常用于风寒湿痹、关节疼痛、心腹冷痛等疾病的治疗[1]。川乌化学成分复杂,主要含有生物碱类成分,其中,二萜生物碱是川乌的特征有效成分,具有抗炎、镇痛、镇静、心血管及中枢神经等方面的作用[2-7]。近年来,对二萜生物碱的国内外研究报道较多,现主要从多种二萜生物碱成分的同时检测、药动学研究进展等方面对其作一综述。1二萜生物碱类化学成分川乌中二萜生物碱具有显着的生理活性。根据
谈永霞,王鸣刚,张继,杨宁,田玉汝[10]（2011）在《乌头属植物研究进展》文中指出根据目前国内外学者的研究成果,从基础研究和应用研究两方面对乌头属植物在形态学、化学成分、测定方法、繁殖方法及药用价值方面所取得的研究进展进行了综述,并对存在的问题及研究方向进行了展望,以期为乌头属植物的研究提供参考。
二、复方中药四逆汤中乌头碱类二萜生物碱的电喷雾串联质谱研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、复方中药四逆汤中乌头碱类二萜生物碱的电喷雾串联质谱研究（论文提纲范文）
（1）补肾益精经典方剂右归饮化学成分分析及安全性评价（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 右归饮化学成分的定性分析 |
| 第一节 右归饮水煎液化学成分的定性分析 |
| 1 试验材料 |
| 2 试验方法 |
| 3 试验结果 |
| 3.1 依据标准品比对确定了18个化学结构明确的成分 |
| 3.2 依据质谱分析结合文献数据比对确定了71个化学结构明确的成分 |
| 4 小结 |
| 第二节 右归饮配方颗粒液化学成分的定性分析 |
| 1 试验材料 |
| 2 试验方法 |
| 3 试验结果 |
| 3.1 依据标准品比对确定了16个化学结构明确的成分 |
| 3.2 依据质谱分析结合文献比对确定了13个化学结构明确的成分 |
| 4 小结 |
| 本章讨论 |
| 第二章 右归饮化学成分的定量分析 |
| 第一节 右归饮水煎液和配方颗粒液中定量成分的选择 |
| 1 试验材料 |
| 2 试验方法 |
| 3 试验结果 |
| 3.1 基于网络药理学预测得出治疗骨质疏松症的药效成分有28个 |
| 3.2 右归饮两种药液的共有成分有16个 |
| 3.3 确定指标性成分有18个 |
| 4 小结 |
| 第二节右归饮水煎液和配方颗粒液的定量分析 |
| 1 试验材料 |
| 2 试验方法 |
| 3 试验结果 |
| 3.1 正离子模式下的含量测定方法学验证结果 |
| 3.2 负离子模式下的含量测定方法学验证结果 |
| 3.3 水煎液和配方颗粒液中18个成分的含量测定结果 |
| 4 小结 |
| 本章讨论 |
| 第三章 右归饮配方颗粒液安全性评价 |
| 第一节 右归饮配方颗粒液急性毒性研究 |
| 1 试验材料 |
| 2 试验方法 |
| 3 试验结果 |
| 3.1 24h内给药3次未引起KM小鼠的一般外观体征和体重异常 |
| 3.2 24h内给药3次对小鼠的血常规和血生化未见显着异常 |
| 3.3 24 h内给药3次对小鼠主要脏器的大体形态外观及脏器指数无显着变化 |
| 4 小结 |
| 第二节 右归饮配方颗粒液长期毒性研究 |
| 1 试验材料 |
| 2 试验方法 |
| 3 试验结果 |
| 3.1 右归饮给药90 d未引起大鼠外观和体重的异常 |
| 3.2 右归饮给药90 d大鼠血常规和血生化的影响 |
| 3.3 右归饮给药90 d大鼠主要脏器未见显着变化 |
| 4 小结 |
| 本章讨论 |
| 全文总结 |
| 创新点及意义 |
| 思考与展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 硕士期间科研工作汇报 |
| 附录: 中英文缩略词对照表 |
（2）基于液相色谱质谱联用技术对复方中药艾可清化学成分及其调节细胞色素P450酶作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 1.1 中药药效物质基础研究进展 |
| 1.1.1 基于化学物质的中药药效物质基础研究 |
| 1.1.2 基于谱效关系的中药物质基础研究 |
| 1.1.3 血清药物化学与血清药理学相结合的研究方法 |
| 1.1.4 基于代谢组学的中药物质基础研究 |
| 1.1.5 基于生物活性筛选/在线分析技术的中药物质基础研究 |
| 1.1.6 基于计算机虚拟筛选的中药药效组分辨识模式 |
| 1.2 液质联用技术在中药分析中的应用 |
| 1.2.1 液质联用技术在中药化学成分定性和定量分析中的应用 |
| 1.2.2 液质联用技术在中药指纹图谱研究中的应用 |
| 1.2.4 液质联用技术在中药复方药代动力学及药物代谢研究中的应用 |
| 1.3 细胞色素P450酶介导的中药药-西药相互作用 |
| 1.3.1 细胞色素P450酶 |
| 1.3.2 基于CYP450酶的药物相互作用研究方法 |
| 1.3.3 基于CYP450酶的中药-西药相互作用 |
| 1.4 复方中药艾可清的研究进展 |
| 第二章 基于UPLC-ESI-QTOF-MS技术的复方中药艾可清化学成分分析 |
| 2.1 仪器和实验材料 |
| 2.1.1 仪器 |
| 2.1.2 材料与试剂 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 艾可清提取液及各味药材提取液的制备 |
| 2.2.2 对照品溶液配制 |
| 2.2.3 液质条件 |
| 2.2.4 数据处理与分析 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 色谱和质谱条件优化 |
| 2.3.2 提取条件优化 |
| 2.3.3 艾可清化学成分的鉴定 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 UPLC-ESI-QTOF-MS法分析大鼠口服复方中药艾可清后体内移行成分及代谢产物 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 仪器 |
| 3.1.2 材料与试剂 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 艾可清供试液的制备 |
| 3.2.2 对照品溶液配制 |
| 3.2.3 动物实验 |
| 3.2.4 样品的前处理 |
| 3.2.5 液质条件 |
| 3.2.6 数据的处理和分析 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 给药剂量的优化 |
| 3.3.2 样品收集时间的优化 |
| 3.3.3 样品前处理方法的优化 |
| 3.3.4 艾可清在大鼠体内的原型成分的分析鉴定 |
| 3.3.5 艾可清代谢产物的鉴定 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 艾可清对细胞色素P450酶抑制作用的研究 |
| 4.1 体外人肝微粒体法测定艾可清对细胞色素P450酶抑制作用 |
| 4.1.1 实验材料与仪器 |
| 4.1.2 实验方法 |
| 4.1.3 实验结果 |
| 4.1.4 讨论 |
| 4.2 WESTERN-BLOT法检测艾可清对大鼠肝脏CYP2D6,CYP3A4蛋白表达的影响 |
| 4.2.1 仪器和材料 |
| 4.2.2 试剂的配制 |
| 4.2.3 实验方法 |
| 4.2.4 实验结果 |
| 4.2.5 讨论 |
| 第五章 基于计算机虚拟筛选艾可清中CYP3A4和CYP2D6抑制作用的活性成分 |
| 5.1 艾可清中抑制CYP3A4和CYP2D6活性成分的虚拟筛选 |
| 5.1.1 材料与仪器 |
| 5.1.2 分子对接的计算 |
| 5.1.3 数据分析与作图 |
| 5.1.4 分子对接及MOLCAD分子表面计算结果 |
| 5.2 体外人肝微粒体法测定艾可清成分对CYP3A4和CYP2D6抑制作用 |
| 5.2.1 实验材料与仪器 |
| 5.2.2 实验方法 |
| 5.2.3 实验结果 |
| 5.3 讨论 |
| 第六章 艾可清对抗HIV药物克力芝在大鼠体内药代动力学的影响 |
| 6.1 仪器与实验材料 |
| 6.1.1 仪器 |
| 6.1.2 试剂与耗材 |
| 6.1.3 实验动物 |
| 6.2 实验方法 |
| 6.2.1 液质条件 |
| 6.2.2 溶液配制 |
| 6.2.3 动物实验 |
| 6.2.4 样品前处理 |
| 6.2.5 方法学验证 |
| 6.2.6 药动学研究 |
| 6.3 实验结果 |
| 6.3.1 方法学考察 |
| 6.4 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文 |
| 致谢 |
| 详细摘要 |
（3）液相色谱—串联质谱法测定生物碱及其代谢产物（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 生物碱概述 |
| 1.1.1 乌头类生物碱 |
| 1.1.2 马钱子类生物碱 |
| 1.1.3 麻黄类生物碱 |
| 1.2 检测方法概述 |
| 1.2.1 薄层色谱法 |
| 1.2.2 气相色谱法 |
| 1.2.3 毛细管电泳法 |
| 1.2.4 液相色谱法 |
| 1.3 前处理方法概述 |
| 1.3.1 液液萃取 |
| 1.3.2 固相萃取 |
| 1.3.3 磁固相萃取 |
| 1.4 药物代谢研究的意义及方法 |
| 1.4.1 药物代谢研究的意义 |
| 1.4.2 药物代谢研究的方法 |
| 1.5 本论文研究依据及主要内容 |
| 参考文献 |
| 第二章 生物碱质谱裂解规律分析 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 实验仪器和试剂 |
| 2.2.2 实验方法 |
| 2.2.2.1 标准溶液配制 |
| 2.2.2.2 质谱条件 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 乌头类生物碱重要特征离子来源研究 |
| 2.3.1.1 乌头碱、次乌头碱、新乌头碱和3-乙酰基乌头碱 |
| 2.3.1.2 苯甲酰乌头碱、苯甲酰次乌头碱和苯甲酰新乌头碱 |
| 2.3.1.3 乌头原碱、次乌头原碱和新乌头原碱 |
| 2.3.1.4 高乌甲素 |
| 2.3.1.5 滇乌头碱 |
| 2.3.2 马钱类生物碱重要离子来源研究 |
| 2.3.3 麻黄类生物碱重要离子来源研究 |
| 2.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 固相萃取技术结合液相色谱-串联质谱法检测食品中的生物碱 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 仪器和试剂 |
| 3.2.2 色谱条件 |
| 3.2.2.1 液相色谱条件 |
| 3.2.2.2 质谱条件 |
| 3.2.3 标准溶液配制 |
| 3.2.4 样品前处理条件 |
| 3.2.4.1 样品的提取 |
| 3.2.4.2 样品的净化 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 条件优化 |
| 3.3.1.1 色谱柱的选择 |
| 3.3.1.2 提取溶剂优化 |
| 3.3.1.3 固相萃取柱的选择 |
| 3.3.2 方法的标准曲线、检出限及定量限 |
| 3.3.3 方法的精密度和准确度 |
| 3.3.4 方法的应用 |
| 3.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 磁固相萃取技术结合液相色谱-串联质谱法检测食品中的生物碱 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 仪器与试剂 |
| 4.2.2 色谱条件 |
| 4.2.2.1 液相色谱条件 |
| 4.2.2.2 质谱条件 |
| 4.2.3 标准溶液配制 |
| 4.2.4 磁性碳纳米管吸附剂的制备 |
| 4.2.4.1 聚酰胺-胺树状大分子的制备 |
| 4.2.4.2 氨基功能化磁性碳纳米管的制备 |
| 4.2.5 样品前处理条件 |
| 4.2.5.1 样品的提取 |
| 4.2.5.2 样品的净化 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 氨基功能化磁性碳纳米管的表征 |
| 4.3.1.1 透射电子显微镜图像分析 |
| 4.3.1.2 X射线光电子能谱分析 |
| 4.3.2 双层的吸管端磁固相萃取过程条件优化 |
| 4.3.2.1 萃取溶剂的影响 |
| 4.3.2.2 吸附剂用量的影响 |
| 4.3.2.3 相互作用时间的影响 |
| 4.3.2.4 吸附剂的可重复使用能力 |
| 4.3.3 方法的标准曲线、检出限及定量限 |
| 4.3.4 方法的精密度和准确度 |
| 4.3.5 方法的应用 |
| 4.3.6 方法比较 |
| 4.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 乌头类生物碱体外代谢产物分析 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.2.1 仪器与试剂 |
| 5.2.2 色谱条件 |
| 5.2.2.1 液相色谱条件 |
| 5.2.2.2 质谱条件 |
| 5.2.3 溶液配制 |
| 5.2.4 实验方法 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 乌头碱的体外代谢产物 |
| 5.3.2 次乌头碱的体外代谢产物 |
| 5.3.3 新乌头碱的体外代谢产物 |
| 5.3.4 3-乙酰基乌头碱的体外代谢产物 |
| 5.3.5 滇乌头碱的体外代谢产物 |
| 5.3.6 高乌甲素的体外代谢产物 |
| 5.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 总结与展望 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
（4）附子治疗阳虚的整合药动学—药效学研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 实验研究 |
| 第一部分 附子治疗阳虚便秘大鼠的整合药动学、药效学研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 试剂与试药 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 分析条件 |
| 2.1.1 色谱条件 |
| 2.1.2 质谱条件 |
| 2.2 标准曲线溶液和混合质控样品的配制 |
| 2.2.1 混合标液的配制 |
| 2.2.2 标准曲线溶液的配制 |
| 2.2.3 混合质控样品的配制 |
| 2.3 大鼠阳虚便秘模型的建立 |
| 2.4 附子总生物碱在大鼠体内的药动学实验 |
| 2.4.1 样品收集 |
| 2.4.2 血浆样品的处理 |
| 2.5 附子总生物碱在大鼠体内的药效学实验 |
| 2.5.1 样品收集 |
| 2.5.2 含量测定 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 大鼠阳虚便秘模型评价 |
| 3.2 方法学验证 |
| 3.2.1 方法专属性 |
| 3.2.2 标准曲线及定量限 |
| 3.2.3 基质效应和回收率考察 |
| 3.2.4 准确度和精密度考察 |
| 3.2.5 稳定性考察 |
| 3.2.6 分析 |
| 3.3 附子总生物碱在大鼠体内的药动学研究 |
| 3.3.1 结果 |
| 3.3.2 分析 |
| 3.4 附子总生物碱在大鼠体内的药效学研究 |
| 3.4.1 实验结果 |
| 3.4.2 分析 |
| 3.5 附子总生物碱治疗大鼠阳虚便秘的整合药动学-药效学研究 |
| 3.5.1 附子总生物碱治疗大鼠阳虚便秘的整合药动学研究 |
| 3.5.2 附子总生物碱治疗大鼠阳虚便秘的整合药效学研究 |
| 3.5.3 整合药动学、药效学研究 |
| 3.6 讨论 |
| 3.6.1 剂量对附子总生物碱在大鼠体内药动学特征的影响 |
| 3.6.2 附子总生物碱的整合药动学分析 |
| 第二部分 附子治疗慢性心衰大鼠的药动学、药效学研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 试剂与试药 |
| 1.2 实验动物 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 色谱条件 |
| 2.2 标准曲线溶液和混合质控样品的配制 |
| 2.2.1 对照品储备液和内标溶液的配制 |
| 2.2.2 混合标液的配制 |
| 2.2.3 标准曲线溶液的配制 |
| 2.2.4 混合质控样品的配制 |
| 2.3 大鼠慢性心衰模型的建立 |
| 2.4 附子水溶性生物碱在大鼠体内的药动学实验 |
| 2.4.1 样品的收集 |
| 2.4.2 血浆样品的处理 |
| 2.5 附子水溶性生物碱在大鼠体内的药效学实验 |
| 2.5.1 样品收集 |
| 2.5.2 含量测定 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 大鼠慢性心衰模型评价 |
| 3.2 方法学验证 |
| 3.2.1 方法专属性 |
| 3.2.2 标准曲线及定量限 |
| 3.2.3 基质效应和回收率考察 |
| 3.2.4 准确度和精密度考察 |
| 3.2.5 稳定性考察 |
| 3.2.6 分析 |
| 3.3 附子水溶性生物碱在大鼠体内的药动学研究 |
| 3.3.1 实验结果 |
| 3.3.2 分析 |
| 3.4 附子水溶性生物碱在大鼠体内的药效学研究 |
| 3.4.1 实验结果 |
| 3.4.2 分析 |
| 3.5 附子水溶性生物碱治疗大鼠心衰的整合药动学-药效学研究 |
| 3.5.1 附子水溶性生物碱治疗大鼠心衰的整合药动学研究 |
| 3.5.2 附子水溶性生物碱治疗大鼠心衰的整合药效学研究 |
| 3.5.3 整合药动学、药效学研究 |
| 3.6 讨论 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 问题与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附I： |
| 综述一 附子的药理研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 附子的药动学研究进展 |
| 参考文献 |
| 附件II：在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
（5）基于中药模拟炮制的新疆准噶尔乌头生物碱水解机制研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 研究内容与方法 |
| 1 仪器 |
| 2 试药 |
| 3 内容和方法 |
| 3.1 准噶尔乌头中4种化学成分的含量测定、炮制变化情况 |
| 3.1.1 准噶尔乌头中4种化学成分的含量测定 |
| 3.1.2 准噶尔乌头中四种化学成分在水中加热变化情况 |
| 3.2 各单体成分的模拟炮制研究 |
| 3.2.1 准噶尔乌头碱的模拟炮制研究 |
| 3.2.2 12-表-欧乌头碱的模拟炮制研究 |
| 3.2.3 乌头碱的模拟炮制研究 |
| 3.2.4 脱氧乌头碱的模拟炮制研究 |
| 3.3 准噶尔乌头药材的炮制水解机制研究 |
| 3.3.1 高效液相色谱分析 |
| 3.3.2 质谱分析 |
| 结论 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
| 导师评阅表 |
（6）基于中药模拟炮制的乌头属植物水解机制及液质联用测定方法的研究进展（论文提纲范文）
| 1 中药模拟炮制研究现状 |
| 2 乌头属药用植物的生物碱类成分 |
| 3 水解机制研究 |
| 4 液质联用法用于乌头属药用植物生物碱的测定 |
| 5 结语 |
（7）四逆汤中生物碱成分的电喷雾串联质谱研究（论文提纲范文）
| 1 实验部分 |
| 1.1 仪器、材料与试剂: |
| 1.2 样品的制备 |
| 1.2.1 附子与附片水提液: |
| 1.2.2 四逆汤的制备: |
| 1.3 仪器条件: |
| 2 方法与结果 |
| 2.1 附子和附片水煎液中的生物碱对比研究:见表1。 |
| 2.2 附子配伍四逆汤与附片配伍四逆汤的研究:见表2。 |
| 3 讨论 |
（8）基于液质联用技术的芪苈强心胶囊中多组分分析与药代动力学研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 UPLC/Q-TOF-MS/MS 法鉴定芪苈强心胶囊中的化学成分 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 芪苈强心胶囊 UPLC 血清指纹图谱研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 UPLC/Q-TOF-MS/MS 法鉴定芪苈强心胶囊血中移行成分 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 UPLC/Q-TOF-MS/MS 法快速测定芪苈强心胶囊及其附子中的9 个乌头类生物碱成分含量 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第五部分 基于 UPLC/Q-TOF-MS/MS 技术的芪苈强心胶囊中 9 个乌头类生物碱在大鼠体内的药代动力学研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 芪苈强心胶囊质量控制与药理学研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（9）中药川乌多成分同时检测及药动学评价研究进展（论文提纲范文）
| 1 二萜生物碱类化学成分 |
| 2 含量测定 |
| 3 二萜生物碱药动学评价研究 |
| 4 结语 |
（10）乌头属植物研究进展（论文提纲范文）
| 1 基础研究 |
| 1.1 形态学研究 |
| 1.2 化学成分研究 |
| 1.3 测定方法 |
| 1.3.1 酸碱中和法。 |
| 1.3.2 分光光度法。 |
| 1.3.3 液相色谱法。 |
| 1.3.4 薄层扫描法。 |
| 1.3.5 质谱和色谱联用法。 |
| 1.3.6 电喷雾串联质谱技术法。 |
| 1.3.7 气相色谱法。 |
| 1.3.8 毛细管电泳法。 |
| 1.3.9 其他方法。 |
| 1.4 繁殖方法 |
| 2 应用研究 |
| 2.1 强心作用 |
| 2.2 镇痛与麻醉作用 |
| 2.3 抗肿瘤作用 |
| 2.4 免疫调节与抗炎作用 |
| 3 存在问题及展望 |
四、复方中药四逆汤中乌头碱类二萜生物碱的电喷雾串联质谱研究（论文参考文献）
- [1]补肾益精经典方剂右归饮化学成分分析及安全性评价[D]. 柯慧. 西南大学, 2020(01)
- [2]基于液相色谱质谱联用技术对复方中药艾可清化学成分及其调节细胞色素P450酶作用的研究[D]. 卢元媛. 广州中医药大学, 2018(03)
- [3]液相色谱—串联质谱法测定生物碱及其代谢产物[D]. 程贺立. 浙江大学, 2018(01)
- [4]附子治疗阳虚的整合药动学—药效学研究[D]. 李燕. 成都中医药大学, 2018(12)
- [5]基于中药模拟炮制的新疆准噶尔乌头生物碱水解机制研究[D]. 姜婷. 新疆医科大学, 2017(10)
- [6]基于中药模拟炮制的乌头属植物水解机制及液质联用测定方法的研究进展[J]. 姜婷,张江,木卡代斯·斯依提,赵翡翠. 中草药, 2016(19)
- [7]四逆汤中生物碱成分的电喷雾串联质谱研究[J]. 李立纪,张风雷,李秀芳,邹雁宁. 内蒙古中医药, 2015(04)
- [8]基于液质联用技术的芪苈强心胶囊中多组分分析与药代动力学研究[D]. 朱慧明. 河北医科大学, 2014(09)
- [9]中药川乌多成分同时检测及药动学评价研究进展[J]. 程丽丽,许妍妍,张艳军. 天津中医药大学学报, 2014(01)
- [10]乌头属植物研究进展[J]. 谈永霞,王鸣刚,张继,杨宁,田玉汝. 安徽农业科学, 2011(24)