一、左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨钙素和降钙素含量的影响(论文文献综述)
杨铠宁[1](2021)在《基于“脾肾相关”从SDF-1/CXCR4通路探讨绝经后骨质疏松症大鼠的病机研究》文中研究表明目的:以中医“脾肾相关”理论为指导,探究采用滋补肾阴、温补肾阳、健脾和补肾健脾法的中医不同治法分别对绝经后骨质疏松症大鼠进行防治,是否会引起骨骼、骨骼肌中SDF-1/CXCR4信号通路相关因子蛋白表达变化,分析扩展中医防治骨质疏松症的现代医学机制。通过观察不同治法下,大鼠的骨骼、肌肉中SDF-1/CXCR4信号通路表达情况的比较,为选择防治骨质疏松症最佳的中医治法提供实验依据。材料与方法:将91只SPF级Wistar雌性大鼠随机分为正常组、模型组、补肾阴组、补肾阳组、健脾组、补肾健脾组和福善美组,除正常组外均行去卵巢手术,建立绝经后骨质疏松症的大鼠模型。术后第2日开始灌胃给药,每日1次,共计10周。其中正常组、模型组给予0.9%氯化钠溶液,补肾阴组、补肾阳组、健脾组、补肾健脾组、福善美组分别予以左归丸、右归丸、补中益气汤、补肾健脾方和福善美药液灌胃。末次灌胃后麻醉、采集标本。开腹抽取腹主动脉血制备血清,取出左、右后肢股骨和左后肢腓肠肌白肌部分,用双能X线骨密度仪检测各组大鼠左后肢股骨骨密度,采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清ALP、TRACP及骨骼、骨骼肌中SDF-1、CXCR4、PI3K、HIF-1α的蛋白表达。结果:第一部分:模型建立及评价1.骨密度测定结果:与正常组比较,模型组大鼠左后肢股骨密度明显降低(P<0.01);与模型组相比,所有治疗组大鼠的骨密度均显着提升(P<0.01)。2.骨代谢指标测定结果:与正常组相比,模型组大鼠血清ALP和TRACP水平均显着升高(P<0.01);而各治疗组大鼠血清ALP和TRACP水平与模型组比均显着降低(P<0.01),其中以福善美组降低最为明显,其次为补肾健脾组。第二部分:中医不同治法对绝经后骨质疏松症大鼠骨组织、骨骼肌SDF-1/CXCR4信号通路的影响实验一:中医不同治法下骨组织中的SDF-1、CXCR4、PI3K、HIF-1α蛋白表达1.模型组大鼠的骨组织SDF-1含量比正常组显着升高(P<0.01);与模型组相比,补肾阳组、福善美组、健脾组大鼠骨组织SDF-1含量均显着降低(P<0.01),补肾阴组也明显降低(P<0.05);补肾健脾组也有很大程度降低,但是不具有统计学意义。2.与正常组比较,模型组大鼠的骨组织CXCR4含量显着升高(P<0.01);与模型组比较,各个治疗组大鼠的骨组织CXCR4含量均有不同程度的显着下降(P<0.01),以福善美组下降最明显,其次是补肾阳组。3.与正常组相比较,模型组大鼠的骨组织PI3K蛋白表达水平显着下调(P<0.01);与模型组对比,福善美组、健脾组、补肾阳组和补肾阴组PI3K蛋白表达水平均明显上调(P<0.01),补肾健脾组PI3K的升高不具有统计学意义(P>0.05)。4.与正常组对比,模型组大鼠的骨组织HIF-1α蛋白表达水平显着下降(P<0.01);与模型组相比较,各治疗组骨组织HIF-1α水平都显着提升(P<0.01),福善美组升高最多,健脾组次之。实验二:中医不同治法下骨骼肌中的SDF-1、CXCR4、PI3K、HIF-1α蛋白表达1.模型组大鼠的骨骼肌SDF-1蛋白表达含量比正常组显着升高(P<0.01);与模型组相比,福善美组、健脾组大鼠的骨骼肌SDF-1蛋白表达显着降低(P<0.01),其余治疗组也有所降低,但不具有统计学意义。2.与正常组比较,模型组大鼠的骨骼肌CXCR4蛋白含量均显着升高(P<0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠骨骼肌CXCR4含量均有显着下降,其中补肾健脾组下降程度(P<0.05)逊于其他治疗组(P<0.01),福善美组大鼠的骨骼肌CXCR4含量下降最为明显,明显高于补肾阴组和补肾健脾组,差异具有统计学意义(P<0.01)。3.与正常组比较,模型组大鼠骨骼肌PI3K蛋白表达显着降低(P<0.01);与模型组相比,各治疗组骨骼肌PI3K蛋白表达水平均有不同程度提升,以福善美组升高最为显着(P<0.01),甚至超过正常组含量,其次是健脾组、补肾阳组(P<0.01)和补肾阴组(P<0.05)。4.与正常组比较,模型组大鼠骨骼肌HIF-1α蛋白表达显着下降(P<0.01);对比模型组,各治疗组均将骨骼肌HIF-1α蛋白表达显着上调(P<0.01)。结论:1.滋补肾阴、温补肾阳、健脾和补肾健脾方法均可以提高绝经后骨质疏松症大鼠股骨骨密度,显着下调血清ALP、TRACP水平,说明滋补肾阴法、温补肾阳法、健脾法和补肾健脾法能有效降低绝经后骨质疏松症大鼠骨转换率,对绝经后骨质疏松症有良好的防治作用。2.滋补肾阴、温补肾阳、健脾和补肾健脾法可以通过下调骨组织SDF-1和CXCR4、上调PI3K和HIF-1α蛋白表达,调控骨组织SDF-1/CXCR4信号通路上相关因子,抑制骨吸收,促进骨形成,对绝经后骨质疏松症起防治作用。3.滋补肾阴、温补肾阳、健脾和补肾健脾法可以调节骨骼肌SDF-1/CXCR4信号通路上的相关蛋白表达,减少骨骼肌SDF-1和CXCR4、增加PI3K和HIF-1α蛋白含量,与对骨骼的调节一致,说明骨骼与肌肉的协调性增强,从而促进骨形成,达到防治绝经后骨质疏松症的目的。4.肾虚是绝经后骨质疏松症发生的最主要病机,脾虚也是导致绝经后骨质疏松症的重要病机,滋补肾阴、温补肾阳、健脾和补肾健脾法均可以有效治疗绝经后骨质疏松症。
张念军[2](2020)在《骨宝丸靶向调节BMP-2治疗Ⅰ型骨质疏松的机制探讨》文中进行了进一步梳理目的:研究证明骨宝丸的抗骨质疏松作用;通过临床研究,证实骨宝丸对绝经后骨质疏松症的治疗疗效;通过动物实验研究,证实骨宝丸通过调控BMP通路促进骨生成作用而发挥抗骨质疏松的作用,明确其抗骨质疏松机制;明确BMP通路在成骨细胞分化与骨形成中的作用机制,并寻找其可能的作用鞭点,为骨宝丸BMP通路促进骨生成防治绝经后骨质疏松症研究提供实验依据。方法:实验一:选择绝经后骨质疏松患者80人,随机分两组,对照组(阿仑膦酸钠)和治疗组(骨宝丸联合阿仑膦酸钠)各40例,连续治疗6个月,观察两组中医证候疗效评分、骨密度检测、血清ALP及骨钙素,及治疗过程中的不良反应和并发症。实验二:选SPF级Balb/c种小鼠,共24只,随机分组,正常对照组、模型组(环磷酰胺造模),正常对照组、观察组(维甲酸造模),观察两组一般情况观察、胸腺指数、检测骨密度,确立建立骨质疏松小鼠模型的方法。实验三:采用维甲酸诱导骨质疏松小鼠模型,模型组和骨宝丸各剂量组小鼠灌服维甲酸(100 mg/kg)建立骨质疏松模型,同时骨宝丸各剂量组小鼠灌服药物溶液进行防治,连续30天。实验结束后,取小鼠股骨,称取质量、测量股骨直径和股骨长度;利用HE染色法在光学显微镜下观察股骨组织变化;利用Micro-CT检测骨密度;采用ELISA试剂盒检测血清中OC、BALP分泌水平。实验四:将选取小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1细胞)作为研究对象,检测骨宝丸对MC3T3-E1细胞活性的影响;试剂盒法检测骨宝丸对MC3T3-E1细胞ALP活性的影响;WB法检测骨宝丸对MC3T3-E1细胞ALP、BMP-2表达的影响,进一步验证骨宝丸促进成骨的作用机制。结果:实验一:6月后,两组的中医证候疗效评分较治疗前均有所改善,治疗组优于对照组(P<0.05);两组骨密度较治疗前均有所提高,治疗组优于对照组(P<0.05);两组血清ALP及骨钙素持续降低,治疗组更加明显(P<0.05)。实验二:1.环磷酰胺造模的模型组小鼠活动度及进食量显着下降,毛发失去光泽,实验结束后体重显着低于正常组(P<0.5)。维甲酸造模的模型组小鼠与正常组比较在实验期间多数情况下活动度及进食量无明显差异,实验结束前一周有所减少(无显着差异)。此外,实验结束后模型组体质量与对照组比较无显着差异(图1B)。2.与造模前相比较,环磷酰胺造模小鼠胸腺指数显着降低(P<0.01);维甲酸造模小鼠胸腺指数无明显差异。3.与正常组比较,环磷酰胺造模的模型组小鼠骨密度有减少趋势,但是并无统计学意义;维甲酸造模的模型组小鼠骨密度较正常组减少,且差异具有统计学意义(P<0.05)。实验三:1.骨宝丸对维甲酸导致的小鼠股骨的质量、直径、骨密度和骨髓组织减少有防治作用;2.骨宝丸对维甲酸诱导小鼠血清促进OC和P1NP分泌增加。实验四:1.骨宝丸对MC3T3-E1细胞几乎无毒副作用,且在剂量1-8 mg/ml时具有促进细胞增殖的作用。2.骨宝丸对MC3T3-E1的ALP活性有显着增强的作用(P<0.05或P<0.01),并且呈现剂量依赖性。3.骨宝丸显着提高了MC3T3-E1细胞ALP蛋白和BM-2蛋白生成水平,且呈现一定的剂量依赖性。结论:1.骨宝丸治疗对绝经后骨质疏松,临床效果明显,短期内能够提高骨密度和骨转换率。2.维甲酸诱导绝经后骨质疏松小鼠模型可靠性高,本课题后续研究将采用维甲酸造模。3.骨宝丸可防治维甲酸诱导的小鼠骨质疏松,其作用机制可能与保护BMP-2分泌进而促进骨形成有关。4.骨宝丸可促进小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1细胞)增殖分化,其作用机制可能与保护BMP-2分泌进而促进骨形成有关。
高举会[3](2020)在《左归丸含药血清对骨髓间充质干细胞Hedgehog信号通路中相关因子的表达研究》文中认为目的:以中医学中的“肾藏精,主骨,生髓”为理论依据,通过实验研究观察左归丸含药血清对体外培养大鼠BMSCs向成骨细胞增殖分化的影响,同时观察细胞Hedgehog信号通路中的SHH、SMO、GLI1以及G蛋白偶联受体信号通路中的BMP2、GPR48等相关因子蛋白表达的变化,探究左归丸防治OP的相关效用机制,为临床治疗OP补充相对新颖的实验依据。材料与方法:将32只体重约为200-230g(3月龄)SPF级雌性未生育大鼠,随机分为正常组、诱导液组、福善美组、左归丸组4组,每组8只,将大鼠进行适应性饲养3天后,用每组相应的药物对实验大鼠进行连续灌胃,每天一次,连续5天,制备相应的含药血清。5天后将大鼠脱颈处死,进行取材,并留存4组大鼠的含药血清。将购得的Wistar大鼠BMSCs复苏、繁殖、传代,并将细胞分为4组。过滤含药学清,然后用含有对应组药物的含药血清的培养基体外培养大鼠BMSCs,一组加入诱导液,其它3组分别加入制备的含药学清。采用ELISA检测各组细胞Hedgehog信号通路中SHH、SMO、GLI1以及ALP、GPR48、BMP2等相关因子的蛋白表达情况,同时使用SPSS20.0软件进行统计分析,并将实验数据对比分析,从而比较各组含药血清对对BMSCs向成骨细胞分化的影响,探究左归丸防治OP的机制及影响程度的差异。结果:1.各实验组对细胞中ALP浓度的检测结果显示:与正常组比较,左归丸组、诱导液组、福善美组显着增长(P<0.01);第12天的检测结果对比第9、第15天成骨细胞分化相对较好。2.各实验组对细胞中GPR48浓度的检测结果显示:与正常组比较,左归丸组显着增长(P<0.01);与诱导液组、福善美组相比,左归丸组有显着差异(P<0.01)。3.各实验组对细胞中BMP-2浓度的检测结果显示:与正常组相比,诱导液组、左归丸组、福善美组BMP2明显提高(P<0.01);其中诱导液组含量最高,左归丸组较正常组有所提高(P<0.01)。4.各组含药血清培养的大鼠BMSCs中SHH浓度的检测结果显示:与正常组相比,福善美组、左归丸组、诱导液组SHH明显提高(P<0.01);其中诱导液组含量最高,左归丸组较正常组有所提高(P<0.01)。5.各组含药血清培养的大鼠BMSCs中SMO浓度的检测结果显示:与正常组相比,福善美组、左归丸组、诱导液组Smo明显提高(P<0.01);其中诱导液组含量最高,左归丸组较正常组有所提高(P<0.01)。6.各组含药血清培养的大鼠BMSCs中Gl I1浓度的检测结果显示:与正常组相比,福善美组、左归丸组、诱导液组Gl I1明显提高(P<0.01);其中诱导液组含量最高,左归丸组较正常组有所提高,甚则高于福善美组(P<0.01)。结论:1.正常大鼠BMSCs中可以表达ALP、GPR48、BMP2、SHH、SMO、GLI1,表明大鼠的细胞中存在GPR48信号通路和Hedgehog信号通路中相关信号因子。2.左归丸可以上调大鼠BMSCs中ALP、GPR48、BMP2、SHH、SMO、GLI1的蛋白浓度含量,表明左归丸可能是通过激活Hedgehog信号通路中的SHH、SMO、GLI1等靶基因,调节信号因子表达水平来达到防治骨质疏松症的目的。3.左归丸含药血清可以促进大鼠BMSCs向成骨细胞分化再次得到证实,充分验证了“肾藏精,主骨,生髓”的肾-髓关系的科学性。
柴勇[4](2019)在《雌雄去势大鼠骨微观结构和生物力学性能的比较及右归丸干预作用的研究》文中研究说明目的对比观察去卵巢大鼠与去睾丸大鼠骨微观结构和生物力学性能的异同点、以及右归丸对其干预作用的异同点,并从MAPK(Erk1/2)/c-Fos/AP-1信号通路的角度,部分揭示差异产生的机制。为中医治疗骨质疏松症提供进一步的实验依据,并进一步丰富“肾主骨”理论的科学内涵。方法选用同月龄(3月龄)SD大鼠156只,SPF级,雌雄各半。先将大鼠按照体重随机分为8个组,分别是:雌性基础组与雄性基础组,雌性空白对照组与雄性空白对照组,雌性假手术组与雄性假手术组,每组各12只;雌性造模组与雄性造模组,每组各42只。使用3%的戊巴比妥钠按照0.15ml/100g体重的剂量对雌、雄造模组大鼠进行麻醉,之后分别施以双侧卵巢切除手术或睾丸切除手术(去势);手术过程中,雌性造模组死亡5只,雄性造模组死亡4只;雌、雄假手术组大鼠的手术过程与雌、雄造模组大鼠相同,但是不切除卵巢或睾丸,仅切除卵巢或睾丸周围少许的脂肪组织。在进行上述手术的前一天,将雌、雄基础组大鼠麻醉后处死,取双侧股骨,用于Micro CT骨组织形态指标与电子万能试验机骨生物力学指标的检测,将测得的数据作为其它各分组实施处理因素之前的基础值。手术3个月后,将雌性造模组37只大鼠按照体重再随机分为3个组,分别是:卵巢切除组(OVX组)13只,OVX+戊酸雌二醇组(雌激素组,即阳性对照组)12只,OVX+右归丸组(雌性右归丸组)12只;将雄性造模组38只大鼠按照体重再随机分为3个组,分别是睾丸切除组(ORX组)13只,ORX+甲睾酮组(雄激素组,即阳性对照组)13只,ORX+右归丸组(雄性右归丸组)12只。分组结束后,对各给药组大鼠进行灌胃给药:雌性右归丸组与雄性右归丸组给予右归丸水煎液,给药浓度、体积分别为:1.024g生药/ml、1ml/100g体重,给药剂量为10.24g生药/kg体重(此剂量是以往研究已被证实的有效剂量,相当于成人临床用药的等效剂量,为成人临床用量的6.5倍);雌激素组大鼠给予戊酸雌二醇(E2)药液,给药浓度,体积分别为:0.0184mg/ml、1ml/100g体重,给药剂量为0.184mg/kg体重;雄激素组大鼠给予甲睾酮(T)药液,给药浓度、体积分别为:0.184mg/ml、1ml/100g体重,给药剂量为1.84mg/kg体重。以上各组给药,一天一次,连续6天,休息1天后,再连续给药6天,如此连续给药3个月。雌、雄空白对照组,雌、雄假手术组,OVX组与ORX组则按照上述方法给予等体积的纯净水进行灌胃。灌胃期间,每周对大鼠进行一次体重称量,根据体重变化调整给药体积。给药结束后,将实验各组大鼠麻醉后迅速处死,取双侧股骨,用于Micro CT骨组织形态指标与电子万能试验机骨生物力学指标的检测;取胫骨,制作脱钙骨冰冻切片,用于MAPK(Erk1/2)、c-Fos、AP-1三者蛋白表达的检测。采用SPSS 20.0软件进行统计学处理。实验结果以均数±标准差(x±s)表示。若数据呈正态分布,则采用单因素方差分析(ANOVA)进行处理;方差齐性的,组间两两比较采用LSD检验;方差不齐的,采用Dunnett’s T3(3)检验。若数据呈非正态分布,则采用非参数检验Kruskal-Wallis单因素ANOVA(k样本)(W)进行处理;组间两两比较,采用其项下的Stepwise step-down检验。结果1雌雄去势大鼠股骨松质骨形态结构的比较及右归丸对其的干预作用1.1雌雄去势大鼠股骨松质骨BV/TV变化率的比较及右归丸对其的干预作用在实验结束后,雌性假手术组和雄性假手术组大鼠股骨松质骨的BV/TV大幅度增加;而OVX组和ORX组的呈现负增长,即大幅度的减少,分别与它们相应的假手术组比较,具有显着性差异。雌激素组、雌性右归丸组以及雄激素组、雄性右归丸组的BV/TV均呈现负增长,与它们相应的假手术组比较,具有显着性差异;但其减少的程度要明显低于它们相应的OVX组和ORX组。OVX组BV/TV的减少程度明显大于ORX组;而雌性右归丸组的减少程度明显小于雄性右归丸组。1.2雌雄去势大鼠股骨松质骨Conn.Dn变化率的比较及右归丸对其的干预作用在实验结束后,雌性假手术组和雄性假手术组大鼠股骨松质骨的Conn.Dn大幅度增加;而OVX组和ORX组的呈现负增长,即大幅度的减少,分别与它们相应的假手术组比较,具有显着性差异。雌激素组、雌性右归丸组以及雄激素组、雄性右归丸组的Conn.Dn均呈现负增长,与它们相应的假手术组比较,具有显着性差异;但其减少的程度要明显低于它们相应的OVX组和ORX组。OVX组Conn.Dn的减少程度明显大于ORX组;而雌性右归丸组的减少程度明显小于雄性右归丸组。1.3雌雄去势大鼠股骨松质骨Cb.C变化率的比较及右归丸对其的干预作用在实验结束后,雌性假手术组和雄性假手术组大鼠股骨松质骨的Cb.C呈现负增长,即减少;而OVX组和ORX组的增加,分别与它们相应的假手术组比较,具有显着性差异。雌激素组、雌性右归丸组以及雄激素组、雄性右归丸组的Cb.C也增加,与它们相应的假手术组比较,具有显着性差异;但其增加的程度要明显小于它们相应的OVX组和ORX组。与ORX组比较,OVX组Cb.C的增加程度明显要大;雌性右归丸组的Cb.C较雄性右归丸组虽有减少的趋势,但无统计学意义。1.4雌雄去势大鼠股骨松质骨DA的比较及右归丸对其的干预作用OVX组、雌激素组和雌性右归丸组大鼠股骨松质骨DA显着低于雌性假手术组;而雌激素组和雌性右归丸组的DA显着高于OVX组。与雄性假手术组比较,ORX组、雄激素组和雄性右归丸组的DA明显降低;而与ORX组比较,雄激素组、雄性右归丸组的DA均显着提高。ORX组的DA明显高于OVX组;雄性右归丸组的与雌性右归丸组比较,无显着性差异。1.5雌雄去势大鼠股骨松质骨Tb.Pf的比较及右归丸对其的干预作用与雌性假手术组大鼠股骨松质骨Tb.Pf 比较,OVX组、雌激素组和雌性右归丸组的皆明显提高;而与OVX组比较,雌激素组和雌性右归丸组的Tb.Pf皆显着降低。ORX组、雄激素组和雄性右归丸组的Tb.Pf较雄性假手术组的均明显提高,而雄激素组和雄性右归丸组的Tb.Pf较ORX组的均明显降低。ORX组的Tb.Pf显着低于OVX组;雄性右归丸组的与雌性右归丸组比较,无显着性差异。2雌雄去势大鼠股骨皮质骨生物力学性能的比较及右归丸对其的干预作用大鼠股骨最大载荷(ML)、断裂强度(BS)和弹性模量(EM)变化率能够反映股骨皮质骨生物力学性能情况。2.1雌雄去势大鼠股骨皮质骨ML变化率的比较及右归丸对其的干预作用在实验结束后,雌、雄假手术组大鼠股骨皮质骨ML大幅度增加;而OVX组和ORX组的ML虽也有增加,但增加的程度要显着小于它们相应的假手术组。雌激素组、雌性右归丸组ML的增加程度明显大于OVX组,而与雌性假手术组比较,差异不明显。雄激素组、雄性右归丸组ML的增加程度明显大于ORX组,但明显小于雄性假手术组。OVX组ML的增加程度明显小于ORX组;雌性右归丸组的亦明显小于雄性右归丸组。2.2雌雄去势大鼠股骨皮质骨BS变化率的比较及右归丸对其的干预作用在实验结束后,雌、雄性假手术组大鼠股骨皮质骨BS大幅度增加;而OVX组和ORX组的呈现负增长,即减少,分别与它们相应的假手术组比较,差异显着。雌激素组、雌性右归丸组以及雄激素组、雄性右归丸组的BS均增加,增加的程度与它们相应的假手术组比较,无显着性差异,但明显大于它们相应的OVX组和ORX组。OVX组BS的减少程度明显大于ORX组;而雌性右归丸组的与雄性右归丸组比较,无显着性差异。2.3雌雄去势大鼠股骨皮质骨EM变化率的比较及右归丸对其的干预作用在实验结束后,雌性假手术组和雄性假手术组大鼠股骨皮质骨EM大幅度增加;而OVX组和ORX组的EM呈现负增长,即减少,与它们相应的假手术组比较,具有明显差异。雌激素组、雌性右归丸组以及雄激素组、雄性右归丸组的EM均增加,增加的程度与它们相应的假手术组比较,无显着性差异,而明显大于它们相应的OVX组和ORX组。OVX组EM减少的程度与ORX组比较,无显着性差异;雌性右归丸组EM增加的程度与雄性右归丸组比较,亦无显着性差异。3雌雄去势大鼠胫骨骨髓中MAPK(Erk1/2)、c-Fos、AP-1蛋白表达的比较及右归丸对其的干预作用3.1雌雄去势大鼠胫骨骨髓中MAPK(Erkl/2)蛋白表达的比较及右归丸对其的干预作用OVX组大鼠胫骨骨髓中MAPK(Erk1/2)蛋白表达阳性密度显着高于雌性假手术组,雌激素组和雌性右归丸组的MAPK(Erk1/2)蛋白表达阳性密度与雌性假手术组比较,无显着性差异;与OVX组比较,雌激素组和雌性右归丸组的MAPK(Erk1/2)蛋白表达阳性密度显着减少。ORX组MAPK(Erk1/2)蛋白表达阳性密度与雄性假手术组的相比,明显增加,雄激素组和雄性右归丸组的与之相比,无显着性差异;与ORX组比较,雄激素组和雄性右归丸组的MAPK(Erk1/2)蛋白表达阳性密度明显减少。ORX组的MAPK(Erk1/2)蛋白表达阳性密度与OVX组的比较,明显减少。雄性右归丸组的MAPK(Erk1/2)蛋白表达阳性密度明显高于雌性右归丸组。3.2雌雄去势大鼠胫骨骨髓中c-Fos蛋白表达的比较及右归丸对其的干预作用与雌性假手术组比较,OVX组大鼠胫骨骨髓中c-Fos蛋白表达阳性密度显着增加,雌激素组和雌性右归丸组的无显着性变化;与OVX组比较,雌激素组和雌性右归丸组的c-Fos蛋白表达阳性密度显着减少。ORX组和雄性右归丸组的c-Fos蛋白表达阳性密度较雄性假手术组的明显增加,雄激素组的与雄性假手术组比较,无显着性差异;与ORX组比较,雄激素组和雄性右归丸组的c-Fos蛋白表达阳性密度皆明显减少。ORX组的c-Fos蛋白表达阳性密度较OVX组显着减少。雄性右归丸组的较雌性右归丸组的明显增加。3.3雌雄去势大鼠胫骨骨髓中AP-1蛋白表达的比较及右归丸对其的干预作用OVX组大鼠胫骨骨髓中AP-1蛋白表达阳性密度显着高于雌性假手术组,雌激素组和雌性右归丸组的与雌性假手术组比较,无显着性差异;雌激素组、雌性右归丸组的AP-1蛋白表达阳性密度显着低于OVX组。与雄性假手术组的AP-1蛋白表达阳性密度比较,ORX组、雄性右归丸组的明显增加,雄激素组的无显着性差异;与ORX组的AP-1蛋白表达阳性密度比较,雄激素组和雄性右归丸组的均明显减少。ORX组的AP-1蛋白表达阳性密度显着低于OVX组。雄性右归丸组的则显着高于雌性右归丸组。以上指标,雌性假手术组与雌性空白对照组比较以及雄性假手术组与雄性空白对照组比较,均无显着性差异,从而排除了手术因素对实验的影响。结论(1)雌、雄大鼠去势后,均发生了骨质疏松症;但两者在微观结构方面存在明显差异,体现在:雌性去势大鼠股骨松质骨的BV/TV、Conn.Dn的减少程度以及Cb.C的增加程度明显大于雄性去势大鼠;DA明显低于而Tb.Pf明显高于雄性去势大鼠。右归丸对去势所致的雌、雄大鼠骨质疏松症均具有明显的治疗作用,但在微观结构的改善方面存在一定的差异,体现在:右归丸对雌性去势大鼠BV/TV、Conn.Dn的改善程度要优于对雄性去势大鼠的改善程度;而对DA、Cb.C、Tb.Pf的改善作用,两者无明显差异。(2)雌、雄大鼠去势后,皮质骨的生物力学性能均明显下降,但存在明显差异,体现在:雌性大鼠最大载荷、断裂强度的下降程度明显大于雄性大鼠,而弹性模量雌、雄之间无明显差异。右归丸对此均具有明显的增加作用,但存在一定的差异,体现在:右归丸对雄性去势大鼠最大载荷的增加程度要明显大于雌性去势大鼠;而对断裂强度、弹性模量的增加作用,两者无明显差异。(3)MAPK(Erk1/2)/c-Fos/AP-1信号通路在骨质疏松症发生中起重要作用。雌、雄大鼠去势后,骨髓(松质骨部分)中的MAPK(Erk1/2)、c-Fos和AP-1蛋白表达明显增强,而雌性去势大鼠的这三个关键因子的表达明显强于雄性去势大鼠,这是去势所致雌、雄大鼠松质骨在微观结构方面存在性别差异的机制之一。右归丸能通过抑制这一通路达到治疗去势所致骨质疏松症的作用;其对雌性去势大鼠的抑制作用要明显强于雄性去势大鼠,这是右归丸对雌性去势大鼠松质骨微观结构的改善程度要优于对雄性去势大鼠的机制之一。
李凯,陈克明[5](2019)在《骨质疏松症的中医药防治研究进展》文中研究表明骨质疏松症主要表现为骨密度降低、骨质量减少和骨微结构的破坏,属代谢性骨病的一种。多见于老年男性以及绝经后的妇女,对患者的生命健康危害极大。骨质疏松的中医药防治是近年来的研究热点。现就本病中医药防治研究进展进行综述,旨在为骨科临床一线工作者提供参考。
李凯[6](2019)在《葛根素对尾吊大鼠发生废用性骨质疏松的预防作用研究》文中研究表明目的:考察葛根素对尾吊大鼠发生骨质疏松的影响,为从中医药葛根开发出抗废用性骨质疏松新药奠定基础。方法:将30只2月龄Wistar雌性大鼠适应性饲养一周,随机分为对照组(Con组,n=10)、尾吊组(TS组,n=10)和尾吊+葛根素组(TS+Pur组,n=10)3组。其中TS组和TS+Pur组给予悬吊尾巴处理,以造成废用性骨质疏松模型,TS+Pur组给予灌服15.4 mg/(kg·d)葛根素,Con组和TS组灌等体积蒸馏水。各组大鼠单只分笼处理,不限制饮食、饮水,每周测1次体质量。实验进行到第13 d时,从颈部皮下注射四环素,30 mg/kg,次日追加一次;第23 d时以8 mg/kg注射钙黄绿素,次日追加一次。4周后腹主动脉采血,离心获得血清后冻存于-80℃的冰箱;摘取大鼠主要脏器,称重后计算脏器系数,甲醛溶液固定,留待病理学观察;剥离大鼠两侧股骨、胫骨和椎骨,用双能X线骨密度仪检测离体骨密度,万能材料试验机进行骨生物力学分析,用骨磨片进行骨形态计量学分析,ELISA法检测血清骨代谢生化指标。结果:1.大鼠体质量结果:实验期间各组大鼠体质量保持较稳定增长,未发现大鼠出现特殊体质量变化,各组间无统计学意义的差异(P>0.05)。2.脏器病理学检测结果:各组间脏器系数无统计学差异(P>0.05),脏器病理学检测未见明显异常。3.骨密度检测结果:与Con组相比,TS组的股骨、胫骨和椎骨骨密度明显下降(P<0.01);与TS组相比,TS+Pur组股骨、胫骨和椎骨骨密度明显升高(P<0.01)。4.骨生物力学参数检测结果:三点弯曲试验结果:与Con组相比,TS组股骨、胫骨的最大载荷和弹性模量值均下降显着(P<0.01);与TS组相比,TS+Pur组股骨和胫骨的最大载荷和弹性模量值均升高明显(P<0.01)。椎骨压缩试验结果:与Con组相比,TS组第四和第五腰椎(L4、L5)的最大载荷与弹性模量值均显着下降(P<0.01);与TS组相比,TS+Pur组相同部位腰椎的最大载荷和弹性模量值均明显升高(P<0.01)。5.骨形态静态计量学指标观察与分析结果:胫骨干骺端松质骨VG染色与分析结果:与Con组相比,TS组的骨小梁数目明显减少、骨小梁的厚度明显变薄、骨分离度明显变大,均有极显着差异(P<0.01);与TS组相比,TS+Pur组的骨小梁数目明显增加、骨小梁的厚度明显变厚、骨分离度明显变小,均有极显着差异(P<0.01)。椎骨椎体松质骨VG染色与分析结果:与Con组相比,TS组的骨小梁数目显着减少、骨小梁的厚度显着变窄、骨分离度显着变大,均有统计学差异(P<0.01);与TS组相比,TS+Pur组的骨小梁数目显着增加、骨小梁的厚度显着变宽,均有统计学差异(P<0.01),而骨分离度显着变小,有统计学差异(P<0.05)。6.骨形态动态计量学指标观察与分析结果:胫骨中段皮质骨双荧光标记与分析结果:与Con组相比,TS组荧光间距明显较小,矿盐沉积率显着降低(P<0.01);与TS组相比,TS+Pur组荧光间距明显较大,矿盐沉积率显着升高(P<0.01)。椎骨皮质骨双荧光标记与分析结果:与Con组相比,TS组荧光间距明显偏小,矿盐沉积率显着降低(P<0.01);与TS组相比,TS+Pur组荧光间距明显偏大,矿盐沉积率显着升高(P<0.01)。7.血清生化指标测定结果:与Con组相比,TS组骨形成指标骨钙素(osteocalcin,OC)和I型前胶原氨基末端肽(procollagen I N-terminal peptide,PINP)的含量显着减少,骨吸收指标抗酒石酸酸性磷酸酶5b(tartrate-resistant acid phosphatase 5b,TRACP-5b)和I型胶原C端肽(collagn I C-terminal peptide,CTX-I)显着增加,差异有统计学意义(P<0.01);与TS组相比,TS+Pur组OC和PINP含量显着增加(P<0.05),TRACP5b和CTX-I含量显着减少(P<0.01)。结论:1.本实验所建立的尾吊大鼠模型的各项骨代谢指标与废用性骨质疏松相吻合,表明该模型成功模拟了因长期卧床或太空飞行造成的骨质流失;2.从实验结果看,实验大鼠单纯尾吊四周后,股骨、胫骨和椎骨骨密度分别下降了13.19%、19.03%和11.17%,而同时灌服葛根素大鼠的骨密度仅下降了7.90%、13.11%、6.23%,表明葛根素可部分阻止废用性骨质疏松模型大鼠的骨流失,具有为开发抗废用性骨质疏松新药的潜在价值;3.分析血清骨代谢生化指标的检测结果可见,葛根素组大鼠的骨吸收指标低于单纯尾吊组而骨形成指标高于后者,表明葛根素是以抑制骨吸收和促进骨形成的双重活性发挥抗骨质疏松作用的。
陈东阳,林庶茹,邓洋洋,李佳,尚德阳[7](2018)在《左归丸含药血清对骨髓间充质干细胞GPR48、BMP6、ATF4表达影响的实验研究》文中研究说明目的:通过观察左归丸含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞GPR48、BMP6、ATF4的表达影响,研究左归丸治疗骨质疏松症的疗效机制,从而证明中医"肾藏精"理论的科学性。方法:将40只SPF级雌性大鼠按照正常组、左归丸组、诱导液组、阳性药物组骨疏康组、福善美组进行随机分组,并灌胃5 d,5 d后制备含药血清。运用现代医学实验技术观察左归丸含药血清对骨髓间充质干细胞的影响。结果:通过将左归丸组与正常组和阳性药物组及诱导液组的对比,可以看到该组的蛋白表达水平明显上升。结论:(1)骨质疏松症的发生与G蛋白偶联受体GPR48密切相关;(2)中药左归丸极有可能通过G蛋白偶联受体GPR48信号通路,来促使骨髓间充质干细胞向骨细胞分化。
吴佳莹,李岳泽,刘红,李艳,潘静华,赵宏艳,王少君,汪文来,张治国,鞠大宏,刘梅洁[8](2017)在《“肾主骨”机理研究——左归丸对Hepcidin、Fpn1及OPG/RANKL mRNA表达的影响》文中指出目的:从Hepcidin对其下游OPG/RANKL通路调节的角度,初步探讨左归丸对骨质疏松症的作用机理,并为进一步揭示"肾主骨"理论的科学内涵提供实验依据。方法:60只雌性SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组12只,假手术组12只,造模组36只共3组,造模组大鼠实行双侧卵巢切除术以制作骨质疏松症模型。造模结束后再将造模组大鼠随机分为OVX组、E2组、左归丸组,每组各12只,开始给予相应药物。给药3个月后,检测大鼠胫骨骨量(TBV%)、骨吸收(TRS%)和骨形成(TFS%、OSW、MAR、mAR)情况;采用原位杂交法检测各组大鼠肝组织中Hepcidin mRNA及胫骨骨髓中Fpn1、OPG及RANKL mRNA的表达。结果:OVX组大鼠胫骨TBV%较假手术组显着降低,而TRS%、TFS%、OSW、MAR、mAR较假手术组均有显着增高;与OVX组比较,左归丸组的TBV%显着增高,而TRS%、TFS%、OSW、MAR、mAR水平明显低于OVX组。与假手术组比较,OVX组大鼠肝脏中Hepcidin的mRNA表达强度均明显降低,大鼠胫骨骨髓中Fpn1和RANKL mRNA表达强度则明显增强,OPG mRNA的表达强度明显降低。与OVX组比较,左归丸组的大鼠肝组织中Hepcidin mRNA表达强度明显增高,胫骨骨髓中OPG mRNA表达强度明显增高,Fpn1和RANKL mRNA表达强度则明显下调。结论:左归丸可通过提高Hepcidin水平,增加与受体Fpn1的结合,进而对下游OPG/RANKL信号通路起到一定的调节作用,使OPG表达上调而下调RANKL的表达,从而降低破骨细胞活性,减少骨量丢失,这是其能够治疗骨质疏松症的机理之一。
吴佳莹[9](2017)在《基于Hepcidin-OPG/RANKL探讨左归丸治疗去卵巢所致大鼠骨质疏松症的作用机理》文中指出目的以卵巢切除大鼠为骨质疏松症动物模型,从Hepcidin对其下游OPG/RANKL通路调节的角度,部分揭示左归丸治疗骨质疏松症的作用机理。并为进一步阐明“肾主骨”理论的科学内涵提供实验依据。方法将60只SPF级雌性SD大鼠按体重随机分组,分别是空白对照组12只,假手术组12只,造模组36只。造模组大鼠用比例为45mg/kg体重的戊巴比妥钠麻醉后,施以双侧卵巢切除(OVX)手术。假手术组大鼠不切除卵巢,仅切除卵巢周围少许脂肪组织。施术后3个月,再将造模组大鼠按体重随机分为3组:模型组(OVX组)、OVX+戊酸雌二醇组(E2组)、OVX+左归丸组(左归丸组),每组各12只。分组后开始对各给药组大鼠灌胃给药:左归丸组大鼠灌胃给予左归丸水煎液,给药浓度为0.968 g生药/ml,给药体积为1ml/100g体重,给药剂量为9.68 g生药/kg体重;E2组大鼠灌胃给予戊酸雌二醇混悬液,给药浓度为0.018 mg/ml,给药体积为1ml/100g体重,给药剂量为0.18mg/kg体重。以上给药,一天一次,连续6天,休息1天后,再连续给药6天,如此给药3个月。空白对照组、假手术组和模型组大鼠按上法灌胃给予等体积的纯净水。灌胃期间,根据每周所称取的体重调整给药量。各组大鼠于处死前16天和前3天分别腹腔注射盐酸四环素0.5ml/100g体重,对骨组织进行荧光标记。给药结束后,将大鼠迅速处死,取肝脏,制作石蜡切片,用于肝脏铁离子水平的检测以及Hepcidin蛋白和mRNA表达的检测;取左侧股骨,用于骨生物力学指标的检测;取左侧胫骨,制作不脱钙骨切片,用于骨组织形态计量学指标的检测;取右侧胫骨,用EDTA脱钙,制作冰冻切片,用于骨组织中膜转铁蛋白1(Fpn1)以及OPG、RANKL蛋白和mRNA表达的检测。实验结果皆以均数±标准差(x±s)表示,均采用SPSS 20.0统计软件进行统计学处理。先进行正态性检验,正态分布数据两组以上的比较,采用单因素方差分析(ANOVA),组间两两比较,方差齐性的采用其项下的LSD检验;方差不齐的则采用其项下的Dunnett’sT3(3)检验;若数据为非正态分布时,采用非参数检验。结果1左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨组织形态计量学指标的影响OVX组大鼠胫骨TBV%显着低于假手术组。E2组、左归丸组的大鼠胫骨TBV%较OVX组显着增高,但仍显着低于假手术组。与假手术组相比,OVX组大鼠胫骨TRS%和TFS%均显着增高。E2组和左归丸组的大鼠胫骨TRS%和TFS%均显着低于OVX组,且E2组大鼠胫骨TFS%与假手术组无差异;但左归丸组大鼠的胫骨TRS%和TFS%以及E2组大鼠的TRS%仍明显高于假手术组。OVX组大鼠的胫骨OSW、MAR、mAR均显着高于假手术组。与OVX组相比,E2组和左归丸组的大鼠胫骨OSW、MAR、mAR均显着降低;E2组的上述指标与假手术组无差异,但左归丸组的OSW、MAR、mAR仍显着高于假手术组。2左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠股骨最大载荷(N)、弯曲强度(MPa)、弹性模量(GPa)的影响OVX组大鼠股骨的最大载荷、弯曲强度、弹性模量水平均显着低于假手术组;与OVX组相比,E2组、左归丸组的最大载荷、弯曲强度、弹性模量水平都显着升高,且E2组大鼠股骨的弯曲强度和弹性模量以及左归丸组大鼠股骨的弹性模量均与假手术组无差异;但左归丸组大鼠股骨的最大载荷和弯曲强度以及E2组大鼠股骨的最大载荷仍明显低于假手术组。3左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠肝组织中铁离子水平的影响与假手术组相比,OVX组的普鲁士蓝着色面积百分比显着增高;与OVX组相比,E2组、左归丸组的普鲁士蓝着色面积百分比明显下降,但仍高于假手术组。这一结果说明,OVX组大鼠肝组织中铁离子含量显着高于假手术组,而E2组、左归丸组大鼠肝组织中铁离子含量较OVX组下降明显,但仍高于假手术组。4左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠肝组织中Hepcidin蛋白及mRNA表达的影响与假手术组相比较,OVX组大鼠肝组织中Hepcidin蛋白及mRNA表达IOD显着降低;与OVX组相比,E2组和左归丸组的肝组织中Hepcidin蛋白及mRNA表达IOD则明显升高,但仍显着低于假手术组。5左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠胫骨骨髓中Fpn1、OPG、RANKL蛋白及mRNA表达的影响与假手术组相比,OVX组大鼠的胫骨骨髓中的Fpn1 mRNA表达IOD显着增高;与OVX组相比,E2、左归丸组的Fpn1mRNA表达IOD显着降低,但仍明显高于假手术组。与假手术组相比,OVX组大鼠的胫骨骨髓中OPG蛋白及mRNA表达IOD显着降低;与OVX组相比,E2组、左归丸组的OPG蛋白及mRNA表达阳性密度明显增高,且E2组OPG mRNA表达IOD与假手术组无差异;左归丸组OPG蛋白及mRNA以及E2组OPG蛋白表达IOD仍明显低于假手术组。与假手术组相比,OVX组大鼠胫骨骨髓中RANKL蛋白和mRNA表达IOD显着增高;与OVX组相比较,E2组、左归丸组RANKL蛋白和mRNA表达的IOD均显着下降,但仍高于假手术组。上述指标假手术组与空白对照组均无差异,从而排除了手术因素对实验结果的影响。结论(1)切除大鼠卵巢可导致高转换型骨质疏松症,即骨吸收和骨形成均增加,但由于骨吸收大于骨形成,而使骨量丢失。而左归丸可降低过高的骨转换率,提高骨量,对卵巢切除所致的骨质疏松症产生治疗作用。(2)切除大鼠卵巢可使肝组织分泌Hepcidin减少,铁离子沉积,发生铁过载;同时骨髓细胞上的RANKL表达显着上调,而OPG及Fpn1表达显着下调;两者共同作用,导致破骨细胞异常活跃,骨量丢失。而左归丸可通过提高Hepcidin水平,改善卵巢切除所致的铁过载,进而对下游的OPG/RANKL信号通路起到调节作用,最终使破骨细胞活性降低,减少骨量丢失。这是其能够治疗骨质疏松症的机理之一。以上结果同时表明:铁调素对铁过载的调节作用在“肾主骨”中起着一定作用。
张颖,李涢,张杰,刘梅洁,赵宏艳,潘静华,鞠大宏[10](2016)在《基于蛋白质组学方法研究左归丸治疗去卵巢所致骨质疏松症大鼠的作用机制》文中研究指明目的基于蛋白质组学方法研究左归丸治疗去卵巢所致骨质疏松症大鼠的作用机制,进而为阐明"肾主骨"理论的科学内涵寻找实验依据。方法将60只雌性Wistar大鼠随机分为2组,正常对照组20只和造模组40只。造模组大鼠通过摘除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松症(PMOP)模型,正常对照组大鼠只摘取卵巢周围的少许脂肪组织。手术2周后,再将40只造模组大鼠随机分为模型组及左归丸组,各20只。左归丸组予左归丸水煎剂灌胃,正常对照组及模型组予等容积蒸馏水灌胃。给药3个月后,比较3组大鼠胫骨骨小梁体积百分比(TBV%)水平,取大鼠双侧股骨骨髓进行蛋白质双向电泳并对电泳图谱进行分析,筛选出左归丸干预的相关蛋白,并进行质谱分析鉴定。结果模型组、左归丸组大鼠胫骨TBV%水平低于正常对照组(P<0.05),左归丸组大鼠胫骨TBV%水平高于模型组(P<0.05)。3组大鼠共筛选出23个差异蛋白质点,其中12个蛋白质点由于蛋白质分数不具有统计学意义而未得到鉴定,11个蛋白质点得到鉴定。检索数据库显示10号差异蛋白质点alpha-enolase为α-烯醇化酶,其免疫组化法检测显示模型组α-烯醇化酶阳性表达密度高于正常对照组(P<0.05),而左归丸组α-烯醇化酶阳性表达密度低于模型组(P<0.05),这与双向凝胶电泳图谱分析和质谱鉴定结果相一致。结论左归丸可能通过调节骨髓内与细胞增殖、分化、代谢、凋亡及氧化反应等相关蛋白质来实现对PMOP的防治作用,这些差异蛋白质可能与PMOP的发生发展具有一定的相关性。
二、左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨钙素和降钙素含量的影响(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨钙素和降钙素含量的影响(论文提纲范文)
(1)基于“脾肾相关”从SDF-1/CXCR4通路探讨绝经后骨质疏松症大鼠的病机研究(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
英文缩略词表 |
前言 |
第一部分 绝经后骨质疏松症大鼠模型建立及评价 |
材料与方法 |
实验结果 |
小结 |
第二部分 中医不同治法对绝经后骨质疏松症大鼠骨组织、骨骼肌SDF-1/CXCR4信号通路的影响 |
实验一 中医不同治法对绝经后骨质疏松症大鼠骨组织SDF-1/CXCR4信号通路的影响 |
材料与方法 |
实验结果 |
小结 |
实验二 中医不同治法对绝经后骨质疏松症大鼠骨骼肌SDF-1/CXCR4信号通路的影响 |
材料与方法 |
实验结果 |
小结 |
讨论 |
结论 |
本研究创新性的自我评价 |
参考文献 |
综述 从“脏腑相关”理论论治骨质疏松症的研究进展 |
参考文献 |
个人简介 |
在学期间科研成绩 |
致谢 |
(2)骨宝丸靶向调节BMP-2治疗Ⅰ型骨质疏松的机制探讨(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
引言 |
第一章 文献研究 |
第一节 现代医学对绝经后骨质疏松症的认识 |
一、骨质疏松症定义及流行病学研究 |
二、绝经后骨质疏松机制研究进展 |
第二节 祖国医学对绝经后骨质疏松症的认识 |
一、中医学对绝经后骨质疏松症的病因病机认识 |
二、绝经后骨质疏松症的辨证分型 |
第三节 中医药治疗绝经后骨质疏松症的研究进展 |
一、中医学治疗绝经后骨质疏松症的基本原则 |
二、单味中药治疗骨质疏松症 |
三、中药复方治疗骨质疏松症 |
第二章 实验研究 |
第一节 实验一临床研究 |
一、研究对象 |
二、分组方法 |
三、观察指标 |
四、统计学分析 |
五、结果与分析 |
六、讨论 |
第二节 实验二绝经后骨质疏松症小鼠模型的建立 |
一、实验材料 |
二、实验方法 |
三、统计学分析 |
四、结果与分析 |
五、讨论 |
第三节 实验三骨宝丸对维甲酸诱导骨质疏松小鼠的影响 |
一、实验材料 |
二、实验方法 |
三、统计学分析 |
四、结果与分析 |
五、讨论 |
第四节 实验四 骨宝口服液对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响及其作用机制 |
一、实验材料 |
二、实验方法 |
三、统计学分析 |
四、结果与分析 |
五、讨论 |
结语 |
参考文献 |
附录 |
在校期间发表论文情况 |
致谢 |
(3)左归丸含药血清对骨髓间充质干细胞Hedgehog信号通路中相关因子的表达研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
英文摘要 |
英文缩略词表 |
前言 |
论文一 各组含药血清对骨髓间充质干细胞ALP、GPR48及BMP2 的影响 |
材料与方法 |
1 实验材料 |
2 实验方法 |
实验结果 |
1.各组细胞上清液中 ALP 浓度的检测结果 |
2.各组细胞中 GPR48 浓度的检测结果 |
3 各组细胞上清液中 BMP2 浓度的检测结果 |
讨论 |
小结 |
论文二 左归丸含药血清对大鼠BMSCs Hedgehog信号通路的影响 |
材料与方法 |
1 实验材料 |
2 实验方法 |
实验结果 |
1 各组细胞上清液中 SHH 浓度的检测结果 |
2 各组细胞中 SMO 浓度的检测结果 |
3 各组细胞中 GLI1 浓度的检测结果 |
讨论 |
1 中医对OP的认识 |
2.对中药治疗OP的认识 |
3 中医对左归丸治疗OP的认识 |
4 Hedgehog信号通路及相关因子与OP的关系 |
5 福善美与OP的关系 |
6 中药血清药物化学 |
7 左归丸治疗 OP 的实验研究 |
小结 |
结论 |
本研究创新性的自我评价 |
参考文献 |
附图 |
综述 骨质疏松症相关信号通路的研究进展 |
参考文献 |
个人简介 |
在学期间科研成绩 |
致谢 |
(4)雌雄去势大鼠骨微观结构和生物力学性能的比较及右归丸干预作用的研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
ABSTRACT |
缩略词中英文对照表 |
文献综述 中医药防治骨质疏松症的研究进展 |
参考文献 |
前言 |
材料与方法 |
1 材料 |
1.1 实验动物 |
1.2 实验药物 |
1.3 实验主要试剂 |
1.4 实验主要仪器 |
2 方法 |
2.1 实验动物分组及处理 |
2.1.1 卵巢切除手术(OVX)的具体方法 |
2.1.2 睾丸切除手术(ORX)的具体方法 |
2.2 取材 |
2.3 脱钙骨冰冻切片的制作 |
2.4 指标检测 |
2.4.1 骨组织形态指标的检测 |
2.4.2 骨生物力学指标的检测 |
2.4.3 胫骨骨髓中MAPK(Erk1/2)、c-Fos、AP-1蛋白表达的检测 |
2.5 统计学分析 |
结果 |
1 雌雄去势大鼠股骨松质骨形态结构的比较及右归丸对其的干预作用 |
1.1 雌雄去势大鼠股骨松质骨BV/TV变化率的比较及右归丸对其的干预作用 |
1.2 雌雄去势大鼠股骨松质骨Conn.Dn变化率的比较及右归丸对其的干预作用 |
1.3 雌雄去势大鼠股骨松质骨Cb.C变化率的比较及右归丸对其的干预作用 711.4 雌雄去势大鼠股骨松质骨DA的比较及右归丸对其的干预作用 |
1.4 雌雄去势大鼠股骨松质骨DA的比较及右归丸对其的干预作用 |
1.5 雌雄去势大鼠股骨松质骨Tb.Pf的比较及右归丸对其的干预作用 |
2 雌雄去势大鼠股骨皮质骨生物力学性能的比较及右归丸对其的干预作用 |
2.1 雌雄去势大鼠股骨皮质骨ML变化率的比较及右丸对其的干预作用 |
2.2 雌雄去势大鼠股骨皮质骨BS变化率的比较及右归丸对其的干预作用 |
2.3 雌雄去势大鼠股骨皮质骨EM变化率的比较及右归丸对其的干预作用 |
3 雌雄去势大鼠胫骨骨髓中MAPK(Erk1/2)、c-Fos、AP-1蛋白表达的比较及右归丸对其的干预作用 |
3.1 雌雄去势大鼠胫骨骨髓中MAPK(Erk1/2)蛋白表达的比较及右归丸对其的干预作用 |
3.2 雌雄去势大鼠胫骨骨髓中c-Fos蛋白表达的比较及右归丸对其的干预作用 |
3.3 雌雄去势大鼠胫骨骨髓中AP-1蛋白表达的比较及右归丸对其的干预作用 |
讨论 |
1 从“性别差异”角度探讨中医“肾主骨”理论与骨质疏松症的关系 |
2 雌雄去势大鼠骨微观结构的比较 |
3 雌雄去势大鼠骨生物力学性能的比较 |
4 右归丸对雌、雄去势大鼠骨微观结构和生物力学性能的干预作用 |
4.1 右归丸对雌、雄去势大鼠骨微观结构的干预作用 |
4.2 右归丸对雌、雄去势大鼠骨生物力学性能的干预作用 |
5 机制探讨 |
结论 |
参考文献 |
致谢 |
个人简介 |
附图 |
(5)骨质疏松症的中医药防治研究进展(论文提纲范文)
1 OP的中医认识 |
2 中药单体对OP作用的研究 |
2.1 实验研究进展 |
2.1.1 淫羊藿。 |
2.1.2 巴戟天。 |
2.1.3 枸杞。 |
2.1.4 葛根。 |
2.1.5 丹参。 |
2.1.6 牛膝。 |
2.1.7 三七。 |
2.1.8 何首乌。 |
2.1.9 菟丝子。 |
2.1.1 0 骨碎补。 |
2.1.1 1 鹿角胶。 |
2.1.1 2 杜仲。 |
2.1.1 3 蛇床子。 |
2.2 临床研究进展黄芪防治OP有特殊作用。 |
3 中药复方对OP作用的研究 |
3.1 实验研究进展 |
3.1.1 补肾活血方。 |
3.1.2 骨松康合剂。 |
3.1.3 益骨汤。 |
3.1.4 左归丸。 |
3.1.5 密骨颗粒。 |
3.2 临床研究进展 |
3.2.1 龟丝补骨片。 |
3.2.2 补肾丸。 |
4 结语 |
(6)葛根素对尾吊大鼠发生废用性骨质疏松的预防作用研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
英文缩略说明 |
前言 |
一、立体依据 |
1.1 研究背景 |
1.2 研究意义 |
1.3 研究目标 |
1.4 研究内容 |
1.5 技术路线图 |
1.6 拟解决的关键性问题 |
1.7 课题特色与创新之处 |
二、实验研究 |
2.1 实验材料 |
2.1.1 实验仪器 |
2.1.2 实验试剂 |
2.1.3 实验药品 |
2.1.4 实验动物 |
2.1.5 实验动物饲养 |
2.2 实验方法 |
2.2.1 分组 |
2.2.2 造模方法 |
2.2.3 配药及给药 |
2.2.4 检测指标 |
2.2.4.1 脏器病理学指标分析 |
2.2.4.2 骨密度参数检测 |
2.2.4.3 骨生物力学指标的测定 |
2.2.4.4 血清生化指标的分析 |
2.2.4.5 骨形态计量学指标的分析 |
2.2.5 统计学分析 |
三、实验结果 |
3.1 大鼠体质量变化结果 |
3.2 脏器病理学检查结果 |
3.3 骨密度(BMD)检测结果 |
3.4 骨生物力学检测结果 |
3.5 VG染色检测结果 |
3.6 双荧光标记检测结果 |
3.7 血清生化指标检测结果 |
四、讨论 |
4.1 废用性骨质疏松模型 |
4.2 实验结果分析讨论 |
4.2.1 体质量检测 |
4.2.2 脏器病理学变化情况 |
4.2.3 骨密度(BMD)检测 |
4.2.4 骨生物力学性能变化情况 |
4.2.5 骨形态计量学检测 |
4.2.6 血清骨代谢生化指标变化情况 |
4.2.7 小结 |
五、结语 |
5.1 结论 |
5.2 本研究的局限性 |
5.3 展望 |
参考文献 |
附录 |
附录一 实验动物质量合格证书 |
附录二 实验场景 |
附录三 实验试剂 |
文献综述一 |
参考文献 |
文献综述二 |
参考文献 |
致谢 |
在研期间主要研究成果 |
发表学术论文 |
参与科研课题 |
参加学术活动 |
(7)左归丸含药血清对骨髓间充质干细胞GPR48、BMP6、ATF4表达影响的实验研究(论文提纲范文)
1 实验材料 |
1.1 实验动物 |
1.2 实验药物及制备 |
1.3 主要试剂 |
1.4 主要仪器 |
2 实验方法 |
2.1 动物分组及给药 |
2.2 取材方法 |
2.3 检测指标及方法 |
2.4 统计学方法 |
3 结果与分析 |
3.1 ELISA法检测骨形成蛋白6 (BMP6) 的结果与分析 |
3.2 ELISA法检测 |
3.3 ELISA法检测大鼠骨组织中GPR48蛋白的表达结果与分析 |
4 讨论 |
4.1 临床中左归丸治疗骨质疏松的运用 |
4.2 GPR48信号通路的调控作用 |
5 结论 |
(8)“肾主骨”机理研究——左归丸对Hepcidin、Fpn1及OPG/RANKL mRNA表达的影响(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 动物 |
1.2 药物 |
1.3 试剂 |
1.4 仪器 |
1.5 方法 |
1.5.1 动物模型制作及分组给药 |
1.5.2 指标检测 |
1.5.3 统计学方法[1] |
2 结果 |
2.1 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨组织形态计量学指标的影响 |
2.1.1 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠胫骨TBV%的影响 |
2.1.2 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠胫骨TRS%和TFS%的影响 |
2.1.3 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠胫骨OSW、MAR和m AR的影响 |
2.2 Hepcidin、Fpn1、OPG及RANKL mRNA表达的检测 |
2.2.1 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠肝组织中Hepcidin mRNA表达的影响 |
2.2.2 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠胫骨骨髓中Fpn1 mRNA表达的影响 |
2.2.3 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠胫骨骨髓中OPG、RANKL mRNA表达的影响 |
3 讨论 |
(9)基于Hepcidin-OPG/RANKL探讨左归丸治疗去卵巢所致大鼠骨质疏松症的作用机理(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
缩略词中英文对照表 |
综述 中药补肾复方治疗骨质疏松症的研究进展 |
参考文献 |
前言 |
材料与方法 |
1 材料 |
1.1 实验动物 |
1.2 药物 |
1.3 主要试剂 |
1.4 主要仪器 |
2 方法 |
2.1 动物分组及处理 |
2.2 取材 |
2.3 不脱钙骨切片的制作 |
2.4 脱钙骨冰冻切片的制作 |
2.5 肝脏石蜡切片的制作 |
2.6 指标检测 |
2.7 统计学分析 |
结果 |
1 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨组织形态计量学指标的影响 |
2 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠股骨最大载荷(N)、弯曲强度( MPa)、弹性模量(GPa)的影响 |
3 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠肝组织中铁离子水平的影响 |
4 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠肝组织中Hepcidin蛋白及mRNA表达的影响 |
5 左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠胫骨骨髓中Fpn1、OPG、RANKL蛋白及mRNA表达的影响 |
讨论 |
1 中医“肾主骨”理论与骨质疏松症关系探讨 |
2 左归丸对骨质疏松症的治疗作用探讨 |
3 基于Hepcidin-OPG/RANKL探讨左归丸治疗骨质疏松症的作用机理 |
结论 |
参考文献 |
致谢 |
个人简介 |
附图 |
(10)基于蛋白质组学方法研究左归丸治疗去卵巢所致骨质疏松症大鼠的作用机制(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 实验动物 |
1.2 实验药物 |
1.3 主要试剂及仪器 |
1.3.1 试剂 |
1.3.2 仪器 |
1.4 实验方法 |
1.4.1 动物分组及模型制作 |
1.4.2 给药方法 |
1.5 观察指标及方法 |
1.5.1 骨小梁体积百分比(TBV%)检测 |
1.5.2 蛋白质提取 |
1.5.3 骨髓蛋白分析鉴定 |
1.6 统计学方法 |
2 结果 |
2.1 3组大鼠胫骨TBV%水平比较 |
2.2 3组大鼠股骨骨髓中蛋白质的表达 |
2.2.1 双向凝胶电泳结果 |
2.2.2 3组大鼠差异蛋白质点质谱鉴定结果 |
2.2.3 免疫组化法验证3组大鼠股骨骨髓中α-烯醇化酶的表达 |
3 讨论 |
四、左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨钙素和降钙素含量的影响(论文参考文献)
- [1]基于“脾肾相关”从SDF-1/CXCR4通路探讨绝经后骨质疏松症大鼠的病机研究[D]. 杨铠宁. 辽宁中医药大学, 2021(02)
- [2]骨宝丸靶向调节BMP-2治疗Ⅰ型骨质疏松的机制探讨[D]. 张念军. 广州中医药大学, 2020(05)
- [3]左归丸含药血清对骨髓间充质干细胞Hedgehog信号通路中相关因子的表达研究[D]. 高举会. 辽宁中医药大学, 2020(02)
- [4]雌雄去势大鼠骨微观结构和生物力学性能的比较及右归丸干预作用的研究[D]. 柴勇. 中国中医科学院, 2019(01)
- [5]骨质疏松症的中医药防治研究进展[J]. 李凯,陈克明. 甘肃医药, 2019(04)
- [6]葛根素对尾吊大鼠发生废用性骨质疏松的预防作用研究[D]. 李凯. 甘肃中医药大学, 2019(03)
- [7]左归丸含药血清对骨髓间充质干细胞GPR48、BMP6、ATF4表达影响的实验研究[J]. 陈东阳,林庶茹,邓洋洋,李佳,尚德阳. 辽宁中医杂志, 2018(02)
- [8]“肾主骨”机理研究——左归丸对Hepcidin、Fpn1及OPG/RANKL mRNA表达的影响[J]. 吴佳莹,李岳泽,刘红,李艳,潘静华,赵宏艳,王少君,汪文来,张治国,鞠大宏,刘梅洁. 中国中医基础医学杂志, 2017(11)
- [9]基于Hepcidin-OPG/RANKL探讨左归丸治疗去卵巢所致大鼠骨质疏松症的作用机理[D]. 吴佳莹. 中国中医科学院, 2017(02)
- [10]基于蛋白质组学方法研究左归丸治疗去卵巢所致骨质疏松症大鼠的作用机制[J]. 张颖,李涢,张杰,刘梅洁,赵宏艳,潘静华,鞠大宏. 河北中医, 2016(07)