一、红花黄酮对孵育海马脑片分泌型淀粉样前体蛋白释放的影响（论文文献综述）
吴永继[1]（2021）在《杜仲水提物对脂多糖诱导的小鼠神经炎症的保护作用及其机制研究》文中认为多项研究表明,神经炎症是参与神经元变性的关键过程,同时也是多种神经退行性疾病的发病因素之一。近年来,研究者以抑制神经炎症为切入点,寻找缓解或治疗上述疾病的抗炎药物。杜仲属于杜仲科杜仲属的单一树种,具有较强的降血压、降血糖、抗氧化、抗炎及神经保护等药理作用。杜仲对中枢神经系统疾病的治疗作用的相关报道也越来越多,且已成为治疗神经退行性疾病的中药配方中不可缺少的组成部分。但杜仲水提物（water extract of Eucommia ulmoides Oliver,WEE）是否具有抑制神经炎症、改善神经炎症引起的认知功能障碍、抑郁样行为及肠道菌群等作用的报道甚少。本研究利用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）建立神经炎症的小鼠模型及细胞模型,通过在体试验与体外试验相结合,探讨WEE对LPS诱导的神经炎症的缓解作用及潜在的分子机制,旨在为杜仲的综合性利用及开发新的抗炎天然药物提供科学依据。主要的试验结果如下:（1）WEE抑制LPS诱导的大脑组织中SOD、GSH-Px活力下降及MDA含量减少的程度,表现出一定的抗氧化性。通过水迷宫试验和爬杆试验发现,WEE能够改善LPS诱导的小鼠认知功能障碍;通过旷场试验及高架十字迷宫试验发现,与LPS组小鼠相比,WEE能够改善LPS诱导的小鼠抑郁样行为;为探究小鼠行为学变化的原因,分析海马中与学习记忆相关蛋白的表达及不同小棘的比例变化。结果发现,与LPS组相比,WEE能够增加海马中Mushroom状小棘的比例,上调突触相关蛋白如:突触泡蛋白（synaptophysin,SYP）,树突棘素（spinophilin,SPN）和突触后致密蛋白（PSD95）的表达水平,改善LPS诱导的小鼠认知功能障碍及抑郁样行为。（2）LPS引起小鼠海马颗粒细胞下层（Subgranular zone,SGZ）Brd U+和DCX+的细胞数量减少,分子层（Mesomolecular layer,ML）中Brd U+细胞数量增多,WEE明显增加了DCX+细胞的数量。与LPS组相比,WEE降低了LPS诱导的新生细胞向胶质细胞分化的程度,增加祖细胞不对称分裂的百分比。以上结果表明,WEE对LPS诱导的小鼠海马中成体神经的发生具有一定的保护作用。通过Sholl及Skeleton/Fractal方法对小胶质细胞的形态进行分析发现,WEE能明显影响LPS诱导的小鼠海马中小胶质细胞的形态变化及复杂性。（3）通过免疫荧光染色分析星形胶质细胞与小胶质细胞在海马不同区域的密度,结果发现,与LPS组相比,WEE明显降低GFAP+细胞在海马CA1,CA3,ML和门区的密度及海马中GFAP蛋白表达。类似地,与LPS组相比,WEE能明显降低Iba1+细胞在CA1,CA3及门区的密度。通过q PCR检测发现,与LPS组相比,WEE显着降低IL-1β、IL-6、IL-1ra、i NOS、Arg-1的m RNA表达水平,同时降低MMP9、MCP-1、m PPARγ的m RNA水平。通过Western blot发现,WEE通过抑制LPS激活的NFκB、p38 MAPK信号通路、凋亡及内质网应激的相关蛋白的表达发挥神经保护作用。（4）通过免疫荧光染色与Western blot分析大脑皮层中小胶质细胞及星形胶质细胞的表达发现,与LPS组比,WEE降低小鼠大脑皮层中GFAP+与Iba1+的细胞密度及相应蛋白表达量。通过q PCR检测发现,与LPS组相比,WEE能够明显抑制TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10及IL-1ra等炎症因子在大脑皮层中的表达。Western blot结果表明,WEE能够抑制LPS激活的NFκB、p38 MAPK通路及凋亡相关蛋白的表达发挥神经保护作用。（5）通过16S rRNA测序分析发现,WEE能通过调节肠道菌群的结构组成保护小鼠肠道免受LPS的损伤。且与LPS组相比,WEE能够抑制小鼠结肠中TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-10,IL-1ra及Occludin的表达,增加结肠中紧密相关蛋白的表达,缓解肠道炎症的发生。（6）通过LPS作用于BV2细胞建立细胞炎症模型发现,与LPS组相比,WEE增加BV2细胞的存活率,降低细胞的分化程度及ROS的含量,且能够抑制LPS诱导的炎症相关因子的表达,并表现出一定的浓度依赖性。Western blot结果表明,WEE能够抑制LPS激活的NFκB、p38 MAPK信号通路与凋亡相关蛋白的表达水平缓解细胞炎症。综上所述,WEE能够改善LPS诱导的小鼠认知功能障碍及抑郁样行为;对LPS诱导海马中成体神经发生起到保护作用;抑制小鼠大脑皮层与海马中炎症相关因子与TLR4、NFκB、p38 MAPK介导的信号通路、凋亡及内质网应激相关蛋白的表达发挥神经保护作用。
崔悦[2]（2019）在《骨碎补提取物对两种记忆障碍模型小鼠和Aβ损伤PC12细胞的保护作用研究》文中研究指明目的:根据实验室的前期研究,骨碎补总黄酮在治疗AD上可作为有效部位,并且紫云英苷和圣草酚是骨碎补总黄酮中含量较高的两种有效成分。本实验将以骨碎补提取物对记忆障碍模型小鼠的学习认知记忆能力的影响及机制进行研究,并探究骨碎补总黄酮中主要成分紫云英苷及圣草酚对Aβ25-35诱导损伤PC12细胞的影响及其机制,为明确补肾中药骨碎补预防及治疗阿尔茨海默病作用机制奠定实验基础。方法:动物实验:将骨碎补提取物灌胃给予东莨菪碱和亚硝酸钠建立两种学习记忆障碍小鼠模型,观察骨碎补提取物对模型小鼠的学习记忆改善作用。将14周的昆明小鼠按体重随机分组,分为空白组、模型组、阳性对照组、骨碎补提取物组和骨碎补提取物+ER阻断剂组。采用新物体识别、Morris水迷宫、跳台实验观察小鼠的记忆及判断能力;采用HE染色、透射电镜和免疫组化方法观察小鼠海马及下丘脑区的病理改变,小鼠海马区ERβ及下丘脑区ERα的表达;采用Western Blot法检测海马中ERβ、P-P38/P38蛋白含量及Aβ代谢相关指标、Tau蛋白磷酸化相关指标、凋亡系统相关指标的蛋白含量;试剂盒法检测海马中乙酰胆碱系统及氧化应激系统中相关蛋白含量。细胞实验:将紫云英苷及圣草酚分别作用于Aβ25-35诱导损伤的PC12细胞,采用MTT法检测细胞存活率;Western Blot方法检测细胞ERβ、P-P38/P38、Bcl-2、Caspase-3的蛋白含量。再进一步给予ER阻断剂ICI182780、P38/MAPK阻断剂SB203580后,检测对紫云英苷及圣草酚作用的变化,深入研究ER-P38/MAPK信号通路是否参与了紫云英苷或圣草酚对Aβ25-35损伤PC12细胞的保护作用。结果:动物实验结果新物体识别实验结果表明,在给予骨碎补提取物后模型小鼠的新物体识别指数显着增加（P<0.01）;水迷宫实验结果表明,在给予骨碎补提取物后模型小鼠的逃避潜伏期显着缩短（P<0.01）,平台穿越次数及靶象限停留时间显着增加（P<0.01）;跳台实验结果表明,在给予骨碎补提取物后模型小鼠的错误次数、潜伏期显着缩短（P<0.01）;上述作用均能被ER阻断剂ICI182780逆转,说明骨碎补提取物可通过ER通路介导对模型小鼠发挥保护作用。HE染色实验结果表明,两种记忆障碍模型小鼠给予骨碎补提取物后,海马区神经元排列较为紧密且数量较多,形态正常,没有明显核固缩现象;电镜实验结果表明,两种记忆障碍模型小鼠给予骨碎补提取物后,神经毡区突触小泡数量明显增多,细胞双层核膜清晰、核仁明显。免疫组织化学实验结果表明,两种记忆障碍模型小鼠给予骨碎补提取物后,显着增加两种记忆障碍模型小鼠海马区ERβ的表达及下丘脑区ERα的表达（P<0.01）;上述作用均能被ER阻断剂ICI182780逆转,说明骨碎补提取物可通过ER通路介导对模型小鼠发挥保护作用。Western Blot实验结果表明,两种记忆障碍模型小鼠给予骨碎补提取物后,骨碎补提取物组小鼠海马区ERβ、NMDAR1、GluR2和Bcl-2的表达显着增加（P<0.01）,P-P38/P38、APP、BACE1、P-Tau396、CDK5、CAMKⅡ、Bad和Caspase-3的表达显着降低（P<0.01）;骨碎补提取物组给予ER阻断剂后,转变了以上蛋白含量的变化;试剂盒法实验结果表明,两种记忆障碍模型小鼠给予骨碎补提取物后,骨碎补提取物组小鼠海马区Ach含量和ChAT的活性在给予骨碎补提取物后显着提高,AchE、MDA及NO活性显着降低（P<0.01）,骨碎补提取物组给予ER阻断剂后转变以上蛋白的变化,说明骨碎补提取物可通过ER通路介导对模型小鼠发挥保护作用。细胞实验结果MTT结果显示,Aβ25-35组细胞增殖率显着降低（P<0.01）;圣草酚及紫云英苷组细胞增殖率显着升高（P<0.01）,给予ER阻断剂、P38阻断剂后阻断了圣草酚及紫云英苷组的上调作用（P<0.01）;Western blot结果显示,圣草酚及紫云英苷组ERβ和Bcl-2的表达显着增加（P<0.01）,P-P38/P38和Caspase-3的表达显着降低（P<0.01）;给予ER阻断剂后,ERβ和Bcl-2的表达显着减少（P<0.01）,P-P38/P38和Caspase-3的表达显着升高（P<0.01）;给予P38阻断剂后,Bcl-2的表达显着减少（P<0.01）,P-P38/P38和Caspase-3的表达显着升高（P<0.01）。结论:骨碎补提取物能够通过ER-P38/MAPK信号通路调节两种记忆障碍模型小鼠的Aβ代谢系统、Tau蛋白磷酸化系统、乙酰胆碱系统、氧化应激系统、凋亡系统发挥神经保护作用;紫云英苷和圣草酚通过ER-P38/MAPK信号通路对Aβ25-35诱导损伤的PC12细胞具有保护作用。
罗拯[3]（2019）在《漆树黄酮对脂多糖诱导的阿尔茨海默病模型大鼠认知损害的影响及其作用机制的研究》文中提出目的:漆树黄酮（Fisetin）作为一种黄酮类化合物,是漆树的主要活性成分之一,具有广泛的生物学作用。研究报道,Fisetin具有营养神经、抗炎和抗氧化作用,可能对神经退行性病变具有潜在作用。虽然目前对于Fisetin与学习记忆关系的研究较少,但近来有研究发现,Fisetin可易化突触传递的长时程增强（long-term potentiation,LTP）,改善记忆障碍。本实验研究Fisetin对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）模型大鼠认知损害的影响及其作用机制。方法:将2-3月龄SD（Sprague Dawley）雄性大鼠,随机分为control组,LPS组和LPS+Fisetin组。其中control组和LPS组分别给予连续7天腹腔注射生理盐水和LPS;LPS+Fisetin组连续7天腹腔注射LPS后再给予连续14天腹腔注射Fisetin处理。采用Aβ42酶联免疫吸附试剂盒检测大鼠海马组织Aβ含量;旷场实验、高架十字迷宫实验观察大鼠的自发活动和焦虑状态;Morris水迷宫和条件性恐惧实验检测大鼠的记忆水平;场电生理检测海马schaffer侧支-CA1区的LTP变化;Western blotting技术检测大鼠海马组织学习记忆关键蛋白的表达水平。结果:（1）Elisa结果显示,LPS组大鼠海马脑区Aβ沉积明显增加（p<0.01 vs.control组）;LPS+Fisetin组大鼠海马脑区Aβ沉积明显降低（p<0.01 vs.LPS组）（2）旷场实验和高架十字迷宫实验显示,三组实验大鼠的自发活动和焦虑状态无明显统计学差异（p>0.05）（3）Morris水迷宫实验结果显示,定位航行训练中,LPS组大鼠逃避潜伏期明显延长（p<0.05 vs.control组）。LPS+Fisetin组逃避潜伏期明显缩短（p<0.05vs.LPS组）。（4）Morris水迷宫实验空间探索阶段,LPS组大鼠在安全平台所在象限活动时间明显缩短、穿越安全平台原来位置次数明显减少、逃避潜伏期明显延长（p<0.01 vs.control组）。LPS+Fisetin组在安全平台所在象限活动时间明显延长、穿越安全平台原来位置次数明显增多、逃避潜伏期明显缩短（p<0.05 vs.LPS组）。（5）情景恐惧记忆测试阶段,LPS组大鼠木僵行为时间百分比明显减少（p<0.05 vs.control组）;LPS+Fisetin组木僵行为时间百分比明显增加（p<0.01vs.LPS组）。（6）在暗示性恐惧记忆测试阶段,LPS组大鼠木僵行为时间百分比明显减少（p<0.05 vs.control组）;LPS+Fisetin组木僵行为时间百分比明显增加（p<0.01vs.LPS组）。（7）电生理实验显示,LPS组大鼠海马脑区LTP受损（p<0.01 vs.control组）;Fisetin能够逆转LPS所导致的LTP损伤（p<0.01 vs.LPS组）;三组之间双波易化无明显差异。（8）Western blotting结果显示,LPS、Fisetin均不影响CaMKII、ERK1/2、CREB的总蛋白表达。LPS组大鼠pCaMKII、pERK1/2、pCREB表达明显减少（p<0.01 vs.control组）。LPS+Fisetin组pCaMKII、pERK1/2、pCREB表达明显增加（p<0.01或0.05 vs.LPS组）。结论:腹腔注射Fisetin明显降低LPS诱导的AD模型大鼠海马组织Aβ沉积,改善认知功能损害,逆转海马脑区LTP损伤及海马组织突触后学习记忆相关蛋白pCaMKII、pERK1/2、pCREB表达。Fisetin可作为治疗AD的潜在药物。
陈丽青[4]（2018）在《连翘酯苷A抗AD模型炎症及凋亡的机制研究》文中指出阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease,AD）是一种导致学习记忆障碍的神经退行性疾病,由于中国的人口老龄化渐趋严重,成为威胁老年人最主要的疾病之一,并且为国家带来了严重的经济负担,因此治疗或者预防AD的发生刻不容缓。连翘酯苷A是连翘的主要成分之一,连翘酯苷A已被广为人知的特性是抑菌、抗炎、抗氧化,其在动物行为学可以改善AD的学习记忆障碍,但其机制尚不清楚,因此,本文探讨连翘酯苷A抗老年痴呆模型神经炎症及凋亡的分子机制。具体研究方法与结果如下:1.连翘酯苷A对Aβ25-35聚集体诱导海马脑片损伤的影响:Aβ25-35聚集时间、浓度及连翘酯苷A浓度的确定,连翘酯苷A对Aβ25-35聚集体诱导海马脑片损伤的影响。用硫黄素T法确定Aβ25-35聚集条件为37℃培养箱中放置96 h。运用乳酸脱氢酶试剂盒、NO试剂盒检测确定5μM Aβ25-35聚集体作用海马脑片24 h为AD模型,连翘酯苷A最佳给药浓度为50μg·mL-1且连翘酯苷A对Aβ25-35聚集体诱导的海马脑片损伤有改善作用。连翘酯苷A及Aβ25-35聚集体作用海马脑片的浓度及Aβ25-35聚集条件的确定为后续实验的顺利进行奠定了基础。2.连翘酯苷A对Aβ25-35聚集体诱导海马神经炎症及凋亡的分子机制:（1）通过LC-MS分析,连翘酯苷A上调了2-AG信号;（2）连翘酯苷A上调内源性2-AG是通过抑制2-AG的代谢来实现的,连翘酯苷A降低2-AG特异性水解酶MAGL的表达量从而增加2-AG;（3）2-AG作为COX-2反应生成炎症因子PGE2的底物,连翘酯苷A降低COX-2的表达并且降低Aβ诱导的炎症因子PGE2的释放量,并通过抑酶实验,得出连翘酯苷A对COX-2的IC50值为4.89μM,说明连翘酯苷A对COX-2有直接抑制作用,以及分子对接模拟二者结合方式,发现连翘酯苷A与COX-2结合口袋上的残基形成六个氢键;（4）采用试剂盒检测（TNF-α、PGE2）、Western blot技术检测炎症（TNF-α）和凋亡蛋白（Bax/Bcl-2、Active caspase-3）表达量,发现连翘酯苷A对Aβ25-35诱导海马脑片炎症及凋亡具有改善作用,并通过加入CB1R的抑制剂SR1来阻断CB1R,发现连翘酯苷A对Aβ25-35诱导海马脑片炎症及凋亡的改善作用消失,说明连翘酯苷A是通过CB1R改善Aβ25-35诱导海马脑片炎症及凋亡,从而保护神经元;（5）连翘酯苷A降低Aβ25-35诱导磷酸化的NF-κB蛋白表达量说明连翘酯苷A通过NF-κB信号通路保护Aβ25-35诱导的神经炎症及凋亡;（6）长时程增强（Long-term potentiation,LTP）是学习记忆的一个典型模型,通过LTP场电位的记录,表明连翘酯苷A对Aβ25-35诱导的学习记忆障碍有改善作用;（7）LTP的变化是由于GABA、Glu等神经递质在突触后的含量变化导致的,而连翘酯苷A改变了Aβ25-35诱导的AD症中相关神经递质的含量。以上机制的研究为连翘酯苷A的抗炎等功效提供了实验依据,为连翘酯苷A作为治疗和预防AD的药物奠定了坚实的基础。3.连翘叶粗提物和连翘酯苷A对LPS诱导小鼠海马脑片损伤的影响:5和50μg/mL的连翘叶粗提物和连翘酯苷A对海马脑片LDH漏出量有明显抑制作用,则连翘叶粗提物和连翘酯苷A对海马脑片的存活起一定的保护作用。我们以1μg/mL的LPS作用小鼠海马脑片24 h作为损伤模型,研究5和50μg/mL的连翘叶粗提物和连翘酯苷A对损伤模型的影响,通过乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒的测定;炎症因子NO、IL-1β、TNF-α含量的测定;凋亡蛋白caspase-3、cleaved caspase-3的蛋白表达量测定,表明连翘酯苷A和连翘叶粗物对LPS诱导的海马损伤具有改善作用,且含等量连翘酯苷A的连翘叶和单品比,连翘叶提取物的神经保护作用更好。这为进一步开发连翘叶的功效奠定了基础。
闫蓉,常翔,杨从,苏如玉,侯雪芹,张磊,张春霞,方淑环,陈云波,王奇[5]（2013）在《阿尔兹海默病β淀粉样蛋白形成和沉积的发病机制及中医药干预的可能途径》文中进行了进一步梳理阿尔兹海默病（Alzheimer’s disease,AD）是以认知功能障碍和记忆损害为主要临床特征的神经退行性疾病,其病因复杂,并缺乏有效的诊断、治疗和预防手段。β淀粉样蛋白（Aβ）被认为是AD治疗的关键靶标。Aβ是AD形成和发展的关键因素,以Aβ为靶标可能是AD预防和治疗的有效策略。中药对减少Aβ生成和沉积、促进Aβ清除方面已取得了系列的研究成果。中医药治疗AD应创新研究思路,以Aβ为靶标,开展方药配伍、临床试验研究,从而提高中医药治疗AD的疗效。
邓少东[6]（2013）在《巴戟天低聚糖益脑作用机制研究》文中研究说明目的:本设计以巴戟天中低聚糖类成分为研究对象,结合导师组前期研究基础开展巴戟天药材中低聚糖类成分的质控研究,及其低聚糖部位提取、纯化工艺研究,进一步完善巴戟天药材的质控体系。采用动物体内及体外等实验方法,考察巴戟天低聚糖部位及其主要有效成分巴戟甲素的在体肠吸收机制、对肝脏中CYP3A4酶代谢的影响,以期为巴戟天低聚糖类成分的口服制剂研究和开发提供科学依据,并为其药代动力学和药效学的进一步研究奠定基础。采用拟阿尔海茨默（AD）动物模型,探讨巴戟天低聚糖部位及其主要有效成分巴戟甲素的抗AD药效及作用机制研究,为其抗AD新药研究与开发提供研究基础。方法:1巴戟天低聚糖有效部位质控研究采用亲水作用色谱-蒸发光散射检测法建立巴戟天中蔗糖、蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖、巴戟甲素等5种低聚糖的含量测定方法。采用正交试验法优选巴戟天低聚糖的提取工艺,以巴戟天低聚糖类提取物的出膏率、低聚糖含量以及其主要的活性成分巴戟甲素、耐斯糖为考察指标,进行多指标综合评价分析,优选出最佳提取工艺采用活性炭与D-900离子交换树脂柱层析结合溶剂法对巴戟天低聚糖提取物进行纯化,以HPLC-UV-ELSD、UV、LC-MS等方法检测蔗糖、蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖、巴戟甲素、低聚糖等指标的含量及纯度。2巴戟天低聚糖的药代动力学研究采用大鼠体肠单向灌流法研究巴戟天低聚糖部位及其主要有效成分巴戟甲素在大鼠肠道中的吸收转运机制,考察蔗糖、蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖和巴戟甲素等5种低聚糖类成分的大鼠肠吸收特点,确定各成分的最佳吸收部位,并考察了 P-gp对巴戟天低聚糖类成分吸收的影响。利用β-D-呋喃果糖苷酶对巴戟甲素进行水解,确定巴戟甲素是否β-D-呋喃果糖苷酶的底物,同时确定巴戟甲素的酶水解产物,并初步研究其酶促反应动力学。以肝脏CYP3A4酶的探针底物氨苯砜,考察不同剂量巴戟天低聚糖提取物及其主要活性成份巴戟甲素对大鼠肝脏CYP3A4活性的影响,以预测其联合应用CYP3A4亚型酶代谢的药物时发生药物相互作用的可能性。3巴戟天低聚糖对AD模型大鼠的影响采用D-半乳糖联合Aβ 25-35制备拟阿尔海茨默大鼠模型,连续给予巴戟天提取物（BT）、巴戟天低聚糖部位（BD）、巴戟甲素（BJ）28 d后,采用Morris水迷宫进行空间学习记忆能力检测,考察给药前后对AD模型大鼠的体重和脏器系数等的影响;采用试剂盒酶-标仪法测定AD大鼠脑海马区及皮质区中超氧化歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽还原酶（GSH-Px）等氧化指标,以及乙酰胆碱（Ach）、乙酰胆碱酯酶（TchE）、Na+/K+-ATPase、谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GABA）、NO、NOS等指标的含量;采用HPLC-ECD法检测AD大鼠脑海马区及皮质区中多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）、5-羟色胺（5-HT）等单胺类神经递质水平,及其相关代谢产物5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）、高香草酸（HVA）、3,4-二羟基苯乙酸（DOPAC）、左旋多巴（L-DOPA）的含量;采用免疫蛋白印迹法（Westernblot）考察BJ、BD、BT对AD模型大鼠海马区中APP、Tau、Caspase-3、SYP蛋白表达的影响。结果:1巴戟天低聚糖有效部位质控研究巴戟天中蔗糖、蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖、巴戟甲素等5种低聚糖分别在2.128～21.28 μ g（r= 0.9993）,1.864～18.64 μ g（r=0.9996）,1.92～19.2 μ g（r=0.9998）,1.912～19.12 μ g（r=0.9995）,2.368～23.68 u g（r=0.9994）线性关系良好,其回收率在92.81%～102.8%（n=6）之间。不同产地巴戟天药材含量测定结果显示,蔗糖、蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖、巴戟甲素的含量分别在 1.25%～6.07%、0.57%～6.06%、1.61%～6.82%、2.41%～7.71%、3.84%～10.10%之间。巴戟天低聚糖的提取工艺研究中各因素对出膏率、低聚糖、巴戟甲素及耐斯糖提取率的影响程度依次为:溶剂中乙醇体积分数>提取时间>液固比>提取次数。各因素对实验结果均无显着性影响。从工业生产提高生产效率的角度出发,优选出的最佳工艺条件为A2B1C2D2,即用15倍量的40%乙醇,提取2次,每次1 h。巴戟天低聚糖部位纯化后各指标成分含量均有显着提高,纯化工艺重现性良好。2巴戟天低聚糖的药代动力学研究巴戟甲素在大鼠体肠单向灌流研究结果表明巴戟甲素为全肠道吸收的药物,各肠段存在吸收差异,其吸收速率按十二指肠、空肠、回肠和结肠的顺序依次下降。十二指肠、空肠、回肠和结肠的药物累积吸收量随灌流液药物浓度的增加而近似线性地增加,但吸收速率常数基本不变,表明巴戟甲素在十二指肠、空肠、回肠和结肠的吸收以被动扩散方式为主,其吸收动力学符合一级过程。P-gp抑制剂对巴戟甲素肠吸收的影响考察结果表明P-gp对巴戟甲素有肠道外排作用,可减少其肠吸收,说明巴戟甲素可能是P-gp的底物。巴戟甲素酶水解研究确定了巴戟甲素为β-D-呋喃果糖苷酶的底物,其水解后得到的单一产物为β-D-呋喃果糖。初步得到该酶促反应的Michaelis-Menten方程为:rp=0.9565Cs/（12.8761+Cs）,其中Km=12.8761mg·mL-1,Vm=0.9565mg·mL-1·h-1。巴戟天提取物中5种低聚糖成分在大鼠全肠段的吸收速率（Ka）均无显着差异（P>0.05）,其药物累积吸收量随灌流液药物浓度的增加而近似线性地增加,说明药物不存在自身浓度抑制现象,提示巴戟天提取物中5种低聚糖成分的在体肠吸收机制均以被动扩散为主,其吸收动力学符合一级过程。提取物中各成分的吸收速率依次为:巴戟甲素≥蔗糖>蔗果三糖>耐斯糖>1F-果呋喃糖基耐斯糖。对不同肠段中各成分的吸收进行比较,总体方差分析结果显示各成分的吸收具有差异性（P<0.05）。P-gp抑制剂对巴戟天提取物肠吸收的影响考察结果显示盐酸维拉帕米可显着增加蔗糖与巴戟甲素的吸收量,这种促吸收效果是通过抑制P-gp的外排引起的,由此提示蔗糖与巴戟甲素可能是P-gp的底物。3巴戟天低聚糖对AD模型大鼠的影响灌胃给药28 d后,水迷宫实验结果显示AD模型组定位航行潜伏期明显长于空白组,而各给药组明显得到改善。空间探索实验结果显示各给药组在原平台象限游泳距离与总距离之比均有所上升而穿越原平台的次数也显着增加。脏器系数测量结果显示,模型组脑、脾、睾丸等脏器系数比正常对照组都降低,而给予BJ、BD、BT治疗后,BD、BT对各脏器系数均有增加的作用,BJ对脑、肝、睾丸等脏器系数有增加的作用。BJ与BD可以提高AD模型大鼠海马组织及皮质层中SOD、Na+/K+-ATP、GABA,降低MDA、TChE的活性,从而达到保护神经系统的作用。采用大鼠双侧海马区注射A β 25-35并联合长期腹腔注射D-半乳糖可致大鼠脑海马及皮质层的神经递质含量明显降低,而分别给予BJ、BD、BT治疗后,均可显着提高大鼠脑海马及皮质层中NE、DA、5-HT的含量,从而达到增强学习记忆能力的效果。同时还不同程度的提高DA/HVA、NE/E、5-HT/5-HIAA的比值,说明BJ、BD、BT可抑制相关的代谢路径。采用大鼠双侧海马区注射A β 25-35并联合长期腹腔注射D-半乳糖可致大鼠脑海马中APP、Tau、Caspase-3蛋白表达水平上升,SYP蛋白表达水平明显降低,而分别给予BJ、BD、BT治疗后,各蛋白表达水平异常的情况均有所缓解,说明巴戟天低聚糖类成分改善AD大鼠学习记忆障碍的作用机制,与上调SYP、降低APP、Tau、Caspase-3的表达有关。结论:1巴戟天低聚糖有效部位质控研究建立的巴戟天低聚糖有效成分含量测定方法简单、准确,具有良好的重复性,为有效评价巴戟天药材的质量提供了分析方法。根据中国药典规定并结合本研究结果,在此对巴戟天药材中低聚糖的含量限度提出初步的建议:按巴戟天药材干燥品计算,耐斯糖的含量不得少于2%,巴戟甲素的含量不得少于4%,蔗果三糖、耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖、巴戟甲素的总含量不得少于14%。优选出的巴戟天低聚糖提取工艺各指标性成分含量较高,工艺稳定、合理、可行,为工业化生产提供参考。巴戟天低聚糖部位纯化工艺的重现性良好,所制得的巴戟天低聚糖部位纯度高,已知成分含量大于50%,可用于开发国家规定的五类新药。2巴戟天低聚糖的药代动力学研究巴戟甲素在整个肠段吸收良好,属于高渗透性药物,在十二指肠、空肠、回肠和结肠的吸收机制以被动扩散方式为主。本研究将为巴戟甲素设计成口服缓控释制剂提供了生物学依据。β-D-呋喃果糖苷酶与巴戟甲素亲和力较强,葡萄糖对巴戟甲素的酶解具有一定的促进作用,提示机体内的葡萄糖对巴戟甲素的代谢也可能有一定的促进作用从而降低巴戟甲素的生物利用度。本研究将为巴戟甲素的药物代谢动力学研究及其新药的开发提供理论参考。巴戟天低聚糖在全肠段吸收中,其吸收速率依次为二糖>三糖>四糖>五糖,推测可能与各成分的分子大小有关。在本实验条件中,各成分在不同肠段中的Papp均大于0.072 cm·h-1,说明各低聚糖成分在整个肠段中吸收良好,属于高渗透性药物,主要与各成分均具有较强的亲水性从而易于在肠道中吸收扩散进入体内有关。3巴戟天低聚糖对AD模型大鼠的影响实验采用大鼠双侧海马区注射Aβ 25-35并联合长期腹腔注射D-半乳糖,诱发拟AD动物模型。从行为学、氧化应激、胆碱能系统、能量代谢、氨基酸、神经递质和蛋白表达水平等方面,观察了巴戟天低聚糖对AD模型大鼠的影响,实验结果显示巴戟天低聚糖可以改善AD大鼠学习记忆障碍,其作用机制与以下三方面有关:（1）提高SOD、Na+/K+-ATP、GABA,降低MDA、TChE的活性;（2）提高神经递质水平;（3）上调SYP,降低APP、Tau、Caspase-3等蛋白的表达水平。
胡海燕[7]（2012）在《β-淀粉样蛋白在阿尔茨海默病中的作用及中药多靶点对抗研究进展》文中认为阿尔茨海默病（Alzheimer,s disease,AD）是以认知功能障碍和记忆损害为主要临床特征的神经退行性疾病,其病理变化之一是患者脑内的神经炎性斑（老年斑）,主要成分为细胞外β-淀粉样蛋白（amyloid proteinβ,Aβ）的沉积,而Aβ又由淀粉样前体蛋白（amyloid precursor protein,APP）经序列水解而来。研究表明,Aβ可能是各种原因诱发AD的共同通路,是AD形成和发展的关键因素,因此本文以Aβ为靶标,对其产生、神经毒性及中药多靶点抗AD作用的研究进展进行综述。
聂慧[8]（2011）在《石菖蒲活性成分对APP/PS转基因小鼠学习记忆及Clusterin神经保护途径的影响》文中认为老年性痴呆即阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）,是一种常见的神经系统退行性疾病,是痴呆最常见的类型。随着世界人口的老龄化及人们生活方式的改变,AD的患病率越来越高,带来沉重的社会经济负担,AD的防治,已成为急待研究和解决的课题。中医学在痴呆的治疗方面有丰富的理论和许多有效方药,对临床效果明显的中药进行进一步的研究开发意义重大且有科学前景。石菖蒲是治疗痴呆最常用的中药之一,相关研究已从多种在体和体外模型验证了石菖蒲及其主要的活性成分B-细辛醚、丁香酚对AD的治疗作用,并初步探讨了其作用机理,但目前研究所采用的模型仅是模拟AD的主要症状—学习记忆障碍。APPswe/PS1dE9小鼠可表达突变的人类早老素（DeltaE9）和人鼠淀粉样蛋白前体蛋白（APPswe）融合体,该小鼠脑内淀粉样斑块从4月龄开始出现并随增龄而增加。在以B淀粉样蛋白（β-amyloid, Aβ）为基础的病理机制的研究以及AD治疗药物的开发等领域中具有重要应用价值。研究石菖蒲活性成分p-细辛醚、丁香酚对APPswe/PS1dE9小鼠学习记忆和Aβ的影响对于进一步证实其药效有重要价值。Aβ发生错误折叠、聚集并沉积于老年斑是AD的主要病理标志,而分子伴侣可调控蛋白质折叠,保护细胞免于蛋白质错误折叠和聚集所致的毒性损害。Clusterin,也称载脂蛋白J（apolipoprotein J）,是一种多功能的伴侣分子,能结合和稳定Aβ并通过低密度脂蛋白受体相关蛋白-1（Low-density lipoprotein receptor-related protein-1, LRP-1）及LRP-2/megalin介导Aβ内吞进入胶质细胞或通过血脑屏障清除；此外,还能掩蔽Aβ纤维使其免于宿主免疫防御的识别而阻止过度的炎症反应；通过TGFβ信号通路促进神经细胞存活,阻止Bax依赖的神经变性凋亡,等等。研究β-细辛醚、丁香酚对Clusterin神经保护途径的调控作用有益于进一步揭示其作用机制。目的研究石菖蒲活性成分β-细辛醚、丁香酚对APPswe/PS1dE9小鼠学习记忆和Aβ的影响以及对Clusterin神经保护途径的调控作用。证实β-细辛醚、丁香酚治疗AD的疗效并深入探讨其作用机制。3月龄SPF级雄性APPswe/PS1dE9双转基因小鼠42只,随机分为模型组、β-细辛醚治疗组、丁香酚治疗组、盐酸多奈哌齐（安理申）阳性药物对照组,每组13只。使用同龄同背景APPswe/PS1dE9转基因阴性鼠13只作为正常对照。β-细辛醚和丁香酚的给药剂量均为21.2mg/kg/d,安理申给药剂量为2mg/kg/d,模型组和转基因阴性对照组以蒸馏水灌胃,每日1次,给药共4个月。给药结束后,采用Morris水迷宫法检测空间学习记忆能力；采用刚果红染色法检测小鼠皮质和海马淀粉样斑块；采用Dot blot法检测脑组织Aβ寡聚体的表达,并采用两变量相关分析Aβ寡聚体表达与学习记忆成绩的关联性；采用Western blot法检测小鼠脑组织Clusterin的表达;采用免疫组织化学荧光双标染色法检测小鼠皮质及海马Clusterin与Aβ寡聚体的共定位及相互作用；采用免疫组织化学染色法检测小鼠皮质及海马LRP-1及LRP-2/megalin的表达。实验一：石菖蒲活性成分对APP/PS双转基因小鼠学习记忆的影响与正常组比较：模型组定位航行第3-5天的逃避潜伏期均明显延长（P<0.01）,第4-5天游泳路程明显增加（第4天,P<0.05；第5天P<0.01）,穿越平台次数明显减少（P<0.01）；与模型组比较：B细辛醚组第5天的逃避潜伏期明显缩短（P<0.05）,第5天游泳路程明显缩短（P<0.05）；丁香酚组在逃避潜伏期及游泳路程方面无显着变化,但有缩短的趋势；安理申组第5天游泳路程明显缩短（P<0.05）。实验二：石菖蒲活性成分对APP/PS双转基因小鼠脑内B淀粉样蛋白的影响（1）正常组小鼠海马及皮质均未见淀粉样斑块。APP/PS双转基因小鼠皮质、海马各部散见淀粉样斑块。与模型组相比较：B细辛醚组海马淀粉样斑块明显减少（P<0.05）；丁香酚组海马淀粉样斑块面积百分比显示出减少的趋势；安理申组海马及皮质的淀粉样斑块面积百分比均无明显变化（P>0.05）（2）Aβ寡聚体的表达与水迷宫逃避潜伏期存在一定的正相关关系（Pearson相关系数=0.343,P<0.05）,Aβ寡聚体的表达越强,小鼠的水迷宫逃避潜伏期越长,学习记忆能力越差。小鼠脑组织Aβ寡聚体表达水平组间差异无统计学意义（P>0.05）。但从趋势来看,模型组Aβ寡聚体蛋白表达水平较正常组增高,而B细辛醚组、丁香酚组、安理申组Aβ寡聚体蛋白表达水平较模型组均有所下降。实验三：石菖蒲活性成分对APP/PS双转基因小鼠Clusterin神经保护途径的影响（1） APPswe/PS1dE9双转基因小鼠海马及皮质广泛存在Clusterin与Aβ寡聚体的共表达,提示二者存在相互作用。小鼠脑组织Clusterin表达水平组间差异无统计学意义（P>0.05）。（2）正常组海马CA1区及皮质可见较多LRP-1染色阳性区域,以微血管的表达为主。模型组小鼠海马CA1区及皮质LRP-1表达均较正常组明显减少（P<0.05）。与模型组比较：β细辛醚组海马CA1区及皮质LRP-1表达均明显增加（P<0.01）；丁香酚组皮质LRP-1表达明显增加（P<0.01）,海马CA1区LRP-1表达有较模型组增加的趋势；阳性对照药物安理申海马CA1区及皮质LRP-1表达有增加的趋势,但差异均无统计学意义。（3）正常组即转基因阴性小鼠海马CA1区及皮质可见较多LRP-2/megalin表达；模型组即APPswe/PS1dE9双转基因小鼠皮质LRP-2/megalin表达较正常组明显减少（P<0.01）,海马CA1区LRP-2/megalin表达较正常组也有减少的趋势；与模型组相比：β细辛醚组皮质及海马LRP-2/megalin表达无明显变化;丁香酚组皮质LRP-2/megalin表达明显增加（P<0.01）,海马CA1区LRP-2/megalin表达也有增加趋势；阳性对照药物安理申组海马CA1区及皮质LRP-2/megalin表达无显着变化,海马CA1区LRP-2/megalin表达较模型组有增加的趋势。（1）β细辛醚可有效改善APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的学习记忆能力,减少APPswe/PS1dE9双转基因小鼠海马淀粉样斑块,上调APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑组织LRP-1的表达。（2）丁香酚可明显上调APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑组织LRP-1及LRP-2/megalin表达水平。（3）Aβ寡聚体与学习记忆能力呈负相关。APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑内Clusterin与Aβ寡聚体存在相互作用。（4）β细辛醚对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠脑组织Aβ寡聚体、Clusterin表达的干预作用,丁香酚对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠学习记忆、淀粉样斑块、Aβ寡聚体、Clusterin表达的影响需要进一步研究证实。
第五永长[9]（2011）在《银思维对拟SAD大鼠脑内tau磷酸化及其O-GlcNAc修饰的调节作用及相关研究》文中提出目的：基于胰岛素信号转导与散发性老年性痴呆（SAD）的关系及SAD发病的脑能量代谢障碍学说与tau蛋白异常修饰学说,以大鼠侧脑室注射链脲佐菌素（ICV-STZ）建立SAD动物模型,研究具有升发阳气,祛逐阴邪,健脾开郁化痰、平衡机体阴阳功效的中药复方银思维提取物对SAD模型大鼠的行为学、海马神经元超微结构、脑能量代谢及胆碱能系统相关酶的活性、脑组织tau蛋白磷酸化与O-G1cNAc糖基化修饰的影响及调节作用,探讨复方银思维防治SAD的可能作用机制。方法：将SPF级健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、多奈哌齐对照组、银思维小、中、大剂量组。除假手术组外,其余动物双侧侧脑室重复注射STZ造模,第二次造模后21天开始治疗。治疗组分别以盐酸多奈哌齐、银思维大、中、小不同剂量浓度灌胃,模型组及假手术组给予等体积的双蒸水,各组均每日1次,共灌胃2个月。治疗结束后,以MOrris水迷宫试验法测试大鼠的空间学习记忆能力,以透射电镜观察大鼠海马CA1区微管等超微结构的变化,以生化方法测定大鼠大脑皮层能量代谢与线粒体功能相关酶以及胆碱能系统酶的活性,以免疫组化及蛋白印迹方法检测大鼠脑组织tau蛋白O-G1cNAc糖基化修饰水平及重要位点Thr231、Ser422的磷酸化水平,同时检测O-G1cNAc糖基化修饰过程中OGT、O—G1cNAcase酶表达的变化。结果：1.ICV-STZ拟SAD模型大鼠与假手术组相比,在定向航行试验中的平均逃避潜伏期及总游泳距离显着延长（P<0.01）,空间探索试验中在目标象限的游泳时间明显缩短（P<0.01）。复方银思维能明显缩短SAD模型大鼠在定向航行试验中的平均逃避潜伏期及总游泳距离,组间比较差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）,且能延长SAD大鼠空间探索试验中在目标象限的游泳时间（P<0.05,P<0.01）。银思维小、中、大剂量组与多奈哌齐组组间比较无显着性差异（P>0.05）2.SAD模型组大鼠大脑皮层SDH、COX、Na+-K+-ATPase活性明显低于假手术组（P<0.01）,而复方银思维能显着提高SAD大鼠皮层SDH、COX、Na+-K+-ATPase的活性（P<0.05,P<0.01）,多奈哌齐对照组与SAD模型组相比则无显着性差异（P>0.05）3.SAD模型组大鼠大脑皮层ChAT活性明显低于假手术组（P<0.01）,而AchE活性高于假手术组（P<0.01）,复方银思维能够提高大鼠大脑皮层ChAT活性,同时使得AchE活性下降,组间差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）,多奈哌齐组与银思维小、中、大剂量组组间比较无显着性差异（P>0.05）4.SAD模型大鼠海马组织以sWGA富集的O-G1cNAc糖基化蛋白质明显低于假手术组（P<0.01）,且用RL2、CTD110.6抗体检测的O-G1cNAc糖基化tau蛋白表达明显低于假手术组（P<0.01）；而复方银思维能明显提高SAD大鼠海马组织以sWGA富集的O-G1cNAc糖基化蛋白质以及用RL2、CTD110.6检测的O-G1cNAc糖基化tau蛋白表达,组间差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。多奈哌齐对照组与SAD模型组相比则无显着性差异（P>0.05）。5.SAD模型大鼠海马组织OGT的表达明显低于假手术组（P<0.01）O-G1cNAcase表达明显高于假手术组（P<0.01）,而复方银思维能显着提高SAD大鼠海马OGT的表达,降低O-G1cNAcase的表达,组间差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。多奈哌齐对照组与SAD模型组相比无显着性差异（P>0.05）6.SAD模型大鼠海马组织tau蛋白在重要位点Thr231和Ser422的磷酸化P-Thr231、P-Ser422表达高于假手术组（P<0.01）,而复方银思维能减少SAD模型大鼠海马组织P-Thr231、P-Ser422的表达（P<0.05,P<0.01）。多奈哌齐对照组与SAD模型组相比则无显着性差异（P>0.05）结论：1. ICV-STZ模型大鼠存在脑皮层能量代谢与线粒体功能障碍,存在胆碱能系统紊乱,有明显的学习记忆障碍,有脑组织tau蛋白重要位点的异常磷酸化,且模型重复性好,稳定可靠,可以作为SAD模型。2.复方银思维能明显改善SAD大鼠的学习记忆能力,其作用机制可能是：能够保护微管结构和功能,改善皮层神经元线粒体功能及能量代谢,改善皮层胆碱能系统功能,调节海马组织tau蛋白O-G1cNAc糖基化修饰与tau磷酸化之间的平衡,抑制tau蛋白重要位点的过度磷酸化及其tau毒性,防止SAD的病理进展。
陈超[10]（2011）在《首乌益智胶囊对血管性认知障碍大鼠Notch信号通路相关基因及星形胶质细胞的作用研究》文中指出目的:血管性认知障碍（VCI）近年来发病率和死亡率逐渐攀升,已成为全社会重要的公共卫生问题。神经元与星形胶质细胞之间的相互作用,是缺血性脑损伤后神经元能否存活的关键因素。本研究以Notch信号通路和星形胶质细胞为切入点,通过首乌益智胶囊治疗前后细胞变化及基因表达水平的改变,探讨其作用机制。为首乌益智胶囊治疗VCI从细胞水平和基因调控方面提供实验数据和理论依据。方法:将SD大鼠通过线栓法制备大脑中动脉局灶脑缺血/再灌注VCI模型,经Morris水迷宫实验筛选出80只大鼠,随机分为假手术组、模型组、脑复康组、首乌益智胶囊组,每组20只。造模后药物干预4周。Morris水迷宫实验检测各组大鼠行为学改变;尼氏染色观察海马CA1区神经细胞形态学改变;透射电镜观察海马CA1区神经元超微结构病理学变化;免疫组织化学法检测海马CA1区GFAP、NGF的表达;实时荧光定量PCR检测Notch信号通路相关基因Notch1、PS1、Hes3、STAT3、GFAP、β-APP的表达。结果:水迷宫结果表明,首乌益智胶囊组大鼠的定位航行和空间探索实验测试成绩明显优于模型组和脑复康组（P<0.01）。与模型组和脑复康组比较,首乌益智胶囊组海马锥体细胞排列较整齐、密集,胞浆中Nissl体较丰富;电镜观察细胞器结构基本正常。首乌益智胶囊组海马CA1区GFAP、NGF的表达较模型组和脑复康组显着升高（P<0.01）。与模型组比较,首乌益智胶囊组大鼠脑组织Notch1、Hes3、Stat3基因的表达,显着升高（P<0.01）;与脑复康组比较,亦有明显升高（P<0.05）。首乌益智胶囊组GFAP基因的表达较模型组和脑复康组显着升高（P<0.01）。首乌益智胶囊组PS1基因的表达较模型组显着降低（P<0.01）,较脑复康组亦有明显降低（P<0.05）。首乌益智胶囊组β-APP基因的表达较模型组明显降低（P <0.05）;较脑复康组降低,无统计学意义（P >0.05）。结论:1.首乌益智胶囊能保护神经元,减轻脑缺血对神经元的损伤,维持神经细胞结构与功能的完整。2.首乌益智胶囊能提高Notch信号通路Notch1、Stat3、Hes3、GFAP基因的表达,促进神经干细胞向星形胶质细胞分化、增殖;促进神经生长因子（NGF）的合成与分泌,对受损神经元产生保护、营养、修复和再生作用。3.首乌益智胶囊能降低PS1、β-APP基因的表达,使Aβ生成减少,减轻Aβ神经毒性,改善学习记忆能力。4.首乌益智胶囊能显着提高VCI大鼠的学习和记忆能力,是治疗VCI的有效方药,整体疗效优于脑复康。
二、红花黄酮对孵育海马脑片分泌型淀粉样前体蛋白释放的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、红花黄酮对孵育海马脑片分泌型淀粉样前体蛋白释放的影响（论文提纲范文）
（1）杜仲水提物对脂多糖诱导的小鼠神经炎症的保护作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要符号对照表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 神经炎症 |
| 1.2 神经炎症与神经退行性疾病 |
| 1.2.1 神经炎症与阿尔茨海默症 |
| 1.2.2 神经炎症与帕金森氏症 |
| 1.2.3 神经炎症与多发性硬化症 |
| 1.2.4 神经炎症与肌萎缩侧索硬化症 |
| 1.3 脂多糖 |
| 1.4 脂多糖诱导的实验动物模型 |
| 1.5 炎症参与的信号通路 |
| 1.5.1 NFκB介导的炎症信号通路 |
| 1.5.2 MAPK介导的炎症信号通路 |
| 1.5.3 PI3K/AKT/m TOR介导的炎症信号通路 |
| 1.5.4 ROS介导的炎症信号通路 |
| 1.5.5 NO介导的炎症信号通路 |
| 1.5.6 COX介导的炎症信号通路 |
| 1.6 杜仲的研究进展 |
| 1.6.1 杜仲概述 |
| 1.6.2 杜仲的主要化学成分 |
| 1.6.3 杜仲的主要药理作用 |
| 1.7 研究意义与内容 |
| 1.7.1 研究意义 |
| 1.7.2 研究内容 |
| 1.7.3 技术路线 |
| 第二章 杜仲水提物对LPS诱导的小鼠认知功能障碍及抑郁样行为的抑制作用 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.1.4 杜仲水提物的制备 |
| 2.1.5 分析条件 |
| 2.1.6 模型建立及分组 |
| 2.1.7 行为学检测 |
| 2.1.8 组织取材与固定 |
| 2.1.9 石蜡切片制作 |
| 2.1.10 尼氏染色 |
| 2.1.11 高尔基染色 |
| 2.1.12 免疫荧光染色 |
| 2.1.13 蛋白提取 |
| 2.1.14 脑组织中氧化指标的检测 |
| 2.1.15 蛋白免疫印迹 |
| 2.1.16 数据统计与分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 杜仲水提物成分的测定 |
| 2.2.2 杜仲水提物对LPS诱导的小鼠生存率与体重的影响 |
| 2.2.3 杜仲水提物对LPS诱导的小鼠各组织重量的影响 |
| 2.2.4 杜仲水提物对LPS诱导的小鼠脑组织氧化损伤的保护作用 |
| 2.2.5 杜仲水提物对LPS所致神经元损伤的保护作用 |
| 2.2.6 杜仲水提物对LPS诱导小鼠的认知功能障碍的保护作用 |
| 2.2.7 杜仲水提物改善LPS诱导的小鼠抑郁样行为 |
| 2.2.8 杜仲水提物对LPS诱导的小鼠海马中不同形态小棘比例的影响 |
| 2.2.9 杜仲水提物对LPS诱导小鼠海马中学习记忆相关蛋白的影响 |
| 2.2.10 杜仲水提物增加LPS诱导的小鼠海马TH、TPH2 蛋白水平 |
| 2.2.11 杜仲水提物对LPS诱导小鼠的海马中间神经元数量的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 杜仲水提物对LPS诱导的小鼠海马成体神经发生的保护作用 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 主要试剂 |
| 3.1.2 主要仪器 |
| 3.1.3 试验动物及分组 |
| 3.1.4 Brd U标记 |
| 3.1.5 取材与切片 |
| 3.1.6 免疫荧光染色 |
| 3.1.7 RNA提取 |
| 3.1.8 反转录 |
| 3.1.9 q PCR |
| 3.1.10 蛋白免疫印迹 |
| 3.1.11 小胶质细胞形态分析 |
| 3.1.12 数据统计与分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 杜仲水提物抑制LPS诱导的小鼠海马新生神经元数量减少 |
| 3.2.2 杜仲水提物抑制LPS诱导的海马中神经营养因子的水平下降 |
| 3.2.3 杜仲水提物抑制LPS诱导的海马齿状回新生GCs的数量的减少 |
| 3.2.4 杜仲水提物对LPS诱导的神经祖细胞向星形胶质细胞分化及分裂方式的影响 |
| 3.2.5 杜仲水提物抑制LPS诱导的神经祖细胞向小胶质细胞分化 |
| 3.2.6 杜仲水提物对LPS诱导的小胶质细胞形态的影响 |
| 3.2.7 杜仲水提物对LPS诱导的小胶质细胞形态分型的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 杜仲水提物对LPS诱导的小鼠神经炎症的保护作用与分子机制研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 主要试剂及仪器 |
| 4.1.2 动物分组与给药 |
| 4.1.3 取材与切片 |
| 4.1.4 免疫荧光染色 |
| 4.1.5 蛋白免疫印迹 |
| 4.1.6 q PCR |
| 4.1.7 数据统计与分析 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 杜仲水提物抑制LPS诱导小鼠的海马中c-Fos~+细胞的表达 |
| 4.2.2 杜仲水提物对LPS诱导小鼠海马星形胶质细胞的数量的影响 |
| 4.2.3 杜仲水提物对LPS诱导小鼠海马小胶质细胞数量的影响 |
| 4.2.4 杜仲水提物抑制LPS诱导小鼠海马炎症因子的表达 |
| 4.2.5 杜仲水提物对LPS诱导的TLR4 信号通路的影响 |
| 4.2.6 杜仲水提物对小鼠皮层NFκB和 MAPK介导的信号通路的影响 |
| 4.2.7 杜仲水提物对小鼠海马NFκB与 MAPK介导的信号通路的影响 |
| 4.2.8 杜仲水提物抑制LPS诱导小鼠海马内质网应激 |
| 4.2.9 杜仲水提物抑制LPS诱导的小鼠海马的细胞凋亡 |
| 4.2.10 杜仲水提物抑制LPS诱导小鼠大脑皮层中胶质细胞的增殖 |
| 4.2.11 杜仲水提物抑制LPS诱导小鼠大脑皮层炎症因子的表达水平 |
| 4.2.12 杜仲水提物抑制LPS诱导的小鼠大脑皮层的细胞凋亡 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 杜仲水提物对LPS诱导神经炎症模型小鼠的肠道菌群结构的调节作用 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 主要试剂 |
| 5.1.2 主要仪器 |
| 5.1.3 动物分组与给药 |
| 5.1.4 粪便样品采集 |
| 5.1.5 免疫荧光染色 |
| 5.1.6 蛋白免疫印迹 |
| 5.1.7 q PCR |
| 5.1.8 CTAB法提取肠道微生物DNA |
| 5.1.9 细菌16S r RNA基因片段扩增 |
| 5.1.10 PCR产物的定量与纯化 |
| 5.1.11 文库构建与测序 |
| 5.1.12 生物信息学分析 |
| 5.1.13 数据统计与分析 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 杜仲水提物对小鼠结肠细胞增殖的影响 |
| 5.2.2 杜仲水提物增加小鼠结肠中紧密连接蛋白的表达 |
| 5.2.3 杜仲水提物抑制LPS诱导的小鼠结肠中细胞因子的表达水平 |
| 5.2.4 杜仲水提物对肠道菌群结构的α多样性的影响 |
| 5.2.5 杜仲水提物对小鼠肠道菌群的组间物种组成的影响 |
| 5.2.6 杜仲水提物对小鼠肠道菌群菌门组成的影响 |
| 5.2.7 杜仲水提物对小鼠肠道菌群组间的多样性的影响 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 杜仲水提物对LPS诱导炎症的体外作用研究 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 主要试剂 |
| 6.1.2 主要仪器 |
| 6.1.3 BV2 细胞的培养 |
| 6.1.4 细胞分组与给药 |
| 6.1.5 MTT法测定细胞增殖抑制率 |
| 6.1.6 流式细胞术检测BV2 细胞凋亡率 |
| 6.1.7 ROS含量测定 |
| 6.1.8 细胞蛋白样品的制备 |
| 6.1.9 数据统计与分析 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 杜仲水提物对LPS诱导BV2 细胞存活率的影响 |
| 6.2.2 杜仲水提物抑制LPS诱导的BV2 细胞形态的变化 |
| 6.2.3 杜仲水提物抑制LPS诱导的BV2 细胞内ROS的生成 |
| 6.2.4 杜仲水提物抑制LPS诱导的BV2 细胞的凋亡 |
| 6.2.5 杜仲水提物对BV2 细胞中炎症因子的表达作用的影响 |
| 6.2.6 杜仲水提物抑制LPS激活的NFκB/MAPK炎症通路 |
| 6.3 讨论 |
| 6.4 小结 |
| 第七章 结论、创新点与展望 |
| 7.1 主要结论 |
| 7.2 创新点 |
| 7.3 研究展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（2）骨碎补提取物对两种记忆障碍模型小鼠和Aβ损伤PC12细胞的保护作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 阿尔茨海默症概述 |
| 1.2 AD的发病机制研究 |
| 1.2.1 β级联假说 |
| 1.2.2 胆碱能损伤假说 |
| 1.2.3 Tau蛋白过度磷酸化假说 |
| 1.2.4 谷氨酸受体学说 |
| 1.2.5 氧化应激假说 |
| 1.2.6 凋亡因子与AD |
| 1.2.7 P38信号通路与AD |
| 1.2.8 雌激素与AD |
| 1.3 中药植物雌激素防治AD的研究进展 |
| 1.3.1 植物雌激素对AD的作用 |
| 1.3.2 补肾中药骨碎补对AD的作用 |
| 1.4 AD实验研究进展 |
| 1.4.1 AD动物模型的建立与评价 |
| 1.4.2 行为学实验选择与评价 |
| 1.5 立题依据 |
| 第2章 骨碎补提取物对两种记忆障碍模型小鼠的神经保护 |
| 2.1 仪器、试剂和材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 主要实验用品及试剂 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 实验分组及给药 |
| 2.2.2 行为学实验 |
| 2.2.3 病理组织学观察 |
| 2.2.4 Western blot |
| 2.2.5 试剂盒检测 |
| 2.2.6 数据处理 |
| 2.3 实验结果与讨论 |
| 2.3.1 骨碎补提取物对亚硝酸钠模型小鼠实验结果 |
| 2.3.2 骨碎补提取物对东莨菪碱模型小鼠的实验结果 |
| 2.4 讨论 |
| 第3章 紫云英苷和圣草酚对Aβ损伤PC12细胞的机制研究 |
| 3.1 实验材料和仪器 |
| 3.1.1 细胞来源 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要仪器 |
| 3.1.4 试剂及药品的配制 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 PC12细胞复苏、培养、传代及冻存 |
| 3.2.2 实验分组及给药 |
| 3.2.3 MTT |
| 3.2.4 Western blot |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 紫云英苷对Aβ25-35损伤PC12细胞的影响 |
| 3.3.2 圣草酚对Aβ25-35损伤PC12细胞的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 综合结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 英文缩写 |
| 攻读学位期间发表的学术成果 |
（3）漆树黄酮对脂多糖诱导的阿尔茨海默病模型大鼠认知损害的影响及其作用机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 引言 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验动物分组 |
| 2.3 药品 |
| 2.4 主要试剂 |
| 2.5 主要仪器 |
| 2.6 Aβ42 ELISA检测 |
| 2.7 行为学实验 |
| 2.7.1 旷场实验 |
| 2.7.2 高架十字迷宫实验 |
| 2.7.3 Morris 水迷宫实验 |
| 2.7.4 条件恐惧实验 |
| 2.8 海马脑片的制备与电生理记录 |
| 2.8.1 海马脑片的制备 |
| 2.8.2 场电位的记录 |
| 2.9 Western blotting |
| 2.9.1 蛋白质样品的制备 |
| 2.9.2 BCA法蛋白浓度定量 |
| 2.9.3 Western blotting溶液及电泳胶配制 |
| 2.9.4 蛋白上样 |
| 2.9.5 蛋白的电泳分离及转膜 |
| 2.9.6 免疫印迹显色 |
| 2.10 统计分析 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 Fisetin处理降低LPS诱导的AD模型大鼠海马组织Aβ沉积 |
| 3.2 实验大鼠的自发活动及焦虑状态无统计学差异 |
| 3.3 Fisetin处理改善LPS诱导的AD模型大鼠空间学习记忆能力 |
| 3.4 Fisetin处理改善LPS诱导的AD模型大鼠恐惧记忆能力 |
| 3.5 Fisetin处理逆转LPS诱导的AD模型大鼠海马脑区LTP损伤 |
| 3.6 Fisetin处理逆转LPS诱导的AD模型大鼠海马学习记忆蛋白表达 |
| 第4章 讨论 |
| 第5章 结论 |
| 第6章 研究局限与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（4）连翘酯苷A抗AD模型炎症及凋亡的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 综述 |
| 1.1 阿尔茨海默症(AD)的概述及其致病机理 |
| 1.2 AD症治疗药物及其研究进展 |
| 1.3 连翘及连翘酯苷A的生物活性及研究现状 |
| 1.3.1 连翘概述 |
| 1.3.2 连翘酯苷A的药理作用及研究进展 |
| 1.4 内源性大麻素系统 |
| 1.4.1 内源性大麻素系统简介 |
| 1.4.2 内源性大麻素系统在老年性痴呆中的作用 |
| 1.5 炎症和凋亡在AD症中发挥的作用 |
| 1.6 本课题的研究目的及研究内容 |
| 1.6.1 研究目的 |
| 1.6.2 研究内容 |
| 第二章 连翘酯苷A对Aβ_(25-35)聚集体诱导海马脑片损伤的改善作用研究 |
| 引言 |
| 2.1 仪器与试剂 |
| 2.1.1 实验仪器 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.2 溶液的配制 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 海马脑片的制备 |
| 2.3.2 海马脑片的培养及给药方法 |
| 2.3.3 ThT法检测Aβ_(25-35)聚集程度 |
| 2.3.4 乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测脑片活力 |
| 2.3.5 Elisa法检测NO释放量 |
| 2.3.6 统计学分析 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 Aβ_(25-35)聚集体孵育时间的确定 |
| 2.4.2 不同浓度Aβ_(25-35)聚集体对海马脑片NO释放量的影响 |
| 2.4.3 Aβ_(25-35)单体和Aβ_(25-35)聚集体对海马脑片乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测脑片活力 |
| 2.4.4 不同浓度连翘酯苷A对海马脑片活力的影响 |
| 2.4.5 连翘酯苷A对Aβ_(25-35)聚集体诱导的海马脑片损伤的改善作用 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 连翘酯苷A对Aβ_(25-35)诱导海马脑片神经炎症及凋亡的改善作用及机制研究 |
| 引言 |
| 3.1 实验仪器与试剂 |
| 3.1.1 实验试剂 |
| 3.1.2 实验仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 海马脑片给药方法 |
| 3.2.2 Elisa试剂盒检测 |
| 3.2.3 Westernblot(蛋白免疫印迹) |
| 3.2.4 神经递质含量的测定 |
| 3.2.5 电生理记录 |
| 3.2.6 UPLC-MS测2-AG的含量 |
| 3.2.7 连翘酯苷A对环氧合酶的抑制作用 |
| 3.2.8 分子对接 |
| 3.2.9 统计学分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 连翘酯苷A上调内源性2-AG信号 |
| 3.3.2 连翘酯苷A抑制Aβ_(25-35)诱导的COX-2蛋白表达 |
| 3.3.3 连翘酯苷A抑制COX-2活性 |
| 3.3.4 连翘酯苷A与COX-2的分子对接 |
| 3.3.5 连翘酯苷A抑制Aβ_(25-35)诱导的MAGL蛋白表达 |
| 3.3.6 连翘酯苷A通过CB1受体抑制Aβ_(25-35)诱导的炎症因子的释放 |
| 3.3.7 连翘酯苷A通过CB1受体抑制Aβ_(25-35)诱导的Activecaspase-3蛋白表达量 |
| 3.3.8 连翘酯苷A通过CB1受体抑制Aβ_(25-35)诱导的Bax/Bcl-2蛋白表达.. |
| 3.3.9 连翘酯苷A通过CB1受体依赖的NF-κB信号通路改善Aβ_(25-35)诱导的神经炎症及凋亡 |
| 3.3.10 外源性2-AG抑制Aβ_(25-35)诱导的TNF-α蛋白表达 |
| 3.3.11 连翘酯苷A改善Aβ_(25-35)诱导的小鼠学习记忆障碍 |
| 3.3.12 连翘酯苷A影响Aβ_(25-35)引起的神经递质变化 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 连翘叶粗提物和连翘酯苷A对LPS诱导海马脑片损伤的改善作用研究 |
| 引言 |
| 4.1 仪器与试剂 |
| 4.1.1 试剂材料 |
| 4.1.2 实验仪器 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 溶液的配制 |
| 4.2.2 海马脑片给药方法 |
| 4.2.3 连翘叶提取及液相分析 |
| 4.2.4 乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测脑片活力 |
| 4.2.5 Elisa试剂盒检测NO、TNF-α、IL-1β水平 |
| 4.2.6 Westernblot法检测Caspase-3及Activecaspase-3蛋白表达量 |
| 4.2.7 统计学分析 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 不同浓度连翘叶提取物的液相分析 |
| 4.3.2 不同浓度60%醇提物抑制LPS诱导小鼠海马脑片损伤LDH漏出量. |
| 4.3.3 不同浓度60%醇提物抑制LPS诱导小鼠海马脑片炎症因子释放 |
| 4.3.4 不同浓度60%醇提物影响LPS诱导小鼠海马脑片caspase-3和activecaspase-3蛋白表达 |
| 4.3.5 不同浓度连翘酯苷A抑制LPS诱导小鼠海马脑片损伤LDH漏出量 |
| 4.3.6 不同浓度连翘酯苷A抑制LPS诱导小鼠海马脑片炎症因子释放 |
| 4.3.7 不同浓度连翘酯苷A影响LPS诱导小鼠海马脑片caspase-3和activecaspase-3蛋白表达 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 总结与展望 |
| 5.1 总结 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简况及联系方式 |
（5）阿尔兹海默病β淀粉样蛋白形成和沉积的发病机制及中医药干预的可能途径（论文提纲范文）
| 1 Aβ的生成、沉积 |
| 2 Aβ的清除 |
| 3 中药干预的可能途径 |
| 3.1 减少Aβ的生成、聚集 |
| 3.2 促进Aβ的清除 |
| 4 讨论 |
| 4.1 整理AD相关的中医文献 |
| 4.2 探讨具有独创性研究思路 |
| 4.3 开展方药配伍机制研究 |
| 4.4 提高临床研究质量 |
（6）巴戟天低聚糖益脑作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 文献研究部分 |
| 第一章 巴戟天研究进展 |
| 第一节 巴戟天药材研究进展 |
| 第二节 巴戟天低聚糖研究进展 |
| 第三节 巴戟甲素研究进展 |
| 第二章 神经退行性疾病研究现状 |
| 第一节 神经退行性疾病发病机制研究进展 |
| 第二节 阿尔茨海默病研究进展 |
| 第三节 AD动物模型研究进展 |
| 第三章 研究思路与评价 |
| 实验研究部分 |
| 第一章 巴戟天低聚糖有效部位质控研究 |
| 第一节 巴戟天低聚糖类有效成份含量测定研究 |
| 第二节 巴戟天低聚糖提取工艺研究 |
| 第三节 巴戟天低聚糖部位纯化工艺研究 |
| 第二章 巴戟天低聚糖药代动力学初步研究 |
| 第一节 巴戟甲素单向灌流在体肠实验研究 |
| 第二节 巴戟甲素酶水解动力学研究 |
| 第三节 巴戟天低聚糖在体肠吸收机制研究 |
| 第四节 巴戟天低聚糖对大鼠肝脏中CYP3A4的影响 |
| 第三章 巴戟天低聚糖对AD模型大鼠的影响 |
| 第一节 对AD模型大鼠空间学习记忆及相关脏器的影响 |
| 第二节 对AD模型大鼠氧化应激、胆碱能、氨基酸类递质以及其它指标的影响 |
| 第三节 对AD模型大鼠脑组织单胺类神经递质及其相关代谢产物的影响 |
| 第四节 对AD模型大鼠海马脑组织中相关蛋白表达的影响 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读研究生期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 统计学证明 |
（7）β-淀粉样蛋白在阿尔茨海默病中的作用及中药多靶点对抗研究进展（论文提纲范文）
| 1 Aβ的级联假说 |
| 1.1 Aβ的结构 |
| 1.2 Aβ的产生 |
| 1.3 Aβ的降解 |
| 2 Aβ的神经毒性 |
| 2.1 对神经元凋亡的影响 |
| 2.2 对胆碱能神经系统的影响 |
| 2.3 对氧化应激与自由基的影响 |
| 2.4 对细胞内钙稳态性的影响 |
| 2.5 对炎症免疫的影响 |
| 3 中药多靶点对抗Aβ的作用 |
| 3.1 对Aβ生成的影响 |
| 3.1.1 抑制APP的过度生成 |
| 3.1.2 调节APP的裂解 |
| 3.1.3 抑制Aβ的聚集 |
| 3.2 对Aβ清除的影响 |
| 3.3 对Aβ毒性的影响 |
| 3.3.1 对神经元凋亡的影响 |
| 3.3.2 对胆碱能系统和神经递质受体的影响 |
| 3.3.3 抗氧化、清除自由基 |
| 3.3.4 调节钙稳态失衡 |
| 3.3.5 对神经元再生的影响 |
| 4 结语 |
（8）石菖蒲活性成分对APP/PS转基因小鼠学习记忆及Clusterin神经保护途径的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 Abstract 引言 第一部分 文献研究 |
| 1 老年性痴呆的危害和药物治疗概况 |
| 2 中医学对老年性痴呆的认识 |
| 2.1 古代文献对老年性痴呆病名及症状的描述 |
| 2.2 中医学对老年性痴呆病因病机及治则治法的认识 |
| 3 中药活性成分治疗老年性痴呆的实验研究近况 |
| 3.1 二苯乙烯苷 |
| 3.2 人参皂苷 |
| 3.3 三七总皂苷 |
| 3.4 知母总皂苷 |
| 3.5 葛根素 |
| 3.6 丹参酮 |
| 3.7 姜黄素 |
| 3.8 其它 |
| 4 石菖蒲及其活性成分治疗老年性痴呆的实验研究概况 第二部分 实验研究 |
| 实验一:石菖蒲活性成分对APP/PS双转基因小鼠学习记忆的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物的分组和给药 |
| 1.1.1 动物分组 |
| 1.1.2 实验药品制备 |
| 1.1.3 给药方案 |
| 1.2 学习记忆能力测试 |
| 1.2.1 设备及软件 |
| 1.2.2 测试方案 |
| 1.2.3 实验条件及人员操作的控制 |
| 1.3 数据处理与统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 定位航行测试 |
| 2.2 空间探索测试 |
| 3 讨论 |
| 3.1 APP/PS双转基因小鼠学习记忆能力的改变 |
| 3.2 盐酸多奈哌齐对转基因AD模型小鼠学习记忆能力的影响 |
| 3.3 β-细辛醚、丁香酚给药剂量的选择 |
| 3.4 对本实验结果的讨论 |
| 实验二:石菖蒲活性成分对APP/PS双转基因小鼠β淀粉样蛋白的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物的分组和给药 |
| 1.2 取材及标本保存 |
| 1.3 刚果红染色法检测小鼠脑组织切片皮质和海马的淀粉样斑块 |
| 1.3.1 检验原理及检验结果的解释 |
| 1.3.2 仪器和试剂 |
| 1.3.3 检测方法 |
| 1.3.4 结果观察和计算 |
| 1.4 Dot blot法检测小鼠脑组织中A B寡聚体的蛋白表达 |
| 1.4.1 试剂和仪器 |
| 1.4.2 小鼠脑组织总蛋白的提取 |
| 1.4.3 大小鼠脑组织总蛋白浓度测定 |
| 1.4.4 Dot blot检测 |
| 1.5 数据处理与统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 石菖蒲活性成分对APP/PS双转基因小鼠海马及皮质淀粉样斑块的影响 |
| 2.2 β淀粉样蛋白寡聚体表达与学习记忆的相关性 |
| 2.3 石菖蒲活性成分对APP/PS双转基因小鼠脑组织Aβ寡聚体的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 APP/PS双转基因小鼠β淀粉样蛋白病理改变 |
| 3.2 盐酸多奈哌齐对转基因AD模型小鼠淀粉样蛋白病理的影响 |
| 3.3 β淀粉样蛋白神经毒性的研究进展 |
| 3.4 对本实验结果的讨论 |
| 实验三:石菖蒲活性成分对APP/PS双转基因小鼠clusterin神经保护途径的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物的分组和给药 |
| 1.2 取材及标本保存 |
| 1.3 免疫荧光双标法检测小鼠海马及皮质clusterin和Aβ寡聚体的共定位 |
| 1.3.1 试剂与仪器 |
| 1.3.2 免疫荧光双标检测 |
| 1.3.3 结果观察 |
| 1.4 Western blot法检测小鼠脑组织clusterin的表达 |
| 1.4.1 主要试剂与仪器 |
| 1.4.2 小鼠脑组织总蛋白的提取 |
| 1.4.3 小鼠脑组织总蛋白浓度测定 |
| 1.4.4 蛋白样品SDS-PAGE电泳、转膜及蛋白印迹 |
| 1.4.5 结果观察和计算 |
| 1.5 免疫组织化学染色法检测小鼠海马及皮质LRP-1、megalin的表达 |
| 1.5.1 试剂与仪器 |
| 1.5.2 LRP-1的免疫组织化学检测 |
| 1.5.3 Megalin的免疫组织化学检测 |
| 1.5.4 结果观察 |
| 1.6 数据处理与统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 APP/PS双转基因小鼠海马及皮质clusterin与Aβ寡聚体的共表达 |
| 2.2 石菖蒲活性成分对APP/PS双转基因小鼠脑组织clusterin表达的影响 |
| 2.3 石菖蒲活性成分对APP/PS双转基因小鼠海马及皮质LRP-1表达的影响 |
| 2.4 石菖蒲活性成分对APP/PS双转基因小鼠海马及皮质megalin表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 Clusterin的神经保护途径 |
| 3.1.1 β淀粉样蛋白错误折叠与老年性痴呆 |
| 3.1.2 多功能的分子伴侣—clusterin |
| 3.1.3 Clusterin在AD病变中的表达 |
| 3.1.4 Clusterin与β淀粉样蛋白的聚集 |
| 3.1.5 Clusterin与β淀粉样蛋白的清除 |
| 3.1.6 Clusterin与神经炎症 |
| 3.1.7 Clusterin与神经细胞增殖、凋亡 |
| 3.1.8 Clusterin神经保护作用小结 |
| 3.2 对本实验结果的讨论 结语 参考文献 附录 研究生在学期间发表论文情况 致谢 |
（9）银思维对拟SAD大鼠脑内tau磷酸化及其O-GlcNAc修饰的调节作用及相关研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 引言 |
| 第一部分 文献回顾与理论研究 |
| 1 AD的中医研究 |
| 1.1 病名源流 |
| 1.2 病因病机认识 |
| 1.3 治疗方药分析 |
| 1.4 现代观点与研究现状 |
| 1.5 问题与对策 |
| 参考文献 |
| 2 AD的现代研究 |
| 2.1 危险因素的多样性与综合性 |
| 2.2 发病机制的复杂性与综合性 |
| 2.3 神经病理特征研究 |
| 2.4 药物治疗现状及针对tau治疗的展望 |
| 2.5 关于模型复制 |
| 2.6 困惑与出路 |
| 3 银思维复方的来源、组方依据及本课题设想 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 银思维对拟SAD模型大鼠空间学习记忆能力、海马神经元超微结构的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 实验二 银思维对拟SAD模型大鼠脑皮层能量代谢与线粒体功能相关酶及胆碱能系统的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 实验三 银思维对拟SAD模型大鼠海马tau蛋白0-GlcNAc糖基化修饰及其主要酶类的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 实验四 银思维对拟SAD模型大鼠海马tau蛋白磷酸化水平的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 创新点与展望 |
| 综述一 |
| 参考文献 |
| 综述二 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人工作简历 |
（10）首乌益智胶囊对血管性认知障碍大鼠Notch信号通路相关基因及星形胶质细胞的作用研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 实验研究 |
| 一、实验材料 |
| （一） 实验动物 |
| （二） 实验药物 |
| （三） 实验试剂 |
| （四） 实验仪器与器械材料 |
| 二、实验方法 |
| （一） 血管性认知障碍动物模型造模方法 |
| （二） 动物分组与给药方法 |
| （三） Morris 水迷宫测试 |
| （四） 脑组织取材 |
| （五） 形态学、免疫组织化学及实时荧光定量PCR 检测方法 |
| （六） 统计学处理 |
| 三、实验结果 |
| （一） 大鼠行为学测定结果 |
| （二） 大鼠海马CA1 区组织形态学观察结果 |
| （三） 免疫组织化学结果 |
| （四） 脑组织海马区基因检测结果 |
| 讨论 |
| 一、中医学对血管性认知障碍的认识 |
| （一） 中医学对本病的病名认识 |
| （二） 中医学对本病的病位、病因病机认识 |
| 二、血管性认知障碍肾虚血瘀证的病机与治法探析 |
| （一） 病位在脑，与五脏相关 |
| （二） 肾精亏虚、瘀阻脑窍是血管性认知障碍的基本病机 |
| （三） 补肾填精，化瘀通窍是血管性认知障碍的基本治法 |
| 三、Notch 信号通路与血管性认知障碍相关基因 |
| （一） Notch 信号通路的结构 |
| （二） Notch 信号通路的激活途径 |
| （三） Notch 信号通路的功能 |
| （四） Notch 信号通路与血管性认知障碍的关系 |
| （五） 本研究中Notch 信号通路与血管性认知障碍相关基因理论探讨 |
| 四、Notch 信号通路与星形胶质细胞的关系 |
| （一） Notch1 介导的神经干细胞向星形胶质细胞分化的调控 |
| （二） Notch 信号通路激活Stat3 促进神经干细胞向星形胶质细胞分化的调控 |
| 五、血管性认知障碍模型的选择 |
| （一） 实验动物 |
| （二） 几种VCI 模型造模方法比较 |
| （三） 大脑中动脉栓塞(MCAO)再灌注模型的优缺点 |
| 六、首乌益智胶囊组方配伍与现代药理研究 |
| （一） 药物组成及功效 |
| （二） 方义分析 |
| （三） 现代药理研究 |
| 七、首乌益智胶囊作用机理探讨 |
| （一） 首乌益智胶囊对VCI 模型大鼠学习记忆能力有明显的改善作用 |
| （二） 首乌益智胶囊对VCI 大鼠海马CA1 区神经元有明显的保护、修复和再生作用 |
| （三） 首乌益智胶囊可明显促进VCI 大鼠海马CA1 区星形胶质细胞的分化和增殖 |
| （四） 首乌益智胶囊可明显促进VCI 大鼠海马CA1 区神经生长因子的生成 |
| （五） 首乌益智胶囊能调控VCI 大鼠Notch 信号通路相关基因的表达 |
| 八、结论 |
| 九、本研究的创新点 |
| 十、本研究的不足及研究展望 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述 1 血管性认知障碍的关联基因研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述 2 星形胶质细胞对神经元作用探讨 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 查新报告 |
| 详细摘要 |
四、红花黄酮对孵育海马脑片分泌型淀粉样前体蛋白释放的影响（论文参考文献）
- [1]杜仲水提物对脂多糖诱导的小鼠神经炎症的保护作用及其机制研究[D]. 吴永继. 西北农林科技大学, 2021(01)
- [2]骨碎补提取物对两种记忆障碍模型小鼠和Aβ损伤PC12细胞的保护作用研究[D]. 崔悦. 佳木斯大学, 2019(01)
- [3]漆树黄酮对脂多糖诱导的阿尔茨海默病模型大鼠认知损害的影响及其作用机制的研究[D]. 罗拯. 南昌大学, 2019(01)
- [4]连翘酯苷A抗AD模型炎症及凋亡的机制研究[D]. 陈丽青. 山西大学, 2018(04)
- [5]阿尔兹海默病β淀粉样蛋白形成和沉积的发病机制及中医药干预的可能途径[J]. 闫蓉,常翔,杨从,苏如玉,侯雪芹,张磊,张春霞,方淑环,陈云波,王奇. 中药新药与临床药理, 2013(06)
- [6]巴戟天低聚糖益脑作用机制研究[D]. 邓少东. 广州中医药大学, 2013(05)
- [7]β-淀粉样蛋白在阿尔茨海默病中的作用及中药多靶点对抗研究进展[J]. 胡海燕. 中华中医药学刊, 2012(03)
- [8]石菖蒲活性成分对APP/PS转基因小鼠学习记忆及Clusterin神经保护途径的影响[D]. 聂慧. 广州中医药大学, 2011(05)
- [9]银思维对拟SAD大鼠脑内tau磷酸化及其O-GlcNAc修饰的调节作用及相关研究[D]. 第五永长. 北京中医药大学, 2011(09)
- [10]首乌益智胶囊对血管性认知障碍大鼠Notch信号通路相关基因及星形胶质细胞的作用研究[D]. 陈超. 山东中医药大学, 2011(12)
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