一、PCR 应用于检测大麦麦芽纯度（论文文献综述）
张慧,林萍萍,黄潮华,黄国强,徐良年,邓祖湖,张木清,赵新旺[1]（2022）在《甘蔗DNA分子指纹图谱研究进展》文中研究说明分子指纹图谱直接反映生物个体在DNA水平上的差异,可有效鉴别植物品种,保护品种权。甘蔗是无性繁殖作物,在生产上更容易造成品种混杂。本文概述了指纹图谱的分类、概念和作用,近年来国内外常见的DNA分子指纹图谱方法（RFLP、RAPD、AFLP、SSR、ISSR、SNP）在甘蔗中的研究进展,以及指纹图谱在甘蔗品种鉴别与育种研究中的应用,探讨了我国甘蔗分子指纹图谱研究中存在的问题,并由此指出构建甘蔗标准指纹图谱库和分子身份证的必要性与迫切性。
徐肖,栾海业,杨红燕,黄煜韬,张英虎,臧慧,陶红,陈和,陈健,乔海龙,沈会权[2]（2021）在《利用InDel标记进行啤酒大麦黄花叶病抗性鉴定》文中研究指明大麦黄花叶病是严重威胁冬大麦生产的重大病害之一。为促进抗黄花叶病基因在大麦育种中的应用,利用插入或缺失（inserticon-deletion,InDel）标记JSB056和JSB060对180份啤酒大麦资源进行基因型检测,结合病圃黄花叶病表型鉴定,并评价标记在育种中应用的有效性。结果表明,聚合2个InDel标记具有较好的检测效果,检测准确率高达91.9%,是分子辅助选择育种中鉴定大麦黄花叶病抗性的较理想标记。
王富强[3]（2021）在《葡萄KASP标记的开发及在种质资源鉴定中的应用》文中研究表明葡萄是我国重要的经济作物之一,栽培品种众多,开展葡萄品种鉴定工作对规范种苗市场、维护育种者权益、保证产业健康发展等具有重要意义。本研究首次将竞争性等位基因特异性PCR（KASP）技术应用到葡萄品种鉴定中,筛选一套能够区分我国葡萄品种的KASP分子标记鉴定体系,为葡萄新品种保护和维权等提供技术支撑。本研究的主要内容与结果如下:1.基于前人筛选的60个葡萄SNP,成功转化51个KASP标记,并筛选出22个高质量KASP标记。22个KASP标记的缺失率均小于0.12,多态性信息含量（PIC）均大于0.30,杂合率在0.40-0.60之间的标记占77.27%,次要等位基因频率（MAF）大于0.30的标记占95.45%。经邻接聚类分析和群体结构分析,可将76份葡萄品种分为三大类,并能正确区分开二倍体和多倍体品种,其中70份品种仅用10个标记即可有效区分,表明KASP技术在葡萄品种鉴定中应用具有可行性。2.基于简化基因组重测序技术,从304份葡萄种质测序获得的4 241 729个SNP位点中筛选出517个高质量的SNP位点,其PIC均大于0.42,可将304份葡萄种质有效分为7大类。其中90.32%的欧美杂种种质（84份）聚类在Ⅰ、Ⅱ两大类,97.96%的欧亚种（193份）聚类在其余5大类中,12份野生种质紧密聚类在一起,表明517个SNP位点具有可靠性和代表性。3.517个高质量SNP位点中,有442个成功设计为KASP标记,转化率为85.49%。使用348份葡萄种质筛选出46个优质KASP标记,其中PIC值均大于0.40,均为高度多态性标记。基于46个KASP标记检测获得的基因型,构建348份葡萄种质的SNP指纹图谱,其中333份葡萄种质使用25个KASP标记即可有效区分,鉴定效率达到95.69%。群体结构分析、主成分分析、聚类分析均表明348份葡萄种质可以分为2大类。聚类分析结果表明可将348份葡萄种质细分为6个亚类,其中所有的美洲种群（25份）、刺葡萄（3份）、毛葡萄（1份）、山葡萄（1份）均聚类在第Ⅰ类,77.00%（77份）的欧美杂种和87.50%（7份）的欧山杂种聚类在Ⅰ、Ⅱ-1两类中,而所有的欧亚种种质（210份）均聚类在第Ⅱ-2、Ⅱ-3、Ⅱ-4、Ⅱ-5亚类中,证明美洲种群、刺葡萄、毛葡萄、山葡萄同欧亚种的遗传距离较远,而欧美杂种、欧山杂种介于两者之间,符合葡萄不同种之间的亲缘关系,证明选用46个KASP标记作为我国葡萄品种SNP分子鉴定体系具有可行性。
孙军勇[4]（2020）在《啤酒糖化过程大麦麦芽阿拉伯木聚糖的降解》文中认为大麦胚乳细胞壁的主要组分为β-葡聚糖和阿拉伯木聚糖,其中β-葡聚糖一直被认为是啤酒酿造过程中堵塞过滤介质的主要物质。目前,β-葡聚糖在大麦麦芽、麦汁和啤酒中的含量均较低,其对粘度和过滤速度的影响已消除。最新研究表明,当β-葡聚糖含量很低时,阿拉伯木聚糖对过滤具有同样的负面影响。本研究建立了分子筛层析法测定大麦麦芽阿拉伯木聚糖分子量大小和分布的方法,采用Pearson法分析了各分子量阿拉伯木聚糖含量与过滤速度和粘度的相关性,建立了表征影响过滤速度和粘度的多聚阿拉伯木聚糖含量的新指标——PWEAX50;研究了糖化过程中工艺参数、麦芽内源木聚糖酶和外源微生物木聚糖酶对PWEAX50含量的影响;采用2-DE分析了降解PWEAX50效果最好的微生物木聚糖酶蛋白组成,并对其中的关键单酶进行了纯化和性质研究,最后对微生物分泌关键单酶的发酵工艺参数和培养基组成进行了优化。研究对阐释啤酒糖化过程阿拉伯木聚糖的降解机理、提高啤酒生产效率及完善糖化用酶的复配策略均有指导意义。主要研究结果如下:（1）建立了分子筛层析法测定阿拉伯木聚糖的分子量大小和分布。采用80%(v?v-1)乙醇沉淀协定麦汁中的阿拉伯木聚糖,重新溶解后取8 mL上样于Sepharose CL-6B分子筛层析柱,以100 mL?h-1的流速,采用0.05 mol?L-1的NaCl溶液进行洗脱。采用Douglas法测定各管中阿拉伯木聚糖的含量,根据标准曲线计算阿拉伯木聚糖的分子量大小和分布。采用建立的分子筛层析法分析了大麦麦芽中分子量>1000 kDa、500～1000 kDa、50～500 kDa及<50 kDa的β-葡聚糖和阿拉伯木聚糖的含量。Pearson相关性分析表明,分子量>1000 kDa的β-葡聚糖含量与麦汁粘度极显着相关（p<0.01）,与过滤速度没有相关性（p>0.05）。将分子量>50 kDa的阿拉伯木聚糖含量的总和定义为PWEAX50。PWEAX50与过滤速度极显着负相关,与粘度极显着正相关。与其他方法测定的阿拉伯木聚糖含量相比,PWEAX50的显着性水平和相关系数均最高,能更准确地反映影响协定麦汁粘度和过滤速度的高分子量阿拉伯木聚糖含量。较大的分子量、较高的浓度及分子结构中较高的侧链取代程度（A/X值）是PWEAX50造成麦汁粘度高和过滤速度慢的原因。采用SPSS19.0线性回归法分析了协定糖化麦汁的过滤速度与PWEAX50含量之间的关系,构建反映二者之间关系的一元线性方程:V30=485-0.852×PWEAX50含量。将协定麦汁中PWEAX50含量控制在≤334 mg?L-1的范围内,可控制大麦麦芽协定麦汁的过滤速度V30≥200 mL,避免对麦汁的粘度和过滤速度产生负面影响。（2）糖化过程中,糖化温度和时间对醪液中PWEAX50含量影响较小。当温度为45℃和55℃时,PWEAX50含量随时间延长基本保持不变;在65℃和75℃保温时,PWEAX50的含量随时间延长略有上升,但上升幅度不大。以PWEAX50为底物时,在pH4.5～6.0、温度45～75℃的范围内,大麦麦芽内源木聚糖酶X-Ⅰ均具有活力,说明在糖化醪液的环境条件下,X-Ⅰ的活力受到了抑制。（3）采用pH5.5、100 mmol?L-1的乙酸——乙酸钠缓冲溶液提取大麦水溶性蛋白,并采用离子交换层析及分子筛层析纯化,得到一种内源木聚糖酶X-Ⅰ的抑制蛋白。该蛋白经基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱鉴定为大麦α-淀粉酶/枯草芽孢杆菌蛋白酶抑制蛋白（barleyα-amylase/subtilisin inhibitor,BASI）。BASI的氨基酸序列与目前文献中已报道的HVXI和XIP、TAXI和TLXI均没有相似性,是一种新发现的木聚糖酶抑制蛋白。当摩尔比为2.75:1,反应时间为20 min,p H值为6.0,温度为50℃时抑制活力较高。BASI在糖化温度和pH范围内对X-Ⅰ均具有较强的抑制作用,是糖化过程PWEAX50未被降解的主要原因。在X-Ⅰ与底物的反应体系中添加BASI后,Km值增大,Vmax值不变,表明BASI是X-Ⅰ的竞争型抑制剂。（4）底物特异性和对BASI抑制活力的敏感程度是影响糖化过程中微生物木聚酶降解PWEAX50的主要因素。将14种微生物木聚糖酶以25 U?g-1麦芽的量外加到大麦麦芽的糖化醪液中,添加2#,4#,6#,11#和12#木聚糖酶后,麦汁中SAX含量均上升,麦汁中PWEAX50的含量呈现相同的变化趋势,说明这5种微生物木聚糖酶主要是作用于麦芽中的WUAX,添加3#,7#,和14#木聚糖酶的糖化麦汁中的PWEAX50和SAX含量以及粘度和过滤速度等指标均变化较小,BASI的抑制作用导致它们无法发挥催化作用;1#,5#,8#,9#,10#和13#木聚糖酶均具有一定的降解PWEAX50的能力,对降低麦汁粘度和提高过滤速度均有一定的效果,其中来源于里氏木霉CICC41495的8#木聚糖酶能将麦汁中PWEAX50完全降解,粘度降低了11.8%,过滤速度提高了93%。酶活分析及双向电泳（2-DE）结合基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱分析表明,里氏木霉CICC41495分泌的胞外酶中有完整的木聚糖降解酶系,主要包括内切-1,4-β-木聚糖酶Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ（XYNⅠ,Ⅱ,Ⅲ）和α-L-阿拉伯糖呋喃糖苷酶（TrAbf62A）。采用硫酸铵盐析、离子交换和分子筛层析,从8#木聚糖酶中纯化得到XYNⅠ,Ⅱ,Ⅲ,其中XYNⅢ属于GH10家族,其分子量为32.0 kDa,等电点为9.0,对BASI的抑制活力敏感度低,最适pH和温度分别为5.5和55℃,活力受Zn2+、Cu2+、Fe3+和SDS抑制,对PWEAX50具有底物特异性,能将PWEAX50水解成木糖和木二糖、木三糖等木寡糖,是里氏木霉CICC41495分泌的阿拉伯木聚糖降解酶系中降解PWEAX50的关键单酶;其与TrAbf62A在降解PWEAX50时有较强的协同效应:TrAbf62A单独处理2 h,接着加入XYNⅢ反应2 h后,协同效应达到162%。（5）对降解PWEAX50的关键单酶——XYNⅢ的发酵工艺条件进行了研究,结果表明,当培养基的起始pH5.0,培养温度30℃,接种量10%,吐温80添加量为0.2%,装液量为250mL三角瓶装50 mL培养基,摇床转速180 r?min-1,培养168 h时,发酵液中XYNⅢ活力较高。培养基组分中,碳源和氮源对里氏木霉CICC41495分泌XYNⅢ影响最大,采用Box-Benhnken中心组合实验设计法优化了培养基中对XYNⅢ分泌有较大影响的组分——玉米芯、麸皮、酵母粉和硫酸铵的浓度,结果表明,当玉米芯的浓度为42.17 g?L-1,麸皮浓度为30.50 g?L-1,酵母粉浓度为3.75 g?L-1,XYNⅢ活力达到281U?mL-1,优化后,发酵液中XYNⅢ活力提高了406%。
赵海鹏[5]（2020）在《大麦籽粒蛋白质含量QGpc.ZiSc-2H位点的精细定位研究》文中研究说明大麦用途广泛,是典型的“三元”作物（经济作物、粮食作物和饲料作物）,其中约80%大麦用于饲用和食用,20%用于酿制啤酒等,而籽粒蛋白质含量是决定大麦用途的主要品质指标之一。籽粒蛋白质含量是典型的数量性状,通过QTL定位和克隆粒重相关基因是阐明产量性状复杂的分子遗传机理,挖掘大麦产量遗传潜力和提高育种效率的重要手段。本研究在前期籽粒蛋白质含量QTL初步定位的基础上,以大麦地方品种紫光芒裸二棱和Schooner为亲本构建近等基因系,对位于染色体2H上的环境稳定性QTL位点QGpc.ZiSc-2H开展目的区间标记加密,遗传效应评价及精细定位研究,研究结果如下:1.为了验证籽粒蛋白质含量遗传效应,利用携带QGpc.ZiSc-2H区段杂合的5个近等基因系衍生的次级分离群体(BC3F3:4),对QGpc.ZiSc-2H位点的遗传效应进行验证。证明QGpc.ZiSc-2H位点的调控籽粒蛋白质含量真实有效,且将该位点定位区间缩小到了物理距离约23 Mb的区段内。2.为了进一步缩小QGpc.ZiSc-2H定位区间,利用区间侧翼标记2L156和2L12筛选交换单株,共鉴定到39个区间内发生交换的单株。考察39个由交换单株衍生的F2群体中单株的籽粒蛋白质含量,结合区间加密的标记,进一步将目的区间缩小至了标记2H-850-2H-7180之间共455 Kb的物理区间内。
徐婷婷,汪巧玲,邹淑琼,狄佳春,杨欣,朱银,赵涵,颜伟[6]（2020）在《基于高通量测序的大麦In Del标记开发及应用》文中认为分子标记是遗传研究的基础工具,广泛应用于遗传多样性研究、种质鉴定、遗传图谱构建和基因定位等领域。本研究基于大麦的全基因组重测序数据鉴定出的二态性SNP位点,开发出遍布全基因组的118对InDel引物。以49份不同地理来源的大麦种质检测其有效性,筛选出2个等位基因的共显性InDel标记72对,进一步对288份大麦种质进行遗传距离分析及构建系统发育树。结果显示,筛选到32个有效性的核心InDel标记,覆盖大麦7条染色体上,平均PIC为0.44,平均MAF为0.34;基于InDel标记位点的供试大麦的系统发育树结果揭示供试大麦具有丰富的遗传多样性,且能够将具有相同地理来源的多数品种聚为一类。表明开发的32个二态性InDel标记可有效地用于鉴定品种间的亲缘关系,且丰富了大麦品种鉴定的分子标记。上述核心InDel标记在大麦品种鉴定、大麦资源亲缘关系分析以及群体划分方面具有一定的理论意义和应用价值。
王斌斌[7]（2019）在《乳酸菌葡聚糖分子结构、理化性质及合成机制的研究》文中研究说明乳酸菌（Lactic Acid Bacteria,LAB）是公认的可用于多种发酵食品的有益微生物,一些产生的胞外多糖（Exopolysaccharide,EPS）可作为食品添加剂、增稠剂、乳化剂添加入食品配方中,同时还具有抗肿瘤、抗溃疡、作为益生元、降低胆固醇以及免疫激活等生理功能。尽管LAB EPS展现出了良好的应用前景,目前对它的认识和研究仍十分有限,本论文从发酵食品中分离到两株高产EPS的LAB菌株,并对其所产EPSs的分子结构、理化性质、生物活性以及其产糖机制进行了研究。本论文分别从腊肠与酸菜中分离得到两株LAB L3和PC,其在MRS-S产糖平板上培养时有明显的产糖现象,表明两菌株具有产生EPS的能力。经形态结构、生理生化以及16S r DNA测序分析鉴定,L3为清酒乳杆菌（Lactobacillus sakei）,其16S r DNA序列与Lac.sakei KLDS 1.0729同源性高达99%,PC为假肠膜明串珠菌（Leuconostoc pseudomesenteroides）,其16S r DNA序列与Leu.pseudomesenteroides BFE 6644同源性高达99%。对影响L3和PC EPSs产量的培养基和培养条件进行优化。菌株L3在单因素实验后,EPS产量从38.05±1.14 g/L提高到64.93±0.80 g/L,PB实验确定了影响L3 EPS产量的显着因素为蔗糖浓度、初始p H值和接种量,其中蔗糖浓度对最终产量的影响最大。基于上述结果我们进行了中心组合实验（Central composite design,CCD）,结果显示当蔗糖含量为127.80 g/L、初始p H值为6.87、接种量为3.15%（v/v）时,模型预测的L3 EPS产量的最大值为68.28 g/L,验证实验结果与预测值基本一致。同时,菌株PC通过单因素、PB（Plackett-Burman,PB）、最陡爬坡以及CCD优化实验,EPS产量从35.13±0.61 g/L提升至62.07±1.42 g/L。采用优化后培养基和培养条件对两菌株进行培养,分别从两菌株的培养液中分离纯化EPSs,并对其分子结构进行研究,所建立的纯化方法包括离心除菌、醇沉、三氯乙酸除蛋白、透析与Sephadex G-100凝胶过滤层析等。气相色谱、傅里叶红外光谱和核磁共振等分析结果显示从两株菌中分离得到的两种EPSs均为葡聚糖,且主要结构均由→6)α-D-Glcp-(1→的重复单元组成。通过高效体积排阻色谱法确定L3与PC两种EPSs的分子量分别为3.25×106和3.13×106 Da。扫描电镜分析结果显示L3 EPS聚合物具有多孔和支链的形态,而PC纯化EPS聚合物由存在多孔结构的不规则的闪光薄片组成。原子力显微镜结果显示两种EPSs聚合物表面均可观察到圆形或尖峰状的团块。刚果红实验、圆二色光谱分析及β-消除反应表明,两种EPSs均呈现单股无规则的线团形式、不具三股螺旋结构、糖肽键的连接键型为O-型。对两种EPSs的理化性质和生物活性进行了分析。L3和PC EPSs的降解温度分别为272和304.9°C,熔融吸热峰温度分别为210.8和236.5°C,同时L3和PC EPSs的水溶解度指数分别为90%和96%。利用粒度及Zeta电位分析仪对不同浓度的两种LAB EPSs溶液进行了平均粒径及Zeta电位值测定,结果显示多糖浓度从0.125增大至2 mg/m L时,PC EPS溶液的Zeta电位值从-2.7±0.1 m V变为-7.3±0.2 m V,平均粒径从220.1±1.9 nm增至332.8±5.3 nm;L3 EPS溶液的Zeta电位值从-1.9±0.2 m V变为-8.3±0.1 m V,平均粒径从217.5±0.7 nm增至251.1±0.4nm。在常温下,L3与PC EPSs在水中的特性粘度分别为202.59和238.27 m L/g。流变学性质的研究结果表明,两种EPSs的表观粘度在一定范围内均随着浓度的增大及温度和p H的降低而增大。另外,对两种EPSs的乳化性能进行了分析,2mg/m L的L3与PC EPSs水溶液分别对葵花籽油和大豆油呈现较高的乳化活性（62.30±0.06%和57.57±0.13%）。牛奶凝结实验表明,L3和PC分别能够使添加12%（w/v）和9%（w/v）蔗糖的脱脂牛奶完全凝固。选取德氏乳杆菌（Lac.delbrueckii）、嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）、干酪乳杆菌（Lac.casei）、植物乳杆菌（Lac.plantarum）和副干酪乳杆菌（Lac.paracasei）进行益生实验,结果表明L3 EPS对S.thermophilus的益生效果最佳,在添加2 g/L L3 EPS后,延滞期缩短4 h,最大生物量增加5.77%;而Lac.plantarum在添加PC EPS后不仅对数期提前9 h而且最大生长量增加了11.89%。为了探讨EPS的产生机制,选取L3菌株为研究对象,对其进行转录组测序分析。结果显示与MRS培养基相比,生长在MRS-S产糖培养基中的菌株出现了显着的基因表达差异,其中有230个基因显着上调,196个基因显着下调。在这些差异表达的基因中,与尿苷一磷酸、脂肪酸和叶酸代谢相关的基因均呈现不同程度的下调,而与蔗糖转运和代谢相关的酶类基因多数呈现上调。同时q RT-PCR结果证实了转录组数据的可信性,蔗糖转运蛋白、蔗糖-6-磷酸水解酶以及果糖转运蛋白在MRS-S产糖培养基生长的菌株中分别上调了28.62±2.56、31.20±0.78和74.76±14.25倍。葡聚糖蔗糖酶是乳酸菌利用底物蔗糖合成葡聚糖的关键酶,该酶在MRS-S产糖培养基生长的菌株中上调了24.19±4.29倍。上述研究结果对阐明EPS合成机制提供了明确的线索和依据。在此基础上,本论文通过同源建模与分子对接技术获得了葡聚糖蔗糖酶、蔗糖转运蛋白、蔗糖-6-磷酸水解酶以及果糖转运蛋白与底物相互作用的模式,这四种蛋白均在特定的氨基酸残基处形成腔袋,与蔗糖或果糖之间存在范德华力或者疏水性相互作用,进而满足酶催化或者跨膜转运的需要。综上所述,本论文分离出两株产生EPS的LAB,两株菌产生的EPSs均为葡聚糖,初步阐明了葡聚糖的生物合成机制,两种EPSs展现出了不同程度的优良理化性质和生物活性,以上研究为LAB EPS的研究和应用提供了依据。
赵慧燕[8]（2019）在《大麦营养与功能组分的相关性分析以及紫粒大麦转录因子HvTTG1功能的初步性研究》文中提出随着人们对大麦保健功效的认知不断增强,大麦作为健康食品用途越来越引起科技工作者的关注。对于大麦营养组分而言,大麦籽粒含有较多的蛋白质、矿质元素、赖氨酸;在功能组分方面,β-葡聚糖、酚类物质、维生素E、脂质也是食用品质的重要指标。值得关注的是,大麦脂类（三酰甘油）组分品质较高,含有较高比例的不饱和脂肪酸,例如棕榈酸（C16:0）、油酸（C18:1）、亚油酸（C18:2）以及亚麻酸（C18:3）。通过大麦营养组分和功能组分的相关性分析我们发现蛋白质与纤维素关联性比较大,并且籽粒中的总黄酮与其它两个功能组分维生素E以及β-葡聚糖均有较大的关联性。另外,紫粒或黑粒大麦因其颜色新奇而被应用于各种创新型食谱中。紫粒大麦颜色形成是由于包含各种颜色的化合物,其中主要有酚酸、类黄酮、聚黄酮几大类。但是,目前对于紫粒大麦颜色形成的分子调控机制,尚且没有研究报道。我们对紫粒大麦转录因子HvTTG1的初步性功能研究,于后期紫粒大麦的培育有一定的参考价值,对紫粒大麦应用到新食谱中也具有一定的指导意义。为了分析大麦籽粒营养组分之间的关系,我们首先测定了91份大麦种质资源的基本营养功能组分并对其进行相关性分析,结果发现在91份大麦种质材料中,纤维素的含量范围是7.5613.17%,平均含量是10.78%（±0.58%）,均高于其它几种组分。根据相关性分析结果,我们发现大麦籽粒中纤维素含量是最高的,而且纤维素与蛋白质含量之间的相关性达到了31.58%（P<0.05）,远高于其它组分之间的相关性,这说明纤维素指标变化可以反映籽粒蛋白质含量的变化。另外,我们发现总黄酮与β-葡聚糖之间的相关性系数在29.18%（P<0.05）,与维生素E的相关性系数在29.05%（P<0.05）。我们对大麦籽粒纤维与蛋白质之间,以及总黄酮与β-葡聚糖、维生素E的相关性研究,这为大麦育种中协同选育功能保健组分提供了参考。为了分析大麦功能组分之间的相关性,我们以上海本地栽培品种“上海双楞扁大麦”（shuanglengbian,SLB）为研究对象,利用其子代颜色发生分离的特性,获取紫粒（purple-seeded,PS）以及黄粒（yellow-seeded,YS）两份材料,利用液相色谱-质谱联用仪（liquid chromatograph mass spectrometer,LC-MS）发现紫粒大麦种皮表儿茶素（epicatechin,EC）含量要显着高于黄粒大麦（紫粒中表儿茶素含量291.65 ng/g,黄粒中表儿茶素含量是244.31 ng/g）。黄粒中表儿茶素的含量,比紫粒降低了19.38%,达到了极显着的水平（P<0.01）。我们进一步分析了紫粒与黄粒大麦的脂质组学差异,结果发现,紫粒中脂质组分单酰甘油（monoacylglyceride,MG）、二酰甘油（diacylglyceride,DG）、三酰甘油（triacylglyceride,TG）,相对于黄粒,分别提高了1种、12种以及67种,共80种;降低的是3种、19种以及96种,一共118种。深入分析后发现,黄粒中提高2倍以上的有10种,分别为MG（18:4）,DG（16:0/16:1）,DG（20:1/18:3）,DG（56:8）,TG（16:0/10:0/20:4）,TG（16:2/18:2/20:5）,TG（18:3/17:2/18:2）,TG（18:4/16:0/18:1）,TG（4:0/14:1/18:3）,TG（6:0/8:0/22:5）,另外,我们发现,紫粒中脂质组分MG（18:2）、DG（18:2/18:2）,DG（18:3/18:2）均比黄粒含量高。前人的研究发现,转录调控蛋白TT2（TRANSPARENT TESTA 2）、TT8（TRANSPARENT TESTA 8）以及TTG1（TRANSPARENT TESTA GLABRA 1）,三者是公认的调节种皮类黄酮、聚黄酮代谢的重要因子,下游靶基因包括二氢黄酮醇（dihydroflavonol 4-reductase,DFR）,无色花青素双加氧酶（leucoanthocyanidin dioxygenase,LDOX）,花青素还原酶（anthocyanidin reductase,ANR）等。MYB和bHLH蛋白可以相互作用形成MYB-bHLH蛋白复合体,或者三类转录因子相互作用形成MYB-bHLH-WD40复合物（MBW复合物）,直接调控花青素代谢途径结构基因的转录与表达。为了初步研究紫粒大麦颜色形成的调控机制,我们比较了20份黄粒与紫粒大麦中公认的调控种皮颜色的转录因子HvTTG1序列,发现黄粒与紫粒大麦根据HvTTG1序列可以分成两个集合。我们利用同源比对的手段,克隆“SLB”中转录因子HvTTG1并在拟南芥中超表达,结果发现转基因植株的叶片变成紫色。我们初步认为HvTTG1在大麦紫粒种皮颜色形成中起到潜在的调控作用,并且紫粒大麦相对黄粒大麦,籽粒含有更高的亚油酸、亚麻酸。我们同时发现大麦籽粒中蛋白质的变化,与纤维素含量的变化有着较大的相关性。我们的研究对紫粒大麦应用到新食谱中,具有一定的指导意义。
刘荣霞[9]（2019）在《Bacillus subtilis QM3对小麦种子萌发淀粉酶的影响及关键基因表达量研究》文中进行了进一步梳理种子萌发是植物生长发育的起始阶段,是植物生长发育的基础。小麦作为非常重要的粮食作物,其种子萌发状况不好会影响小麦的生长发育甚至产量,因此为了提高小麦的产量对其的萌发过程进行研究显得尤为重要。微生物因其对环境无污染,受到了很多研究者的关注,并且已经有一些微生物肥料应用于农业种植中,用于提高其产量。枯草芽孢杆菌是一种分布广泛,在芽孢杆菌属里面是非常受关注的生防菌。本研究以小麦为实验材料,研究不同浓度的B.subtilis QM3菌液浸种对小麦萌发形态指标、淀粉酶活性、淀粉酶同工酶和降解淀粉关键基因表达量的影响,旨在为枯草芽孢杆菌促进植物萌发方面提供一定的科学依据。主要研究结论如下:（1）用不同浓度的B.subtilis QM3菌液浸种小麦种子3 h,在培养皿中培养使其萌发7天,用计数、称量和根系扫描系统的方法分别对小麦种子萌发过程中发芽率,发芽势,发芽指数,芽长,种子活力,小麦的根部形体指标,鲜重,干重和根冠比描述分析。结果表明,不同浓度的菌液对各个萌发指标的促进作用不完全相同,其中107 CFU/mL B.subtilis QM3菌液浸种小麦种子对这些指标的促进作用最显着（p<0.05）,相比于对照组,发芽势和发芽指数分别增加了9.20%和8.59%;在小麦种子萌发第3天,地下部分鲜重、地上部分鲜重和根冠比分别增加了24.55%,12.38和10.88%;在小麦种子萌发第4天,芽长和种子活力指数分别增加了22.43%和27.60%;在小麦种子萌发第5天,根部形态指标包括根的长度、表面积、投影面积和体积分别增加了61.47%,65.39%,63.07%和59.15%,鲜重和干重分别增加了21.79%和14.03%。一定浓度的B.subtilis QM3菌液浸种小麦种子可以有效的促进小麦萌发。（2）用不同浓度的B.subtilis QM3菌液浸种小麦种子3 h,用培养皿培养使其萌发7天,每天取不同处理的小麦种子,用3,5‐二硝基水杨酸法测定小麦种子中α-淀粉酶、β-淀粉酶、总淀粉酶的活性;用普鲁兰法测定极限糊精酶的活性。结果表明,小麦种子在萌发过程中各种酶活性均发生了变化。α‐淀粉酶、β‐淀粉酶、总淀粉酶和极限糊精酶的活性变化趋势均为先增加后减少,达到最大活性的时间不完全相同,基本上在萌发4-5天时他们的活性达到最大。经过各个浓度的B.subtilis QM3菌液浸种处理以后,与对照相比对各种酶的活性影响程度不完全相同。106 CFU/mL的B.subtilis QM3浸种小麦种子可以显着提高各种酶的活性（p<0.05）,处理效果最好。在小麦种子萌发第4天的时候,106 CFU/mL的B.subtilis QM3浸种小麦种子处理与对照组相比,α‐淀粉酶、β‐淀粉酶、总淀粉酶和极限糊精酶的活性分别增加了40.74%、30.85%、33.53%和28.14%。一定浓度的B.subtilis QM3浸种小麦种子可以提高淀粉酶的活性,促进小麦种子的萌发。（3）用106 CFU/mL的B.subtilis QM3菌液浸种小麦种子3 h,用培养皿培养使其萌发7天,每天取萌发的小麦种子样品,用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定小麦种子萌发过程中种子中α‐淀粉酶同工酶、β‐淀粉酶同工酶、总淀粉酶同工酶。结果表明,随着萌发时间的延长,小麦种子α‐淀粉酶同工酶、β‐淀粉酶同工酶、总淀粉酶同工酶的条带增多,亮度变亮且条带变宽,同工酶表达活性增强。经过106 CFU/mL的B.subtilis QM3处理种子后,淀粉酶同工酶与对照相比,淀粉酶同工酶的活性增强,表现为亮度增加,条带变宽。并且在小麦种子萌发第三天使,条带亮度增加的幅度最大,在萌发第五天条带亮度达到萌发时期的最大值。说明一定浓度的B.subtilis QM3浸种小麦种子可以提高种子中淀粉酶同工酶的活性,从而促进小麦种子萌发。（4）用106 CFU/mL的B.subtilis QM3菌液浸种小麦种子3 h,用培养皿培养使其萌发,取萌发3天的小麦种子,用实时荧光定量PCR的方法测定小麦种子中TaAmy1、TaAmy3和β-Amy基因的表达量。结果表明,菌液浸种小麦种子后与对照相比TaAmy1基因的表达量显着上升,增加2倍多,TaAmy3基因的表达量没有显着的变化,β-Amy基因表达量较少。推测B.subtilis QM3可能通过提高TaAmy1基因的表达量,促进种子萌发。
蒋培基[10]（2018）在《基于SNP-KASP技术对啤酒花品种鉴定与纯度检测的研究》文中研究指明啤酒花是啤酒酿造的基本原料之一,在啤酒中起着发泡与防腐的作用,是啤酒中苦味物质的主要来源,被称为“啤酒之魂”。目前,市售啤酒花品种繁多,存在一定的以次充好现象。这不仅影响了啤酒花产业的健康发展,也对啤酒酿造企业带来较大的负面效应。更重要的是这种行为可能影响消费者的身体健康,带来食品安全隐患。然而,目前啤酒花国标检测仅仅涉及到4个理化指标,并不包含啤酒花纯度和真实性检测。因此,开发出一套准确、快速、低成本可用于市售啤酒花纯度和真实性检测的方法势在必行。本研究旨在开发出一套可应用于啤酒花品种鉴定的技术手段,使啤酒企业能对酿酒原料的质量进行有效的把控,对啤酒花原料供应商提供一定的监督手段,为啤酒酿造企业产品质量的稳定和啤酒花产业的健康发展保驾护航。本文以国内啤酒酿造企业使用量较大的18种啤酒花为原料,基于单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphisms,SNP）分子标记,利用竞争性等位基因特异性PCR（Kompetitive Allele Specific PCR,KASP）基因分型检测技术对啤酒花进行品种鉴定与纯度的检测。首先,提取啤酒花基因组DNA。然后,通过选取国内外常用的8种啤酒花进行高通量测序与生物信息学分析寻找并初步筛选出可用于啤酒花品种鉴定的SNP位点。进而以18个啤酒花品种的DNA为模板,通过聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）扩增与一代测序,对SNP位点进行验证,筛选出可区分18个啤酒花品种的SNP位点,最后基于筛选出的SNP位点和KASP基因分型检测技术对预混样品和对企业样品开展了基因型的定性与定量分析,完成了预混样品的检测以及企业样品的品种鉴定与纯度检测,试验该技术的可行性与准确性。结果如下:（1）使用QIGEN试剂盒对啤酒花基因组DNA提取。结果表明,提取的基因组DNA片段>15KP,基因组完整。浓度在215 ng/μL以上,满足实验要求。对8个品种啤酒花基因组高通量测序和生物信息学分析后共得到46003个较为可靠的SNP位点。通过进一步的筛选,确定了2636个可用于品种鉴定分析的SNP位点。（2）经真实性验证与进一步筛选,最终得到11个SNP位点,通过这些稳点可以区分18个啤酒花品种,统计得到了18个啤酒花品种的SNP数据表,建立了区分路线图。（3）利用11个SNP位点对预混样品进行了检测,结果表明:H01、H02、H03、H04、H06、H09、H10、H11八个位点的基因型检测结果完全符合预期。H05、H07、H08三个位点与样品混杂率在5%以上的样品检测时与预混样基因型判定结果一致,而在混杂度为2%的样品中基因型检测结果出现了偏差。表明该方法可以满足对混杂比例大于5%的样品进行准确的区分。此外,由于KASP的两种荧光信号值比与混杂样品比例之间存在极显着线性相关,不同混杂样品混杂比例可以作为标准曲线对啤酒花进行纯度的检测。最后,利用该技术对企业送来的青岛大花样品与Sazz样品检测发现,青岛大花样品纯度>95%,而Sazz啤酒花为混杂样品。通过标准曲线法测定Sazz啤酒花的纯度只有65.75%。与企业信息对比（青岛大花纯度>98%,Sazz啤酒花纯度为70%）检测误差<5%。以上结果表明,SNP-KASP技术能有效的对啤酒花样品进行品种鉴定与纯度检测。
二、PCR 应用于检测大麦麦芽纯度（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、PCR 应用于检测大麦麦芽纯度（论文提纲范文）
（1）甘蔗DNA分子指纹图谱研究进展（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 指纹图谱的概念、分类及作用 |
| 2 甘蔗DNA分子指纹图谱的主要类型 |
| 2.1 用于构建DNA指纹图谱的常用分子标记特点 |
| 2.2 分子标记技术构建指纹图谱在作物分子鉴定的应用 |
| 2.3 分子标记技术构建指纹图谱在甘蔗上的应用进展 |
| 2.3.1 RFLP图谱 |
| 2.3.2 RAPD图谱 |
| 2.3.3 AFLP图谱 |
| 2.3.4 SSR图谱 |
| 2.3.5 ISSR图谱 |
| 2.3.6 SNP图谱 |
| 3 甘蔗种质分子身份证与指纹图谱库的构建 |
| 3.1 甘蔗种质分子身份证与指纹图谱库的构建 |
| 3.2 构建甘蔗标准指纹图谱（库）并执行行业标准，保护品种权益 |
| 4 构建甘蔗标准指纹图谱的思考与展望 |
（2）利用InDel标记进行啤酒大麦黄花叶病抗性鉴定（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 供试材料 |
| 1.2 田间种植 |
| 1.3 表型抗性鉴定 |
| 1.4 分子标记 |
| 1.5 自然群体基因型分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 自然群体的黄花叶病抗性 |
| 2.2 分子标记鉴定及其准确性 |
| 3 讨论与结论 |
（3）葡萄KASP标记的开发及在种质资源鉴定中的应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要符号对照表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 课题的提出 |
| 1.2 研究目的与意义 |
| 1.3 文献综述 |
| 1.3.1 SNP分子标记的开发 |
| 1.3.2 SNP标记的检测 |
| 1.3.3 KASP技术在作物品种品种鉴定中的应用 |
| 1.3.4 SNP标记在葡萄品种鉴定中的应用 |
| 1.4 论文结构安排 |
| 第二章KASP技术在葡萄品种鉴定中的可行性分析 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 KASP标记的转化 |
| 2.2.2 KASP标记的筛选 |
| 2.2.3 KASP标记检测结果的可靠性分析 |
| 2.2.4 KASP标记在葡萄品种鉴定中的应用 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 葡萄KASP标记的筛选与分子标记鉴定体系构建 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 试验方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 获得517个优质SNP位点 |
| 3.2.2 517 个优质SNP位点的分析验证 |
| 3.2.3 KASP标记的转化 |
| 3.2.4 KASP标记的筛选 |
| 3.2.5 KASP标记的鉴定效率分析 |
| 3.2.6 348 份葡萄种质的遗传分析 |
| 3.2.7 348 份葡萄种质的指纹图谱构建 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 结论 |
| 4.1 全文结论 |
| 4.2 创新点 |
| 4.3 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 A |
| 附录 B |
| 附录 C |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（4）啤酒糖化过程大麦麦芽阿拉伯木聚糖的降解（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语名词英汉对照表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 啤酒和麦汁的过滤速度 |
| 1.2 β-葡聚糖 |
| 1.3 阿拉伯木聚糖 |
| 1.3.1 结构 |
| 1.3.2 检测方法 |
| 1.3.3 阿拉伯木聚糖对啤酒生产及品质的影响 |
| 1.4 阿拉伯木聚糖的降解酶系 |
| 1.5 阿拉伯木聚糖降解的影响因素 |
| 1.5.1 糖化工艺参数 |
| 1.5.2 阿拉伯木聚糖的分子结构 |
| 1.5.3 木聚糖酶的催化特性 |
| 1.5.4 木聚糖酶的底物特异性 |
| 1.5.5 木聚糖酶抑制蛋白 |
| 1.6 里氏木霉产木聚糖酶的研究进展 |
| 1.7 选题的依据及意义 |
| 1.7.1 选题依据 |
| 1.7.2 选题意义 |
| 1.8 论文的研究目标 |
| 1.9 论文的研究内容 |
| 第二章 阿拉伯木聚糖分子量大小和分布与麦芽过滤性能的关系 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 材料与试剂 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.2.3 实验方法 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 麦汁中β-葡聚糖和阿拉伯木聚糖的沉淀 |
| 2.3.2 大麦麦芽常规理化指标分析 |
| 2.3.3 大麦麦芽与过滤速度相关的理化指标分析 |
| 2.3.4 分子筛层析法测定β-葡聚糖和阿拉伯木聚糖的分子量大小和分布 |
| 2.3.5 β-葡聚糖和阿拉伯木聚糖分子量大小与过滤速度和粘度的关系 |
| 2.3.6 PWEAX_(50)影响麦芽过滤性能的原因分析 |
| 2.3.7 大麦麦芽协定麦汁中PWEAX_(50)含量的控制范围 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 糖化过程麦芽内源木聚糖酶降解PWEAX_(50)的研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 材料与试剂 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.2.3 实验方法 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 等温糖化过程WEAX及 PWEAX_(50)含量的变化 |
| 3.3.2 模拟工业啤酒糖化工艺过程PWEAX_(50)含量的变化 |
| 3.3.3 啤酒酿造过程中WEAX和 PWEAX_(50)含量的变化 |
| 3.3.4 麦芽内源木聚糖酶对PWEAX_(50)的降解 |
| 3.3.5 大麦麦芽水溶性蛋白的2-DE分析 |
| 3.3.6 内源木聚糖酶抑制蛋白的纯化 |
| 3.3.7 BASI与已知木聚糖酶抑制蛋白的氨基酸序列比对 |
| 3.3.8 BASI的抑制特性 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 糖化过程外源微生物木聚糖酶降解PWEAX_(50)的研究 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 材料与试剂 |
| 4.2.2 实验仪器 |
| 4.2.3 实验方法 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 糖化过程外源微生物木聚糖酶对PWEAX_(50)的降解 |
| 4.3.2 里氏木霉CICC41495木聚糖酶系的蛋白质组学分析 |
| 4.3.3 里氏木霉CICC41495木聚糖酶系木聚糖酶的纯化 |
| 4.3.4 木聚糖酶Ⅲ(XYNⅢ)的生化特性 |
| 4.3.5 木聚糖酶Ⅲ与阿拉伯呋喃糖苷酶(TrAbf62A)降解PWEAX_(50)的协同效应 |
| 4.3.6 里氏木霉CICC41495 阿拉伯木聚糖降解酶系的中降解PWEAX_(50)关键单酶的确定 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 里氏木霉CICC41495产木聚糖酶Ⅲ的工艺优化 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 材料与试剂 |
| 5.2.2 实验仪器 |
| 5.2.3 实验方法 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 碳源对菌株分泌木聚糖酶Ⅲ的影响 |
| 5.3.2 氮源对菌株分泌木聚糖酶Ⅲ的影响 |
| 5.3.3 磷酸二氢钾浓度对菌株分泌木聚糖酶Ⅲ的影响 |
| 5.3.4 培养基初始pH对菌株分泌木聚糖酶Ⅲ的影响 |
| 5.3.5 溶氧水平对菌株分泌木聚糖酶Ⅲ的影响 |
| 5.3.6 接种量对菌株分泌木聚糖酶Ⅲ的影响 |
| 5.3.7 发酵温度对菌株分泌木聚糖酶Ⅲ的影响 |
| 5.3.8 表面活性剂对菌株分泌木聚糖酶Ⅲ的影响 |
| 5.3.9 产木聚糖酶Ⅲ培养基的响应面优化 |
| 5.4 本章小结 |
| 主要结论与展望 |
| 创新点 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录一:作者在攻读博士学位期间发表的论文 |
| 附录二:大麦麦芽内源木聚糖酶抑制蛋白的MALDI-TOF/TOF tandem MS鉴定结果 |
| 附录三:XYNⅢ的MALDI-TOF/TOF tandem MS图谱 |
（5）大麦籽粒蛋白质含量QGpc.ZiSc-2H位点的精细定位研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| SUMMARY |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 大麦简介 |
| 1.2 国内外大麦种植与生产现状 |
| 1.3 植物蛋白质概述 |
| 1.3.1 植物蛋白的来源 |
| 1.3.2 植物蛋白的营养价值 |
| 1.3.3 种子储藏蛋白的合成及积累 |
| 1.3.4 植物蛋白的其他功能 |
| 1.4 大麦籽粒蛋白质组分及利用价值概述 |
| 1.4.1 大麦籽粒蛋白质各组分含量 |
| 1.4.2 大麦籽粒蛋白质含量对籽粒用途和营养价值的影响 |
| 1.4.3 大麦籽粒其他利用价值 |
| 1.5 籽粒蛋白质含量研究进展 |
| 1.5.1 大麦蛋白质含量国内研究进展 |
| 1.5.2 大麦蛋白质含量国外研究进展 |
| 1.5.3 其他作物蛋白质含量研究进展 |
| 1.6 竞争性等位基因特异性PCR(KASP)概述 |
| 1.6.1 KASP技术的精确性 |
| 1.6.2 KASP技术的成本 |
| 1.6.3 KASP技术的利用 |
| 1.7 数量性状作图群体 |
| 1.7.1 数量性状初定位群体 |
| 1.7.2 数量性状精细定位群体 |
| 1.8 研究目的与意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 大麦材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 田间管理 |
| 2.2.2 大麦籽粒蛋白质含量的测定 |
| 2.2.3 大麦单株DNA提取及检测 |
| 2.2.4 分子标记开发与设计 |
| 2.3 基因分型统计分析 |
| 第三章 大麦籽粒蛋白质含量QGpc.ZiSc-2H基因的精细定位与遗传分析 |
| 3.1 在2H染色体上定位了一个籽粒蛋白质含量QTL位点 |
| 3.2 QGpc.ZiSc-2H遗传效应评价 |
| 3.3 缩小QGpc.ZiSc-2H定位区间 |
| 3.4 QGpc.ZiSc-2H精细定位 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 KSAP基因分型技术的优越性 |
| 4.2 精细定位与近红外技术相结合 |
| 4.3 影响籽粒蛋白质含量的非遗传因素 |
| 4.4 与前人大麦籽粒蛋白质研究比较 |
| 第五章 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 在读期间发表论文和研究成果等 |
| 导师简介 |
（6）基于高通量测序的大麦In Del标记开发及应用（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 供试材料 |
| 1.2 InDel标记开发及有效性检测 |
| 1.3 数据分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 InDel分子标记的开发 |
| 2.2 大麦InDel分子标记的有效性检测 |
| 2.3 InDel分子标记在品种鉴定中的应用 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
（7）乳酸菌葡聚糖分子结构、理化性质及合成机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 微生物多糖简介 |
| 1.2 乳酸菌(Lactic Acid Bacteria,LAB)EPS |
| 1.2.1 LAB EPS的分类 |
| 1.2.2 产生LAB EPS菌株的筛选以及影响产量的因素 |
| 1.2.3 LAB EPS的提取与分离纯化 |
| 1.2.4 LAB EPS结构分析 |
| 1.2.5 LAB EPS在食品工业中的应用及生理功能 |
| 1.2.6 LAB EPS合成机制 |
| 1.3 转录组学分析 |
| 1.4 假肠膜明串珠菌EPS的研究现状 |
| 1.5 清酒乳杆菌EPS的研究现状 |
| 1.6 本课题研究的目的意义以及主要内容 |
| 1.6.1 本课题研究的目的意义 |
| 1.6.2 主要内容 |
| 1.6.3 技术路线 |
| 第2章 EPS产生菌株的筛选及鉴定 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 样品来源 |
| 2.2.2 仪器和设备 |
| 2.2.3 主要药品和试剂 |
| 2.2.4 培养基 |
| 2.2.5 主要溶液 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 产EPS菌株的筛选 |
| 2.3.2 菌株形态与鉴定 |
| 2.3.3 菌株生物学特性分析 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 测定EPS含量标准曲线的绘制 |
| 2.4.2 LAB EPS产生菌株的筛选以及菌落形态鉴定 |
| 2.4.3 显微形态观察 |
| 2.4.4 生理生化实验 |
| 2.4.5 菌株16S r DNA序列测定以及系统进化分析 |
| 2.4.6 清酒乳杆菌L3 和假肠膜明串珠菌PC生物学特性分析 |
| 2.5 本章小结 |
| 第3章 筛选菌株产糖条件的优化 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 菌株与培养基 |
| 3.2.2 仪器和设备 |
| 3.2.3 主要药品和试剂 |
| 3.2.4 相关软件 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 乳酸菌产EPS的时程曲线 |
| 3.3.2 单因素法优化两菌株EPS发酵条件 |
| 3.3.3 响应面法优化两菌株EPS发酵条件 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 菌株L3 产EPS的时程曲线 |
| 3.4.2 单因素法优化L3 EPS发酵条件 |
| 3.4.3 影响L3 EPS产量显着因素的确定 |
| 3.4.4 最陡爬坡实验 |
| 3.4.5 CCD方法对显着因素的进一步优化 |
| 3.4.6 菌株PC产EPS的时程曲线 |
| 3.4.7 影响菌株PC产糖的主要因素 |
| 3.4.8 最陡爬坡实验 |
| 3.4.9 中心组合实验 |
| 3.5 本章小结 |
| 第4章 假肠膜明串珠菌PC EPS的分离纯化以及结构分析 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.2.1 菌株与培养基 |
| 4.2.2 仪器和设备 |
| 4.2.3 主要药品和试剂 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 粗多糖的提取 |
| 4.3.2 Sephadex G-100 凝胶色谱柱分离纯化 |
| 4.3.3 紫外扫描光谱测定 |
| 4.3.4 化学组成分析 |
| 4.3.5 高效体积排阻色谱分析 |
| 4.3.6 气相色谱分析 |
| 4.3.7 扫描电镜分析 |
| 4.3.8 原子力显微镜分析 |
| 4.3.9 傅里叶红外光谱分析 |
| 4.3.10 核磁共振波谱分析 |
| 4.3.11 X射线衍射图谱分析 |
| 4.3.12 刚果红实验 |
| 4.3.13 β-消除反应 |
| 4.3.14 圆二色光谱分析 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 粗多糖的提取及Sephadex G-100 凝胶色谱分离纯化 |
| 4.4.2 PC EPS纯度鉴定 |
| 4.4.3 化学组成分析 |
| 4.4.4 分子量测定 |
| 4.4.5 单糖组成分析 |
| 4.4.6 宏观形貌分析 |
| 4.4.7 官能团分布分析 |
| 4.4.8 核磁共振波谱分析 |
| 4.4.9 结晶构型分析 |
| 4.4.10 多糖链构象分析 |
| 4.5 本章小结 |
| 第5章 假肠膜明串珠菌PC EPS的理化性质和生物活性分析 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 实验材料 |
| 5.2.1 菌株与培养基 |
| 5.2.2 仪器和设备 |
| 5.2.3 主要药品和试剂 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 TGA和 DSC曲线测定 |
| 5.3.2 水接触角测定 |
| 5.3.3 溶解指数测定 |
| 5.3.4 粒径和Zeta电位分析 |
| 5.3.5 特性粘度测定 |
| 5.3.6 表观粘度测定 |
| 5.3.7 乳化性能分析 |
| 5.3.8 牛奶凝结应用 |
| 5.3.9 体外抑菌性分析 |
| 5.3.10 体外益生性分析 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 热学性质分析 |
| 5.4.2 水溶解性分析 |
| 5.4.3 体系分散性和稳定性分析 |
| 5.4.4 特性粘度测定 |
| 5.4.5 流变学性质分析 |
| 5.4.6 乳化性能分析 |
| 5.4.7 在添加蔗糖的脱脂牛奶凝结中的应用 |
| 5.4.8 体外抑菌性分析 |
| 5.4.9 体外益生功能分析 |
| 5.5 本章小结 |
| 第6章 清酒乳杆菌L3 EPS的分离纯化以及结构分析 |
| 6.1 前言 |
| 6.2 实验材料与方法 |
| 6.2.1 菌株与培养基 |
| 6.2.2 仪器、药品与方法 |
| 6.3 结果和讨论 |
| 6.3.1 分离纯化 |
| 6.3.2 纯度鉴定 |
| 6.3.3 化学组成分析 |
| 6.3.4 分子量测定 |
| 6.3.5 单糖组成分析 |
| 6.3.6 宏观形貌分析 |
| 6.3.7 官能团分布分析 |
| 6.3.8 NMR图谱分析 |
| 6.3.9 多糖链结构分析 |
| 6.3.10 结晶构型分析 |
| 6.3.11 L3 EPS和 PC EPS分子结构对比 |
| 6.4 本章小结 |
| 第7章 清酒乳杆菌L3 EPS的理化性质和生物活性分析 |
| 7.1 前言 |
| 7.2 实验材料与方法 |
| 7.2.1 菌株与培养基 |
| 7.2.2 仪器、药品与方法 |
| 7.3 结果与讨论 |
| 7.3.1 热学性质分析 |
| 7.3.2 溶解性分析 |
| 7.3.3 体系分散性和稳定性分析 |
| 7.3.4 特性粘度测定 |
| 7.3.5 表观粘度稳定性分析 |
| 7.3.6 乳化性能分析 |
| 7.3.7 牛奶凝结实验 |
| 7.3.8 体外抑菌性分析 |
| 7.3.9 体外益生功能分析 |
| 7.3.10 L3 EPS和 PC EPS理化性质和生物活性对比 |
| 7.4 本章小结 |
| 第8章 产EPS L3 菌株的转录组学分析 |
| 8.1 前言 |
| 8.2 材料与方法 |
| 8.2.1 L3 菌株的培养和取样 |
| 8.2.2 L3 菌株的转录组测序 |
| 8.2.3 L3 菌株显着差异表达的nc RNA和靶标基因的互作网络分析 |
| 8.2.4 nc RNA共同调控靶标基因的筛选 |
| 8.2.5 LCA_RS09375 编码蛋白质的生物信息学分析 |
| 8.2.6 L3 菌株转录组的其它分析 |
| 8.2.7 L3 菌株转录组部分差异表达基因的q RT-PCR验证 |
| 8.2.8 同源建模 |
| 8.2.9 模型的评估 |
| 8.2.10 分子对接 |
| 8.3 结果与讨论 |
| 8.3.1 测序数据的过滤分析 |
| 8.3.2 基因表达和聚类分析 |
| 8.3.3 不同处理条件下L3 菌株中差异表达基因数目的分析 |
| 8.3.4 显着差异表达基因的GO功能分析 |
| 8.3.5 显着差异表达基因的生物通路分析 |
| 8.3.6 葡聚糖合成途径相关基因的表达分析 |
| 8.3.7 糖代谢关键酶的分子对接分析 |
| 8.3.8 尿苷一磷酸(UMP)合成代谢显着下调 |
| 8.3.9 脂肪酸合成代谢显着下调 |
| 8.3.10 培养基中添加蔗糖后nc RNA的表达分析 |
| 8.3.11 显着差异表达nc RNA的二级结构预测 |
| 8.3.12 显着差异表达nc RNA的靶标基因的分析 |
| 8.4 本章小结 |
| 第9章 结论与展望 |
| 9.1 结论 |
| 9.2 创新点 |
| 9.3 展望 |
| 参考文献 |
| 附录一 氨基酸序列 |
| 附录二 缩略表 |
| 攻读博士期间成果总结与参与项目 |
| 致谢 |
（8）大麦营养与功能组分的相关性分析以及紫粒大麦转录因子HvTTG1功能的初步性研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 大麦籽粒主要的营养组分 |
| 1.1.1 碳水化合物:纤维 |
| 1.1.2 蛋白质 |
| 1.1.3 脂质 |
| 1.1.4 灰分(矿质元素) |
| 1.2 植物营养素与籽粒颜色 |
| 1.3 大麦籽粒品质组分的分析的技术手段 |
| 1.3.1 液质连用精确分析的技术手段 |
| 1.3.2 近红外光谱仪 |
| 1.4 拟南芥作为验证基因功能的载体研究 |
| 1.5 本论文研究意义与技术路线 |
| 1.5.1 研究意义 |
| 1.5.2 技术路线 |
| 第二章 大麦营养与功能组分的相关性分析 |
| 前言 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.1.3 数据分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 大麦籽粒几种品质组分的种间变异 |
| 2.2.2 相关性分析 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 紫粒大麦多酚以及脂质组分的定性定量分析 |
| 前言 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 试验方法 |
| 3.1.3 材料脂质组学的分析 |
| 3.1.4 数据分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 紫粒与黄粒表儿茶素含量的差异性分析 |
| 3.2.2 紫粒与黄粒脂质组学的差异性分析 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 大麦紫粒颜色的遗传调控机制研究 |
| 前言 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验材料 |
| 4.1.2 试验方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 大麦候选基因Hv TTG1 的多态性与颜色、品质相关指标的关联 |
| 4.2.2 大麦群体Hv TTG1 的多态性与紫色种皮的关联性 |
| 4.2.3 拟南芥功能验证 |
| 4.3 讨论 |
| 第五章 总结和展望 |
| 5.1 总结 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
（9）Bacillus subtilis QM3对小麦种子萌发淀粉酶的影响及关键基因表达量研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 小麦种子萌发及影响因素 |
| 1.1.1 种子萌发 |
| 1.1.2 影响种子萌发的外部因素 |
| 1.1.3 影响种子萌发的内部因素 |
| 1.2 淀粉酶 |
| 1.2.1 α-淀粉酶 |
| 1.2.2 β-淀粉酶 |
| 1.2.3 极限糊精酶 |
| 1.3 淀粉酶同工酶研究现状 |
| 1.3.1 α-淀粉酶同工酶 |
| 1.3.2 β-淀粉酶同工酶 |
| 1.4 相关基因研究进展 |
| 1.4.1 α-淀粉酶基因 |
| 1.4.2 β-淀粉酶基因 |
| 1.5 微生物促进植物萌发生长的研究 |
| 1.5.1 微生物促进种子萌发 |
| 1.5.2 微生物促进植物生长 |
| 1.6 本文的研究目的和意义 |
| 1.7 技术路线图 |
| 2 B.subtilis QM3 对小麦种子萌发形态指标的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验方法 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 B.subtilis QM3 对小麦种子发芽率的影响 |
| 2.3.2 B.subtilis QM3 对小麦种子发芽势的影响 |
| 2.3.3 B.subtilis QM3 对小麦种子发芽指数的影响 |
| 2.3.4 B.subtilis QM3 对小麦种子芽长的影响 |
| 2.3.5 B.subtilis QM3 对小麦种子活力指数的影响 |
| 2.3.6 B.subtilis QM3 对小麦根部形态指标的影响 |
| 2.3.7 B.subtilis QM3 对小麦鲜重的影响 |
| 2.3.8 B.subtilis QM3 对小麦干重的影响 |
| 2.3.9 B.subtilis QM3 对小麦根冠比的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 3 B.subtilis QM3 对小麦种子萌发淀粉酶活性的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 实验方法 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 麦芽糖标准曲线 |
| 3.3.2 B.subtilis QM3 对小麦种子萌发α-淀粉酶活性的影响 |
| 3.3.3 B.subtilis QM3 对小麦种子萌发β-淀粉酶活性的影响 |
| 3.3.4 B.subtilis QM3 对小麦种子萌发总淀粉酶活性的影响 |
| 3.3.5 B.subtilis QM3 对小麦种子萌发极限糊精酶活性的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 结论 |
| 4 B.subtilis QM3 对小麦种子萌发淀粉酶同工酶的影响 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 实验材料 |
| 4.2.2 实验方法 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 B.subtilis QM3 对小麦种子萌发α-淀粉同工酶的影响 |
| 4.3.2 B.subtilis QM3 对小麦种子萌发β-淀粉同工酶的影响 |
| 4.3.3 B.subtilis QM3 对小麦种子萌发总淀粉酶同工酶的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 结论 |
| 5 B.subtilis QM3 对小麦种子萌发相关基因表达量的影响 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 实验材料 |
| 5.2.2 实验方法 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 小麦种子总RNA电泳检测结果 |
| 5.3.2 RNA浓度和纯度检测结果 |
| 5.3.3 基因实时荧光定量PCR检测的扩增曲线和溶解曲线 |
| 5.3.4 B.subtilis QM3 菌液对目的基因相对表达量的影响 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 结论 |
| 6 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
（10）基于SNP-KASP技术对啤酒花品种鉴定与纯度检测的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写词汇表 |
| 1 前言 |
| 1.1 啤酒花概述 |
| 1.2 啤酒花品种鉴定的主要方法 |
| 1.2.1 形态学标记 |
| 1.2.2 细胞学标记 |
| 1.2.3 生化标记 |
| 1.2.4 分子标记 |
| 1.3 第三代分子标记SNP分子标记检测方法分类 |
| 1.3.1 直接测序法 |
| 1.3.2 杂交法 |
| 1.3.3 基因芯片法 |
| 1.3.4 KASP基因分型技术 |
| 1.4 研究目的与意义 |
| 1.5 研究的主要内容 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料与试剂 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 仪器与设备 |
| 2.1.3 主要分析软件 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 SNP位点的初步筛选 |
| 2.2.2 SNP位点真实性验证与进一步筛选 |
| 2.2.3 基于SNP-KASP对预混样品检测 |
| 2.2.4 基于SNP-KASP对企业样品检测 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 SNP位点的初步筛选 |
| 3.2 SNP位点真实性验证与进一步筛选 |
| 3.2.1 引物设计 |
| 3.2.2 PCR扩增 |
| 3.2.3 SNP位点的验证与进一步筛选。 |
| 3.3 基于SNP-KASP对预混样品的检测 |
| 3.3.1 KASP引物验证 |
| 3.3.2 预混样品的检测 |
| 3.4 基于SNP-KASP对企业样品的检测 |
| 3.4.1 企业样品的真实性检测 |
| 3.4.2 企业样品的纯度检测 |
| 4 讨论与结论 |
| 4.1 讨论 |
| 4.2 结论 |
| 5 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 作者简历 |
四、PCR 应用于检测大麦麦芽纯度（论文参考文献）
- [1]甘蔗DNA分子指纹图谱研究进展[J]. 张慧,林萍萍,黄潮华,黄国强,徐良年,邓祖湖,张木清,赵新旺. 中国糖料, 2022(01)
- [2]利用InDel标记进行啤酒大麦黄花叶病抗性鉴定[J]. 徐肖,栾海业,杨红燕,黄煜韬,张英虎,臧慧,陶红,陈和,陈健,乔海龙,沈会权. 大麦与谷类科学, 2021(03)
- [3]葡萄KASP标记的开发及在种质资源鉴定中的应用[D]. 王富强. 中国农业科学院, 2021
- [4]啤酒糖化过程大麦麦芽阿拉伯木聚糖的降解[D]. 孙军勇. 江南大学, 2020
- [5]大麦籽粒蛋白质含量QGpc.ZiSc-2H位点的精细定位研究[D]. 赵海鹏. 甘肃农业大学, 2020(12)
- [6]基于高通量测序的大麦In Del标记开发及应用[J]. 徐婷婷,汪巧玲,邹淑琼,狄佳春,杨欣,朱银,赵涵,颜伟. 作物学报, 2020(09)
- [7]乳酸菌葡聚糖分子结构、理化性质及合成机制的研究[D]. 王斌斌. 天津大学, 2019(01)
- [8]大麦营养与功能组分的相关性分析以及紫粒大麦转录因子HvTTG1功能的初步性研究[D]. 赵慧燕. 上海海洋大学, 2019(02)
- [9]Bacillus subtilis QM3对小麦种子萌发淀粉酶的影响及关键基因表达量研究[D]. 刘荣霞. 山西师范大学, 2019(05)
- [10]基于SNP-KASP技术对啤酒花品种鉴定与纯度检测的研究[D]. 蒋培基. 四川农业大学, 2018(01)